黃芪水提取液對(duì)小鼠抗疲勞作用及ANP分泌的影響

李大勇 賀永貴 劉麗萍 崔 勛,3

(1.延邊大學(xué)體育學(xué)院,吉林延吉 133002;2.延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)部基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)與病理生理學(xué)教研部,吉林延吉 133002;3.長(zhǎng)白山生物資源與功能分子教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,吉林延吉 133002)

黃芪水提取液對(duì)小鼠抗疲勞作用及ANP分泌的影響

李大勇1賀永貴2劉麗萍2崔 勛2,3

(1.延邊大學(xué)體育學(xué)院,吉林延吉 133002;2.延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)部基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)與病理生理學(xué)教研部,吉林延吉 133002;3.長(zhǎng)白山生物資源與功能分子教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,吉林延吉 133002)

觀察黃芪水提取液對(duì)小鼠的抗疲勞作用和對(duì)血清心房鈉尿肽(ANP)含量的影響。方法:將篩選出的24只昆明種小鼠隨機(jī)分成黃芪水提取液組和對(duì)照組,每組12只。黃芪水提取液組灌胃給藥劑量為24g/kg(相當(dāng)于生藥量),對(duì)照組灌胃等量生理鹽水。分別灌胃3周,末次給藥1 h后觀察小鼠負(fù)重游泳力竭時(shí)間和檢測(cè)血清中的ANP含量、SOD活性、MDA含量。結(jié)果:灌胃黃芪水提取液組小鼠負(fù)重游泳力竭時(shí)間明顯延長(zhǎng)(與對(duì)照組比較,P＜0.01),血清ANP含量顯著增加(與對(duì)照組比較,P＜0.01)、SOD活性明顯升高(與對(duì)照組比較,P＜0.01)、MDA含量顯著降低(與對(duì)照組比較,P＜0.05)。結(jié)論:黃芪水提取液提高小鼠的抗疲勞能力,其作用與增加ANP分泌和提高抗自由基能力有關(guān)。

黃芪;抗疲勞;心房鈉尿肽;超氧化物歧化酶;丙二醛

黃芪始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,別名有王孫、百藥錦、黃耆、箭芪等,位列補(bǔ)藥之長(zhǎng),其主要成分包括黃芪皂苷、黃芪多糖、黃酮類化合物等,味甘,微溫,具有益氣補(bǔ)中、補(bǔ)氣固表、利尿排毒、斂瘡生肌等作用[1],被臨床廣泛應(yīng)用。近年來,運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)界開始重視借助中藥來消除體力性疲勞與提高機(jī)體運(yùn)動(dòng)能力的研究,并已取得顯著成果。有研究表明黃芪具有抗疲勞作用,能夠增加小鼠游泳后肝糖元的含量,降低血清乳酸的含量[2]。馬先英等報(bào)道黃芪能夠有效抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng),提高機(jī)體在不同功能狀態(tài)下的抗氧化能力,減輕心肌損傷,從而延長(zhǎng)大鼠運(yùn)動(dòng)時(shí)間,推遲疲勞的發(fā)生[3]。但關(guān)于黃芪對(duì)血清心房鈉尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)方面的研究甚少。本研究利用小鼠負(fù)重游泳模型觀察黃芪水提液的抗疲勞作用,并探討其對(duì)血清ANP分泌及血清SOD、MDA含量的影響。

1 材料

1.1 黃芪水提取液黃芪,4-5年生,產(chǎn)于吉林省和龍市高產(chǎn)村。先將藥材浸泡24 h,然后煎煮3次,每次加入10倍黃芪量的水,每次煎煮120min,將三次濾液混勻,濃縮制得浸膏,用生理鹽水配制成濃度為1g/ml的溶液,4℃冰箱儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 動(dòng)物昆明種小鼠30只,雄性,體重20-22g,由延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科提供(合格證號(hào):SCXK(吉)2003-0005),飼養(yǎng)環(huán)境溫度為25℃,濕度為70%。

1.3 主要試劑ANP測(cè)試盒(批號(hào):070420北京北方生物技術(shù)研究所);SOD測(cè)試盒(批號(hào):20051019,購(gòu)自南京建成生物技術(shù)研究所);MDA測(cè)試盒(批號(hào):20051019,購(gòu)于南京建成生物工程研究所)。

2 方法

2.1 昆明種小鼠分組及負(fù)重游泳力竭實(shí)驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行習(xí)慣性游泳訓(xùn)練,共游泳2次,兩次之間間隔3天,每次游泳30min。然后在小鼠尾部負(fù)重(體重的5%)測(cè)量游泳基礎(chǔ)時(shí)間,共測(cè)3次,每次之間間隔3天。計(jì)算3次游泳基礎(chǔ)時(shí)間平均值和標(biāo)準(zhǔn)差,選擇游泳基礎(chǔ)時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)差＜10min的小鼠24只隨機(jī)分成給與黃芪水提取液組和對(duì)照組,每組12只。給與黃芪水提取液組灌胃給藥,其劑量為24g/kg(相當(dāng)于生藥量),對(duì)照組灌胃等量生理鹽水。灌胃每日1次,持續(xù)3周。每次灌胃后,動(dòng)物自由進(jìn)食飲水。第21天灌胃1h后,在小鼠尾部負(fù)重(體重的10%)后記錄小鼠游泳力竭時(shí)間。游泳水槽的長(zhǎng)×寬×高等于58×43×36cm3,水深22cm,水溫28±2℃。判定力竭標(biāo)準(zhǔn):小鼠沉入水中10s不能浮出水面。

2.2 小鼠血清中 ANP、SOD、MDA含量的測(cè)定小鼠測(cè)定負(fù)重游泳力竭時(shí)間后立即脫頸、斷頭取血,離心制備血清后放于-80℃冰箱保存待測(cè)。SOD、MDA含量采用比色法進(jìn)行測(cè)定,ANP含量采用放射免疫法進(jìn)行測(cè)定。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理統(tǒng)計(jì)資料利用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理,所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均用means±SD表示,采用兩樣本 t檢驗(yàn)(two-Samples t t-test),P＜0.05時(shí)認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 黃芪水提取液對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響

黃芪水提取液能夠明顯延長(zhǎng)小鼠的游泳力竭時(shí)間,與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05,見表1)。

表1 黃芪水提液對(duì)小鼠負(fù)重游泳力竭時(shí)間的影響

3.2 黃芪水提取液對(duì)小鼠血清中 ANP、SOD、MDA含量的影響

黃芪水提取液能夠使小鼠血清中的ANP和SOD含量顯著增加,與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);MDA含量顯著降低,與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表2 黃芪水提取液對(duì)小鼠血清ANP、SOD、MDA含量的影響

4 討論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,黃芪水提取液能夠明顯延長(zhǎng)小鼠的負(fù)重游泳力竭時(shí)間,這與呂紅等人[4]報(bào)道的復(fù)方黃芪提取液能夠延長(zhǎng)小鼠游泳時(shí)間的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相吻合。

疲勞發(fā)生的原因和發(fā)生機(jī)制至今尚不明確,但是氧自由基和脂質(zhì)過氧化過程參與了疲勞的發(fā)生發(fā)展過程已經(jīng)是一個(gè)不爭(zhēng)的事實(shí)。在機(jī)體內(nèi)SOD是抗氧化系統(tǒng)中重要的酶,在清除自由基方面起到非常關(guān)鍵的作用[5]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,黃芪水提取液能夠使小鼠血清中的SOD含量增加,MDA含量降低。表明SOD能清除脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物,并阻止脂質(zhì)過氧反應(yīng),這是黃芪水提液使小鼠血清中MDA水平降低的主要原因。提示抗自由基途徑是黃芪水提取液發(fā)揮抗疲勞作用的途徑之一。

另外,本實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)黃芪水提液能使力竭游泳小鼠血清中ANP含量顯著增加。ANP是心房肌細(xì)胞生成和分泌的鈉尿肽家族激素中的第一個(gè)成員。心房肌細(xì)胞生成ANP以后,以ANP前激素原形式儲(chǔ)存于心房肌細(xì)胞的特異性分泌顆粒中,當(dāng)受到相應(yīng)刺激時(shí)釋放出來,并經(jīng)過蛋白水解等加工過程,最終以具有24-28個(gè)氨基酸的肽類激素形式參與血液循環(huán)。Shono等[6]研究表明,ANP能夠減輕氧化應(yīng)激反應(yīng)。提示黃芪水提取液通過增加心房ANP的分泌,調(diào)節(jié)抗氧化反應(yīng)亦是其發(fā)揮抗疲勞作用的有效途徑之一。

綜上所述,黃芪水提取液增強(qiáng)小鼠的抗疲勞能力,其作用可能與增加心房ANP分泌及提高抗自由基作用有關(guān)。當(dāng)然其具體作用機(jī)制有待于進(jìn)一步深入研究。

[1]趙厚熙.中藥黃芪在防治心血管疾病方面的作用研究[J].當(dāng)代醫(yī)藥衛(wèi)生.2005,2(8):39-40.

[2]朱華野,樸龍.黃芪提取物抗炎、鎮(zhèn)痛、耐缺氧及抗疲勞作用的研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2007,18(5):1156-1157.

[3]馬先英,孔喜良.黃芪生藥對(duì)運(yùn)動(dòng)大鼠心肌自由基損傷的研究[J].中國(guó)體育科技,2007,43(5):132-135.

[4]呂紅,郭偉東,楊潔,等.復(fù)方黃芪提取液抗運(yùn)動(dòng)性疲勞的實(shí)驗(yàn)研究[J].山東體育學(xué)院學(xué)報(bào),2004,20(5):48-50.

[5]Gutteridge JM,Halliwell B.Free radicals and antioxidants in the year 2000:A historical look to the future.Ann N YAcad Sci,2000,899:136-147.

[6]Shono M,Y oshimura M,Nakayama M,Yamamuro M,Abe K,Suzuki S,Mizuno Y,Sugiyama S,Saito Y,Nakao K,Yasue H,Ogawa H.Predominant Effect of A-Type Natriuretic Peptide on Reduction of Oxidative Stress During the Treatment of Patients With Heart Failure.Circ J,2007,71:1040-1046.

Anti-fatigue Effects and Changes of Serumal ANP Levels of Radix Astragali in Mice

Li Dayong1,He Yonggui2,Liu Liping2,Cui Xun2,3
(1.Physical Education College Yanbian University,Yanji,133002,Jilin,China;2.Department of Physiology and Pathophysiology,College of Medicine,Yanbian University Yanji,133002,Jilin,China;3.Key Laboratory of Natural Resources of Changbai Mountain&Functional Molecular,Yanbian University,Yanji,133002,Jilin,China)

T o investigate the effects of Radix Astragali aqueous extract on ANP secretion and its function in exhaustive swimming mice.Methods:24 mice will be selected from30 mice then random divided into two groups(control group,Radix Astragali aqueous extract group),and it is twelve in every group.The dose of Radix Astragali aqueous extract will be intragastric administration according to correspondent crude drug(24g/kg).The control group will be administrated by physiological saline.The loading swimming time will be determined after intragastric administration one hour in 21day.Then,the blood were obtained by extirpating eyeball in mice.SOD and MDA were determined by centrifuging the blood.Results Water extract of Radix astragali(24g/Kg)significantly extended the period of to reched exhaustion(P＜0.01 vs control)and increased serumal SOD activity in weight loading swimming mice(P＜0.01 vs control)after intragastric administration for 3 weeks.But the levels of MDA in serum was obviously decreased by Radix astragali treatment(P＜0.05 vs control).Conclusion Radix astragali aqueous extract plays an important role in anti-fatigue.It’s possible that Radix Astragali via enhancing anti-free radical and increased serumal ANP level to achieving anti-fatigue effects.

radix astragali;anti-fatigue;ANP;SOD;MDA

G804.2

A

1672-1365(2011)02-0077-02

2010-08-13;

2010-10-12

吉林省教育廳項(xiàng)目,吉教科合字(2008)第4號(hào)與吉林省體育局項(xiàng)目(10D14)共同資助。

李大勇(1979-),男,吉林松原人,碩士,講師,研究方向:運(yùn)動(dòng)生理及體育教育訓(xùn)練學(xué)。