徐 劍 張永萍 程雙喜
(1.貴陽中醫(yī)學院藥物制劑實驗室,貴州 貴陽 550002; 2.貴陽中醫(yī)學院06級藥物制劑班,貴州 貴陽 550002)
頭花蓼為蓼科植物頭花蓼Polygonum capitatum Buch.-Ham.ex D.Don的干燥全草,又名四季紅,是貴州少數(shù)民族用藥,用于痢疾,腎盂腎炎,膀胱炎,尿路結石,盆腔炎,前列腺炎,風濕痛,跌撲損傷,瘡瘍濕疹[1]。本試驗為微波提取頭花蓼中沒食子酸在工業(yè)生產(chǎn)中的應用,提供了試驗數(shù)據(jù)。
1.1 儀器:WND-2000型高速中藥粉碎機(浙江省蘭溪市偉能達電器有限公司);AUY220型分析天平(日本島津);Waters 515型高效液相色譜儀(美國WATERS,威瑪龍色譜工作站);WBZ-2型微波真空干燥機(貴陽新奇微波工業(yè)有限責任公司)。
1.2 試劑:沒食子酸對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號:1107702005110);娃哈哈純凈水(杭州娃哈哈有限公司);色譜甲醇(天津市科密歐化學試劑有限公司);頭花蓼藥材經(jīng)貴陽中醫(yī)學院王祥培教授鑒定為蓼科植物頭花蓼Polygonum capitatum Buch.- Ham.ex D.Don。
2.1 色譜條件:色譜柱Diamonsil C-18柱(250×4.6mm,5μm),甲醇 - 0.1% 磷酸溶液(10:90)為流動相,柱溫30℃,流速 1.0 ml/min,檢測波長為 270nm[2]。
2.2 標準曲線的制備:精密吸取沒食子酸對照品溶液2、4、6、8、10、12ul,按色譜條件進樣測定,以峰面積(Y)為縱坐標,進樣量為橫坐標進行線性回歸,回歸方程為Y=8.05×103X+7.32×102(r=0.9999),結果表明,沒食子酸在0.082~0.490μg范圍內,與峰面積具有良好的線性關系。
2.3 供試溶液制備:將提取藥液濃縮至一定體積,放冷,過濾,即得。
2.4 微波提取[3~5]
2.4.1 藥材粒度的選擇 :將頭花蓼放入高速中藥粉碎機中打成粉,分別過20目,40目,60目,80目,100目,120目篩,分別加入10倍量的水,于200W功率微波提取5min,藥液照供試溶液制備,測定含量。結果表明:60目藥粉所含的有效成分最高。
表1 提取粒度的選擇
2.4.2 提取火力的選擇:取60目的篩藥粉適量,加入10倍量的水,分別用100W,200W,400W,600W功率微波提取10min,藥液照供試溶液制備,測定含量。見表2,結果表明:200W功率提取效率最高。
表2 提取火力的選擇
2.4.3 提取時間的選擇:取60目的篩藥粉適量,加入10倍量的水,于 200W 功率微波分別提取 5、10、15、20、25、30min,藥液照供試溶液制備,測定含量,見表3,結果表明:10min提取有效成分最高。
表3 提取時間的選擇
2.4.4 提取固液比的選擇:取60目的篩藥粉適量,分別加入6、8、10、12、14倍的水,于200W 功率微波分別提取10min,于200W功率微波分別提取,見表4,結果表明:液料比為1:10時提取有效成分最高。
表4 提取固液比的選擇
本研究通過單因素試驗,分別考察了微波提取的主要影響因素,結果表明,提取時間為10min、微波功率為200W、液料比10:1、藥材料粒度60目時,提取效率較高。采用微波提取頭花蓼中沒食子酸,可避免長時間高溫高壓條件下沒食子酸的分解,故與傳統(tǒng)提取方法相比,微波提取具有速度快、能耗小等特點,適合于熱不穩(wěn)定性組分的提取。
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