吳林菁 王祥培 吳紅梅 楊 燁 徐 鋒
(貴陽中醫(yī)學院,貴州 貴陽 550002)
頭花蓼為蓼科蓼屬植物頭花蓼(Polygonum capitatum Buch.-Ham ex D.Don)的干燥全草或地上部分,為貴州苗族用藥,具有清熱利濕,解毒止痛,活血散瘀以及利尿通淋之功效,主治泌尿系統(tǒng)感染、血尿、濕疹、腎盂腎炎等癥[1]。目前,苗藥頭花蓼與其易混淆品頭狀蓼Polygonum nepalense Meisn.的鑒別研究主要采用高效液相色譜法,并且它們之間的峰數、相對保留時間有明顯的差異[2]。但頭花蓼的紫外光譜特征與其易混淆品是否有差異,目前未見研究報道。為了豐富苗藥頭花蓼的鑒別方法,本文采用紫外譜線組法對苗藥頭花蓼和頭狀蓼進行研究,以期為頭花蓼藥材與其混淆品的鑒別提供參考,也為苗藥頭花蓼進一步研究和開發(fā)奠定基礎。
1.1 藥材:頭花蓼 Polygonum capitatum Buch.-Ham.ex D.Don與頭狀蓼Polygonum nepalense Meisn.均采自四川峨眉山。均經鑒定并由成都中醫(yī)藥大學萬德光教授核定。
1.2 儀器及試劑:貝克曼DU-70可見-紫外分光光度計,PerkinElmer Lambda 35可見-紫外分光光度計,石油醚、氯仿、無水乙醇、KBr、甲醇為分析純,水為重蒸水,其它試劑均為分析純。
2.1 供試品溶液的制備
2.1.1 水、無水乙醇、氯仿、石油醚提取液的制備:精密稱取頭花蓼、頭狀蓼細粉各4份,每份0.5g,置50 ml碘量瓶中,分別加入蒸餾水、無水乙醇、氯仿、石油醚各20ml,密塞,室溫放置,浸泡過夜,過濾,即得。濾液供可見-紫外光譜鑒別用。
2.1.2 甲醇提取液的制備:精密稱取頭花蓼、頭狀蓼細粉0.5g,置50mL量瓶中,加甲醇至刻度,密塞,靜置過夜,超聲提取30min,濾過,即得。濾液供可見-紫外光譜鑒別用。
2.2 測定方法
2.2.1 水、無水乙醇、氯仿、石油醚提取液的測定:提取液用相應的溶劑適當稀釋后,置石英比色杯中,以相應溶劑做空白對照,在可見-紫外分光光度計上掃描。
2.2.2 甲醇提取液的測定:吸取濾液2ml分別置于25ml容量瓶中,分別加入60%乙醇至6.0ml,再分別加入3.0ml0.1mol/LAlCl3、5.0ml1.0mol/LKAc 溶液,加 60% 乙醇稀釋至刻度,搖勻,放置40min。以第一瓶為空白溶液,在波長300~700nm進行掃描,記錄色譜圖。
2.3 實驗結果
利用切線作圖確定并讀取最大吸收峰位值,以峰位值、峰數目作為該溶劑紫外光譜譜線組的光譜特征數據。頭花蓼及頭狀蓼可見-紫外譜線組譜線最大吸收峰數目及峰位值見表1,見圖1~7。
圖1 頭花蓼水提液的紫外光譜圖
圖2 頭狀蓼水提液的紫外光譜圖
圖3 頭花蓼無水乙醇提取液的紫外光譜圖
圖4 頭狀蓼無水乙醇提取液的紫外光譜圖
表1 頭花蓼及頭狀蓼的可見-紫外光譜特征(nm)(n=3)
圖5 頭花蓼與頭狀蓼氯仿提取液的紫外光譜圖
圖6 頭花蓼與頭狀蓼石油醚提取液的紫外光譜圖
圖7 頭花蓼與頭狀蓼顯色后的紫外光譜圖
紫外光譜的特征是由化合物的結構所確定,不同品種、不同溶劑其峰形、峰位、峰數目各不相同,可用來區(qū)分鑒別中藥材。在使用紫外光譜鑒別中藥材時發(fā)現,一些親緣關系較近的藥材,由于成分相差不大,用通常的紫外光譜法難以達到鑒別的目的,則可采用多溶劑紫外光譜法,即分別檢測數種不同極性溶劑提取液的紫外吸收,通過綜合比較其圖譜的差異,亦可獲得較好的鑒別效果。
從紫外光譜實驗結果來看,頭花蓼的水提取液及無水乙醇提取液與頭狀蓼的水提取液及無水乙醇提取液的紫外光譜最大吸收峰數目及峰位置差異不明顯,只有兩者的氯仿和石油醚提取液這2條紫外譜線圖象、最大吸收峰數目和峰位值有差異,各具有特征性,具有明顯的鑒別指標,達到了鑒別藥材的目的。
經實驗研究發(fā)現,頭花蓼與頭狀蓼的甲醇提取液紫外光譜圖相同,但顯色后,頭花蓼在可見光區(qū)412nm處有一明顯的吸收峰,可作為鑒定的依據。
[1]貴州省藥品監(jiān)督管理局.貴州省中藥材、民族藥材質量標準[S].貴陽:貴州科技出版社,2003:147.
[2]吳紅梅,王祥培,萬德光.頭花蓼和頭狀蓼的液相色譜鑒別研究[J].貴陽中醫(yī)學院學報,2008,30(2):72-73.