茯苓在四君子湯及苓桂術(shù)甘湯中對(duì)多糖溶出的影響

彭江宇，佟茵，吳紅娟

茯苓是常用的傳統(tǒng)藥材，最早記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》中。茯苓來源于多孔菌科真菌茯苓Poria cocos（Schw.）Wolf. 的干燥菌核，性平，味甘、淡，具有滲濕利水、健脾和胃、寧心安神的功效。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，茯苓中的主要成分是茯苓多糖等。茯苓多糖有增強(qiáng)免疫、抗腫瘤、護(hù)肝等作用[1～2]，是國(guó)家衛(wèi)生部2002年公布的藥食兩用的藥物之一。茯苓應(yīng)用廣泛，在《方劑學(xué)》[1～2]中，茯苓在祛濕、健脾的方劑中使用率均在50%以上，以茯苓為原料的中成藥達(dá)300多種，茯苓是年產(chǎn)銷量過千萬公斤的少數(shù)藥物之一[3]。茯苓中的多糖成分含量高，但單獨(dú)煎取時(shí)其多糖的溶解度并不高[4]，被利用、吸收的多糖并不多。方劑的配伍對(duì)茯苓多糖的溶出有何影響？茯苓與它藥兩兩的配伍是否會(huì)增加其多糖溶出？我們選取四君子湯、苓桂術(shù)甘湯作為代表方，對(duì)茯苓在兩方及兩方的拆方中對(duì)多糖溶出量和溶出率進(jìn)行了研究，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

UV-1750島津紫外—可見分光光度計(jì)（島津公司）；電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司天平儀器廠）；移液槍（太龍醫(yī)療設(shè)備有限公司）；離心機(jī)（北京醫(yī)用離心機(jī)廠）。

1.2 藥品

茯苓購(gòu)于湖南靖州市茯苓大市場(chǎng)；人參、白術(shù)、炙甘草、桂枝均購(gòu)于湖南長(zhǎng)沙芝林大藥房。

1.3 試劑

無水乙醇、葡萄糖、苯酚、濃硫酸等均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

精密稱取10 mg葡萄糖，加蒸餾水定容至100 mL，得到10%葡萄糖溶液，分別吸取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.9 mL葡萄糖液于試管中，分別加入0.7 mL5%苯酚，并迅速加入3.0 mL濃硫酸，蒸餾水定容至5 mL，振搖5 min，于UV-1750紫外-可見分光光度計(jì)494 nm處測(cè)定吸光度。以葡萄糖濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線y=44.125x-0.0803，R2=0.9908。見表1、圖1。

表1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2 分組

將四君子湯和參苓白術(shù)散[5～6]方及兩方拆方后分為16組。1組：茯苓9 g；2組：茯苓12 g；3組：人參9 g；4組：白術(shù)9 g；5組：炙甘草6 g； 6組：桂枝9 g； 7組：茯苓9 g，人參9 g； 8組：茯苓12 g，桂枝9 g； 9組：茯苓9 g，白術(shù)9 g； 10組：茯苓12 g，白術(shù)6 g； 11組：茯苓9 g，炙甘草6 g； 12組：茯苓12 g，炙甘草6 g； 13組：茯苓9 g，白術(shù)9 g，人參9 g，炙甘草6 g（四君子湯）； 14組：白術(shù)9 g，人參9 g，炙甘草6 g（四君子湯去茯苓）；15組：茯苓12 g，桂枝9 g，白術(shù)6 g，炙甘草6 g（苓桂術(shù)甘湯）；16組：桂枝9 g，白術(shù)6 g，炙甘草6 g（苓桂術(shù)甘湯去茯苓）。

2.3 藥物多糖的提取[4]

按“2.2”項(xiàng)分組，精密稱取各組藥材，分別精密加入20倍樣品量的蒸餾水。煎煮1 h，放冷至室溫，用酸度計(jì)測(cè)煎液的pH值（見表2），補(bǔ)充加入蒸餾水至原來體積。離心后，取上清液。取各組總體積量的1/3，濃縮至所取體積的1/10。分別加入3倍量無水乙醇，靜置3 h后，離心，取沉淀。分別用無水乙醇洗滌2次，干燥后稱重，得到沉淀量，并計(jì)算沉淀得率：

沉淀得率=沉淀量÷3/藥材重量。結(jié)果見表2。

表2 藥物沉淀率及煎液pH值

2.4 藥物多糖的測(cè)定

取各組多糖沉淀物，用蒸餾水溶解后，定容至5 mL，離心后取上清液0.25 mL，再用蒸餾水定容至5 mL，得供試品溶液。精密吸取各組供試品溶液0.2 mL，分別加入0.7 mL 5%苯酚，迅速加入3.0 mL濃硫酸，再用蒸餾水定容至5 mL，振搖5 min，于紫外-可見分光光度計(jì)494 nm處測(cè)定吸光度，并代入回歸方程，計(jì)算出各組藥品含多糖總量，及多糖溶出率。

溶出率＝總糖量/藥材總量，結(jié)果見表3。

表3 藥物水溶性多糖總量及多糖溶出率

3 討論

四君子湯來源于宋代的《圣濟(jì)總錄》，有近千年的應(yīng)用歷史，其組成為人參、白術(shù)、茯苓各9 g，炙甘草6 g，有益氣健脾的功效，主治脾胃氣虛證[5～6]，是臨床常用補(bǔ)氣的代表方和基礎(chǔ)方。茯苓在方中是佐藥，取其健脾、滲濕的功效。苓桂術(shù)甘湯來源于漢代的《金匱要略》，有兩千余年的應(yīng)用歷史，其組成為茯苓12 g，桂枝9 g，白術(shù)6 g，炙甘草6 g，有溫化痰飲、健脾利濕的功效，主治中陽不足的痰飲病[5～6]，是臨床溫化寒濕的代表方和基礎(chǔ)方。茯苓在方中是主藥，取其滲濕、健脾的功效。兩方均是經(jīng)典的名方，一為補(bǔ)氣的代表方，一為溫化寒濕的代表方，茯苓在方中任佐藥和主藥的角色，兩方的藥味數(shù)相同，藥物組成相近似，便于觀察和了解。

從表3可以看出，單味藥煎液中，其溶出率依次是人參、白術(shù)、炙甘草、桂枝和茯苓，再次說明茯苓的單煎液多糖溶出率并不高。茯苓和人參、桂枝的合煎液中多糖總量小于各單煎液之和；茯苓和白術(shù)合煎液中，當(dāng)茯苓、白術(shù)等量時(shí)，其多糖量接近單煎液之和；當(dāng)茯苓量倍于白術(shù)時(shí)，其多糖量明顯小于單煎液之和；茯苓和炙甘草合煎液中多糖量均高于兩藥單煎液糖量之和，說明茯苓和炙甘草配伍可增加多糖的溶出。參術(shù)草（四君子湯去茯苓）、桂術(shù)草（苓桂術(shù)甘湯去茯苓）合煎液多糖量明顯小于三藥單煎之和。四君子湯和苓桂術(shù)甘湯多糖含量雖小于其單煎之和，但其多糖量均高于參術(shù)草合煎與茯苓單煎之和、桂術(shù)草合煎與茯苓單煎之和，說明茯苓在兩方的配伍中對(duì)多糖的溶出有利。從表2中看出，多糖的溶出與溶液PH值的關(guān)聯(lián)性不明顯。

以上結(jié)果說明，一是藥物配伍后其多糖成分不是簡(jiǎn)單相加的過程，但茯苓在四君子湯和苓桂術(shù)甘湯配伍中對(duì)增加多糖的溶出起促進(jìn)作用。二是茯苓與炙甘草的配伍可以增加多糖的溶出量，與人參配伍其多糖溶出明顯減少。這為四君子湯、苓桂術(shù)甘湯的配伍應(yīng)用及茯苓與它藥的配伍關(guān)系提供了一點(diǎn)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

[1] 高學(xué)敏.中藥學(xué)[M].北京:中國(guó)中醫(yī)藥出版社.

[2] 張廷模.臨床中藥學(xué)[M].北京:中國(guó)中醫(yī)藥出版社.

[3] 王惠清.中藥材產(chǎn)銷[M].成都:四川科學(xué)技術(shù)出版社.

[4] 吳紅娟,魯耀邦,肖錦仁,等.松根液對(duì)發(fā)酵茯苓菌絲產(chǎn)量和多糖成分的影響[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志,2010,7(2):39.

[5] 謝鳴.方劑學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社.

[6] 鄧中甲.方劑學(xué)[M].北京:中國(guó)中醫(yī)藥出版社.