舒爾通合劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

葉延程，趙良存

(甘肅省武威腫瘤醫(yī)院，甘肅武威 733000)

舒爾通合劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

葉延程，趙良存

(甘肅省武威腫瘤醫(yī)院，甘肅武威 733000)

目的：建立舒爾通合劑的質(zhì)量控制方法。方法：對(duì)舒爾通合劑中黃芩、苦參進(jìn)行薄層色譜鑒別;采用HPLC法對(duì)黃芩苷進(jìn)行含量測(cè)定。結(jié)果：薄層色譜斑點(diǎn)清晰，陰性對(duì)照無干擾;黃芩苷進(jìn)樣量在0.082 2～1.644 0 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.999 5)，平均回收率為 98.78%，RSD 為1.05%(n=9)。結(jié)論：本研究建立的TLC和HPLC法專屬性強(qiáng)、準(zhǔn)確度高、重復(fù)性好，可用于舒爾通合劑的質(zhì)量控制。

舒爾通合劑/藥效學(xué);質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);HPLC;黃芩苷

舒爾通合劑是院內(nèi)自行研制的醫(yī)院制劑，處方由黃芩、苦參、板藍(lán)根、白鮮皮、夏枯草、黃藥子、拳參、敗醬草、甘草9味中藥組成，具有清熱解毒、化瘀散結(jié)功能，用于肝氣郁結(jié)、火毒內(nèi)蘊(yùn)所致的食管和賁門上皮增生、急性扁桃體炎。為了有效控制制劑質(zhì)量，本研究采用薄層色譜法對(duì)制劑中黃芩、苦參進(jìn)行了定性分析，并采用HPLC法對(duì)黃芩苷進(jìn)行含量測(cè)定。

1 藥品、試劑與儀器

舒爾通合劑，甘肅省武威腫瘤醫(yī)院制劑室提供，批 號(hào) 20100805，20100815，20100922，20101007，20110125。黃芩對(duì)照藥材(批號(hào)120955－200607)、苦參對(duì)照藥材(批號(hào)121019－200705)、苦參堿對(duì)照品(批號(hào)110805－200507)、黃芩苷對(duì)照品(批號(hào)110715－200815)，均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供;陰性對(duì)照樣品，自制;所用藥材均符合《中華人民共和國(guó)藥典》(一部)2010版有關(guān)要求。硅膠G薄層板，青島勝海化工有限公司產(chǎn)品;水為超純水;其他試劑均為分析純。SSI PC2000單泵高效液相色譜儀，天津市蘭博實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備有限公司產(chǎn)品;N－2000工作站;浙江大學(xué)智能信息公司產(chǎn)品;TG328B分析天平，上海天平儀器廠產(chǎn)品。

2 方法與結(jié)果

2.1 薄層色譜鑒別

2.1.1 黃芩的鑒別

取本品及陰性對(duì)照樣品各2 mL，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1～2，用乙酸乙酯提取2次，每次10 mL，合并提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液及陰性樣品溶液。另取黃芩對(duì)照藥材2 g，加水煎煮30 min，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取黃芩苷對(duì)照品，加甲醇制成每mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2010版一部附錄ⅥB)試驗(yàn)，吸取上述4種溶液各10 μL，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯－丁酮－甲酸－水(5∶3∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10 g/L三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn);陰性對(duì)照色譜無干擾，見圖1。

圖1 黃芩薄層色譜圖

2.1.2 苦參的鑒別

取本品及陰性對(duì)照樣品各5 mL，加濃氨試液2 mL，用三氯甲烷振搖提取2次，每次20 mL，合并提取液，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液及陰性樣品溶液。另取苦參對(duì)照藥材2 g，加水20 mL，加熱回流30 min，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取苦參堿對(duì)照品，加甲醇制成每mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2010版一部附錄ⅥB)試驗(yàn)，吸取上述4種溶液各10 μL，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯－丙酮－乙酸乙酯－濃氨試液(2∶3∶4∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn);陰性對(duì)照色譜無干擾，見圖2。

圖2 苦參薄層色譜圖

2.2 黃芩苷含量測(cè)定［1］

2.2.1 色譜條件

色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，Kromasil C18色譜柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流動(dòng)相為甲醇 －水 －磷酸(47∶53∶0.2);體積流量1.0 mL/min;柱溫為室溫;檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm。

2.2.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取在60℃減壓干燥4 h黃芩苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每mL含62.2 μg的溶液，即得。

2.2.3 供試品溶液的制備

取本品2 mL，加700 g/L乙醇40 mL，振搖，濾過，濾液置100 mL量瓶中，用少量700 g/L乙醇洗滌容器和殘?jiān)?，洗液慮入同一量瓶中，加700 g/L乙醇至刻度，搖勻。精密量取1 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

2.2.4 陰性樣品溶液的制備

取處方中除黃芩以外的其他藥材，按舒爾通合劑處方和制法制備不含黃芩的陰性樣品。取陰性樣品，按供試品溶液項(xiàng)下方法操作制得陰性樣品溶液。

2.2.5 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

分別精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性樣品溶液各10 μL，照2.2.1 色譜條件，注入液相色譜儀，測(cè)定，理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2500，保留時(shí)間約13 min。結(jié)果表明，在此色譜條件下，黃芩苷與其他成分有很好的分離度，所得色譜圖見圖3。

圖3 高效液相色譜圖

2.2.6 陰性對(duì)照試驗(yàn)

精密吸取陰性樣品溶液 10 μL，照2.2.1色譜條件測(cè)定。結(jié)果陰性樣品溶液與供試品、對(duì)照品溶液對(duì)比，其陰性樣品在對(duì)照品相應(yīng)位置未出現(xiàn)峰，未檢出黃芩苷，說明陰性樣品中除黃芩外的其他藥物對(duì)測(cè)定無干擾。

2.2.7 線性關(guān)系考察

精密稱取黃芩苷對(duì)照品8.22 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解，并稀釋至刻度，搖勻，備用。精密吸取上述對(duì)照品溶液各 0.5，1.0，3.0，5.0，7.0，10.0 mL，分別置10 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，在上述色譜條件下各進(jìn)樣10 μL，測(cè)定峰面積。以峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：Y=4 090 260X+3 054，相關(guān)系數(shù)r=0.999 5。結(jié)果表明，黃芩苷進(jìn)樣量在0.082 2 ～1.644 0 μg之間呈良好線性關(guān)系。

2.2.8 精密度試驗(yàn)

精密吸取黃芩苷對(duì)照品溶液10 μL，重復(fù)進(jìn)樣6 次，峰面積分別為 2 569 628，2 536 585，2 528 695，2 537 821，2 607 345，2 503 105，平均值為 2 547 196，RSD為1.43%(n=6)。結(jié)果表明，該方法精密度良好。

2.2.9 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取舒爾通合劑樣品(批號(hào)20100805)制成供試品溶液，分別于 0，2，4，8，24 h 各進(jìn)樣 1 次，每次10 μL。峰面積分別為 1 130 857，1 120 577，1 119 585，1 122 924，1 119 439，平均值 1 122 676，RSD為0.43%。結(jié)果表明：供試品溶液在24 h內(nèi)性質(zhì)穩(wěn)定。

2.2.10 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

將同一批舒爾通合劑樣品(批號(hào)20100805)平行取樣6份，按2.2.3項(xiàng)下操作制備供試品溶液6份，每份每次進(jìn)樣10 μL，測(cè)得樣品含量分別為：13.757 8，13.568 2，13.648 5，13.578 1，13.756 2，13.801 8 g/L，平均含量為 13.685 1 g/L，RSD 為0.73%(n=6)。結(jié)果表明：本法重現(xiàn)性良好。

2.2.11 加樣回收率試驗(yàn)

精密量取已知含量的舒爾通合劑2 mL(黃芩苷含量為 13.685 1 g/L，批號(hào) 20100805)，9 份，分為3組，每份分別加黃芩苷對(duì)照品溶液(16.825 2 g/L)1，3，5 mL，按2.2.3 項(xiàng)下操作制備供試品溶液。分別各進(jìn)樣10 μL，測(cè)定，記錄色譜圖，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果 n=9

2.2.12 樣品含量測(cè)定

對(duì)5批樣品分別測(cè)定了黃芩苷含量，每批重復(fù)2次，結(jié)果見表2。

表2 樣品黃芩苷含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

本研究結(jié)果顯示：黃芩、苦參的薄層定性鑒別分離度好，專屬性強(qiáng)。

黃芩為本制劑處方中的主要藥味，其主要有效成分為黃芩苷，中藥復(fù)方制劑以黃芩苷為質(zhì)控指標(biāo)的文獻(xiàn)報(bào)道較多［2－3］，測(cè)定其含量對(duì)控制舒爾通合劑質(zhì)量有重要意義。本研究中采用高效液相色譜法測(cè)定本品黃芩苷含量，經(jīng)多次試驗(yàn)，黃芩苷含量測(cè)定方法比較理想，重復(fù)性好，回收率符合要求，陰性樣品對(duì)測(cè)定無干擾，試驗(yàn)方法簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，可有效控制本品質(zhì)量。

有文獻(xiàn)報(bào)道［4］，不同產(chǎn)地黃芩中黃芩苷含量差異較大，對(duì)此我們對(duì)不同產(chǎn)地、批次的黃芩在投料生產(chǎn)過程中進(jìn)行追蹤并計(jì)算了5批樣品的黃芩苷轉(zhuǎn)移率，黃芩苷轉(zhuǎn)移率最低為85.45%，黃芩苷轉(zhuǎn)移率有待于在工藝研究中進(jìn)一步探索。5批樣品中黃芩苷的含量在12.4 ～22.7 g/L 之間，最低含量為12.4 g/L，按《中國(guó)藥典》2010版一部規(guī)定黃芩藥材中黃芩苷含量不得少于9.0%［5］，根據(jù)其處方量及制法，按中國(guó)藥典最低限量及黃芩苷轉(zhuǎn)移率計(jì)下幅20%，同時(shí)考慮各種因素的影響，保證正常工藝條件下的制劑質(zhì)量合格，故將舒爾通合劑中含黃芩以黃芩苷(C21H18O11)計(jì)，不得少于10.0 g/L。

［1］楊瑞芬，彭家鋼，饒澤萍.高效液相色譜法測(cè)定雙黃連口服液中綠原酸和黃芩苷的含量［J］.中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2006，26(2)：240.

［2］李偉佳，王強(qiáng).HPLC測(cè)定4種中藥制劑中梔子苷和黃芩苷的含量［J］.中成藥，2007，29(8)：1177 －1179.

［3］申去非，張莉，朱鐵梁，等.黃芩苷含量測(cè)定研究方法進(jìn)展［J］.中醫(yī)藥信息，2009，26(4)：14 －16.

［4］薛黎明，秦雪梅，張麗增.不同產(chǎn)地黃芩藥材的黃芩苷含量測(cè)定及指紋圖譜研究［J］.中成藥，2008，30(1)：10－13.

［5］中華人民共和國(guó)藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：一部［M］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：282－283.

R284

B

10.3969/j.issn.1001 －6910.2012.09.032

1001－6910(2012)09－0064－04

葉延程(1969－)，男(漢族)，甘肅金昌人，博士，主任藥師，主要從事臨床藥學(xué)及中藥制劑。

2011－11－01;

2012－02－03

(編輯 陶 珠)

·實(shí)驗(yàn)研究·