熒光定量PCR法檢測丙型肝炎病毒核酸的臨床意義

王玉紅，胡曉芳，關(guān)慧霞，齊志丹，高瑞環(huán)，王 靜

（沈陽軍區(qū)總醫(yī)院 檢驗科，遼寧 沈陽110840）

丙型肝炎是一種主要經(jīng)血液傳播的疾病，HCV感染可導致肝臟慢性炎癥、壞死和纖維化，部分患者甚至可發(fā)展為肝硬化及肝癌［1］，對人類的健康和生命危害極大，已成為嚴重的社會和公共衛(wèi)生問題?？梗璈CV檢測可反映HCV的感染或既往感染，而HCV－RNA定量檢測是反映HCV復制的特征指標，是抗病毒治療的依據(jù)。本文對277例抗－HCV陽性患者同時進行HCV－RNA定量檢測，并進行對比分析，結(jié)果進一步表明二者同時檢測，對丙肝感染的診斷、抗病毒治療時機的選擇和療效觀察具有重要的意義，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 277例抗－HCV陽性血清標本均來自我院2008年12月至2010年12月門診及住院患者。

1.2 方法 抗－HCV采用ELISA法測定，試劑由廈門新創(chuàng)生物工程公司生產(chǎn)提供。HCV－RNA定量檢測采用實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應（FQ－RT－PCR）法，儀器為美國 ABI公司7300型熒光定量PCR儀，試劑由上?？迫A生物技術(shù)有限公司提供，所有標本嚴格按照試劑說明書操作及判定結(jié)果。

2 結(jié)果

277例抗－HCV 陽性患者中，有213例（76.90%）HCV－RNA定量結(jié)果≥1.0×103IU／ml，病毒含量在1.0×103～1.6×108IU／ml之間，有64例（23.10%）HCV－RNA 定量結(jié)果＜1.0×103IU／ml。

3 討論

本研究結(jié)果顯示277例抗－HCV陽性中，HCVRNA含量≥1.0×103IU／ml，占76.90%，比文獻報道60%－70% 略 高［2］。HCV－RNA 定 量 ＜1.0×103IU／ml的占23.10%。二者結(jié)果差異主要來自實驗方法學和臨床表現(xiàn)兩個方面，具體原因為：①抗－HCV采用ELISA法檢測，由于受方法學的影響，有非特異性反應可出現(xiàn)假陽性［3］。②標本不及時檢測或保存不當，標本本身或環(huán)境中的RNA降解酶使RNA降解，從而HCV－RNA含量的檢測結(jié)果出現(xiàn)假陰性［4］。③實時熒光定量PCR法檢測HCV－RNA含量，靈敏度雖然很高，但有一定的閾值，當患者體內(nèi)HCV－RNA病毒含量低于檢測下限［5］，也無法檢出。④當感染HCV患者接受抗病毒治療后，HCV－RNA復制受限或出現(xiàn)變異，HCVRNA亦無法檢出。⑤抗－HCV陽性僅提示有HCV感染或既往感染，當體內(nèi)HCV－RNA病毒被清除后，其抗體仍可持續(xù)1－10年［6］。⑥丙肝感染者體內(nèi)HCV－RNA病毒含量的高低，隨著病程變化，存在間隙性陰性［7］。

綜上所述，抗－HCV檢測雖然可間接反映HCV的感染或既往感染，但不能作為丙肝感染的診斷及抗病毒治療的依據(jù)。因此臨床對抗－HCV陽性患者必須進行HCV－RNA檢測，HCV－RNA定量檢測≥1.0×103IU／ml者可考慮HCV感染并選擇抗病毒治療；對抗－HCV陽性 HCV－RNA定量檢測＜1.0×103IU／ml患者必須定期復檢HCV－RNA，以關(guān)注病程的變化。即抗－HCV陽性患者同時進行HCVRNA定量檢測具有重要的臨床意義。

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