高效液相色譜法分析丹參水溶性成分研究概況

季慶亮

(哈藥集團(tuán)中藥二廠，黑龍江 哈爾濱 150078)

中藥丹參為唇形科鼠尾草屬植物丹參的干燥根及根莖，是常用的活血化瘀中藥。丹參活性成分主要分為脂溶性成分和水溶性成分兩類。國內(nèi)外對丹參及其同屬植物的脂溶性成分進(jìn)行了大量研究，然而中醫(yī)傳統(tǒng)用藥方法是用水煎劑，即丹參的水溶性部位。所以研究丹參水溶性成分更有意義?，F(xiàn)就目前高效液相色譜法分析丹參水溶性成分方面的研究作一綜述。

1 丹參素的HPLC測定

如注射用丹參（凍干）中丹參素鈉的測定，就是以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以二甲基甲酰胺-甲醇-水-冰醋酸（4：4：90：2）為流動相；檢測波長為281nm。代彩芹等報道，用反相HPLC法，以甲醇-0.4%醋酸(5:95)作流動相，檢測波長281 nm。結(jié)果樣品平均加樣回收率為99.71%，RSD為0.96%。王杰民等采用以甲醇和0.25%醋酸溶液分別為流動相A和B的梯度洗脫技術(shù)，YWGC18H37色譜柱，對羥基苯甲酸為內(nèi)標(biāo)，280nm波長處檢測。結(jié)果線性關(guān)系良好，丹參素的回收率為104.0%±1.7%。李正國等以水-甲醇-冰醋酸（94：4：0.6）為流動相，用 C18-ODS柱測定丹紅注射液中丹參素的含量，檢測波長278nm,外標(biāo)法定量分析,結(jié)果樣品平均加樣回收率為100.90%,RSD為1.41%。余練康等以甲醇-0.2mol/L的醋酸銨(12:88)為流動相(硫酸調(diào)節(jié)PH2.2)，測定樂脈顆粒中丹參素的含量。

2 原兒茶醛的HPLC測定

向大雄等采用YWG-C18反相柱，甲醇-乙腈-冰乙酸-水（15：5：1：84）為流動相測定了不同丹參制劑中原兒茶醛的含量。王凌等以甲醇-水(15:85)為流動相(磷酸調(diào)節(jié)PH2.45)，檢測波長281nm,用C18-ODS柱測定原兒茶醛含量。

3 丹酚酸B的HPLC測定

在2005版藥典中丹參藥材中丹酚酸B的測定是以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-甲酸-水（30：10：1：59）為流動相；檢測波長為286nm。測定丹酚酸B含量。王鳳美等采用色譜柱Alltima C18，以乙腈-0.5%冰醋酸水溶液為流動相,進(jìn)行梯度洗脫，流速1ml/min，檢測波長290nm。程顯隆等利用ODSC18柱,采用甲醇-乙腈-36%乙酸-水（33：12：1：55）為流動相。游勇基等采用甲醇-5%冰醋酸進(jìn)行梯度洗脫。曹楓等采用甲醇-水（用甲酸調(diào)PH至2.5）作流動相，體積比為83：117，測定丹參三七配伍水煎液中丹酚酸B的含量。

4 多種組分的HPLC測定

張文婷等以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，用甲醇-0.5%醋酸溶液(20:80)為流動相,檢測波長為280nm，測定丹參水溶性制劑中丹參素和原兒茶醛含量，兩成分分離良好。王志平等以甲醇-冰醋酸-水（5：1：95）為流動相,檢測波長為280nm，檢測了丹參提取液的樹脂吸附及醇沉工藝前后丹參素和原兒茶醛含量的變化，丹參素和原兒茶醛的保留時間分別為5min和8min，與其他峰分開。

測定丹參提取物中丹參素、原兒茶醛和丹酚酸B的含量，張文生等采用Alltima C18柱，乙腈和冰醋酸-水（1：25）為流動相，進(jìn)行梯度洗脫，結(jié)果是三種成分均出現(xiàn)較好的峰。李向軍等則采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，用乙腈-1%冰乙酸 (21:79)為流動相,檢測波長為281nm。金樟照等采用甲醇（A）-0.5%冰醋酸水溶液（B）為流動相，進(jìn)行程序梯度洗脫：0-60min A體積分?jǐn)?shù)由10%線性改變至60%，60-80min A體積分?jǐn)?shù)由60%線性改變至100%，檢測波長為280nm。

游勇基等采用HypersilC18柱,以甲醇（A）-5%冰醋酸（B）為流動相，進(jìn)行梯度洗脫：在0-5min,B體積分?jǐn)?shù)為90%,5-10 minB體積分?jǐn)?shù)由90%線性改變至65%，10-20min維持B體積分?jǐn)?shù)為65%，檢測波長為281nm,對羥基苯甲酸作為內(nèi)標(biāo)物，同時測定了丹參注射劑中的丹參素、原兒茶酸、原兒茶醛和丹酚酸B四種水溶性成分的含量，分離效果好。

黃煉棟采用RP-HPLC法測定丹參培養(yǎng)物中水溶性酚酸類化合物迷迭香酸和紫草酸B的含量。在Nova pak C18色譜柱上，以甲醇-乙腈-水（37：1：62），甲酸調(diào) PH 至 2.67 為流動相，檢測波長為280nm,可使兩組分完全分離。

綜上所述，本文介紹了目前高效液相色譜法分析丹參水溶性成分方面的研究進(jìn)展。丹參水溶性成分在丹參的作用中占重要地位，在采用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)方法的基礎(chǔ)上，隨著對丹參活性成分及其藥理作用等方面研究的深入，我們有理由相信，丹參這味傳統(tǒng)而古老的中藥必將具有更廣闊的應(yīng)用前景。