免疫散射比濁法和免疫透射比濁法測(cè)定免疫球蛋白結(jié)果比較

劉少華，鄧文平，李 燕

(重慶市涪陵中心醫(yī)院檢驗(yàn)科 408000)

人體免疫球蛋白(Ig)測(cè)定，是檢查人體免疫功能狀態(tài)最直接而簡(jiǎn)單的方法，只有選擇好的檢測(cè)方法才能保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。本文選用Olympus AU640和Beckman Immage 800特定蛋白儀對(duì)252名健康成人進(jìn)行了Ig測(cè)定，并同時(shí)IgG高值和低值進(jìn)行了測(cè)定。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2010年10～12月在本院進(jìn)行健康體檢的單位職工252名，其中，男146名，女106名；年齡20～60歲。排除系統(tǒng)性疾病和感染性疾病。

1.2方法 健康體檢人群中抽空腹靜脈血3 mL，置于不抗凝無(wú)菌試管中，3 500 r/min，離心5 min，收集血清-20 ℃保存。免疫球蛋白定量測(cè)定試劑盒分為兩類；一類是Beckman Immage 800特定蛋白儀及相關(guān)配套試劑，測(cè)定方法為免疫散射比濁法，一類是Olympus AU640全自動(dòng)生化分析儀上使用北京利德曼生化股份有限公司生產(chǎn)的Ig測(cè)定試劑，測(cè)定原理為免疫透射比濁法。所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。Ig高值對(duì)照和低值對(duì)照，選用住院患者在檢查Ig時(shí)結(jié)果中IgG>20.0 g/L和IgG<4.0 g/L各20份，分別作為高值和低值血清對(duì)照。同時(shí)選用腦脊液10份作IgG測(cè)定。Beckman Immage 800特定蛋白儀配套試劑提供的健康人群參考范圍，IgG:7.0～16.2 g/L，IgM:0.6～2.63 g/L，IgA:0.68～4.00 g/L。

2 結(jié) 果

2.1兩種方法下健康體檢人群的IgG、IgA、IgM水平 分別用Olympus AU640和Beckman Immage 800特定蛋白儀對(duì)252名健康體檢人群進(jìn)行了IgG、IgA、IgM測(cè)定，結(jié)果見表1。IgG、IgM和IgA 3種Ig測(cè)定結(jié)果顯示,用免疫透射比濁法和用免疫散射比濁法測(cè)定，其結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表1 健康成人IgG測(cè)定結(jié)果(±s，g/L)

表2 IgG高值和低值測(cè)定結(jié)果(±s，g/L)

2.2測(cè)定IgG高值和低值水平 同樣用上述方法測(cè)定IgG>20.0 g/L和IgG<4.0 g/L患者血清各20份，兩種方法測(cè)定線性都比較寬，在低值和高值處都能夠進(jìn)行測(cè)定結(jié)果的顯示。結(jié)果見表2。

2.3腦脊液測(cè)定結(jié)果 見表3。由表3可以看出，對(duì)于一些微量的Ig標(biāo)本，用免疫散射比濁法可以實(shí)現(xiàn)測(cè)定，而用免疫透射比濁法測(cè)定就可能會(huì)漏掉一些陽(yáng)性結(jié)果表現(xiàn)。

表3 10例腦脊液IgG測(cè)定結(jié)果(±s，g/L)

-：無(wú)數(shù)據(jù)。

3 討 論

Ig是由漿細(xì)胞合成和分泌的一組具有多方面微生物活性的蛋白質(zhì)分子，是機(jī)體內(nèi)體液免疫的重要效應(yīng)分子，是具有抗體活性，能與抗原特異性結(jié)合，激活補(bǔ)體等功能的蛋白質(zhì)，按照組成結(jié)構(gòu)不同可將其分為IgG、IgM、IgA、IgD、IgE 5類，其中IgD、IgE含量較少，臨床上常用IgG、IgM、IgA水平測(cè)定作為評(píng)定機(jī)體體液免疫功能的一項(xiàng)重要指標(biāo)，其含量可因疾病而大量增減。免疫比濁法是目前臨床上測(cè)定血清IgA、IgG和IgM的主要方法，包括透射比濁法和散射比濁法。兩種方法的測(cè)定原理和儀器不同，其結(jié)果有所差異。免疫透射比濁法主要檢測(cè)抗原-抗體復(fù)合物所形成的濁度，本實(shí)驗(yàn)中用Olympus AU640全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)，該分析儀具有處理能力大、測(cè)試速度較高、標(biāo)本用量少的優(yōu)點(diǎn)；免疫散射比濁法是從不同角度測(cè)量抗原-抗體復(fù)合物微粒的散射光強(qiáng)度和濁度的變化，用Beckman Immage 800蛋白分析儀檢測(cè)。一般認(rèn)為散射比濁法的靈敏度高、重復(fù)性好,但國(guó)內(nèi)研究顯示散射比濁法和透射比濁法準(zhǔn)確性、精密度均比較好[1-2]。

本研究比較了免疫散射比濁法和免疫透射比濁法測(cè)定IgG、IgM、IgA的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其偏差位于臨床可接受范圍，說(shuō)明二者均為IgG、IgA、IgM 的可靠測(cè)定方法，與國(guó)內(nèi)研究結(jié)果相同。全自動(dòng)生化分析儀的應(yīng)用,使Ig的檢測(cè)速度大為加快，測(cè)定費(fèi)用略微偏低，可用于常規(guī)人群的體檢和一般項(xiàng)目檢查。

本研究結(jié)果顯示，腦脊液Ig測(cè)定結(jié)果中使用免疫散射比濁法測(cè)定出結(jié)果較免疫透射比濁法更多，說(shuō)明抗原-抗體反應(yīng)形成的復(fù)合物顆粒大小不一，對(duì)于濁度的形成幫助不一，透射比濁法測(cè)定的是濁度的改變，對(duì)于微小顆粒產(chǎn)生的濁度反應(yīng)微弱，而散射比濁法多測(cè)定了復(fù)合物對(duì)散射光的改變，微小顆粒的影響就比較明顯。故測(cè)定精準(zhǔn)度更高的特定蛋白分析儀如Beckman Immage 800，其受干擾因素較少，對(duì)于疾病的治療效果監(jiān)測(cè)和藥物治療效果的監(jiān)測(cè)則更好[3-4]。本實(shí)驗(yàn)也提示對(duì)于常規(guī)檢查中Ig測(cè)定可選用免疫透射比濁法進(jìn)行，而對(duì)于需要測(cè)定更準(zhǔn)確的臨床治療過程中的Ig測(cè)定，則選用免疫散射比濁法測(cè)定更好。

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