川西獐牙菜的化學(xué)成分研究(Ⅱ)

周永福,黃飛燕,文榮榮,李干鵬

(云南民族大學(xué)化學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院民族藥資源化學(xué)國家民委-教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,云南昆明 650500)

川西獐牙菜的化學(xué)成分研究(Ⅱ)

周永福,黃飛燕,文榮榮,李干鵬

(云南民族大學(xué)化學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院民族藥資源化學(xué)國家民委-教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,云南昆明 650500)

川西獐芽菜(Swertia mussotiiFranch)是藏族民間常用的單方草藥,在對(duì)采自云南迪慶藏族自治州香格里拉縣的川西獐牙菜的進(jìn)一步研究中,采用現(xiàn)代分離分析技術(shù)又從該植物 70%乙醇提取物的乙酸乙酯部分分離鑒定了 8個(gè)化合物,它們是:1,2,6-三甲氧基 -8-羥基酮(1),1,3-二甲氧基 -8-羥基酮 (2),川西獐芽菜內(nèi)酯 I(3)、獐芽菜苦苷 (4)、龍膽苦苷 (5)、獐芽菜苷 (6)、豆甾醇 (7)和β-谷甾醇 (8).其中,化合物 3是首次從該屬植物中分到.對(duì)這些化合物進(jìn)行了抗糖尿病的藥理篩選,發(fā)現(xiàn)化合物 1對(duì)醛糖還原酶的抑制率為 18.3%(10-5mol/L).

川西獐牙菜;酮;醛糖還原酶抑制劑

川西獐芽菜 (Swertia m ussotiiFranch)俗名“藏茵陳”,為龍膽科獐牙菜屬植物 (Swertia),是藏族民間常用的單方草藥,具有清熱解毒,利膽退黃之功能,可治療肝炎、黃疸型肝炎、肝膽等疾病[1-2].由于云南有豐富的獐牙菜屬植物資源,我們一直在開展獐牙菜屬植物的化學(xué)成分研究[3].在前期的研究工作中,從采自云南迪慶藏族自治州香格里拉縣的川西獐牙菜中分離鑒定了 11個(gè)單體化合物[4].在我們進(jìn)一步的研究中,采用現(xiàn)代分離分析技術(shù)又從該植物 70%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部分分離鑒定了 8個(gè)化合物,它們是:1,2,6-三甲氧基 -8-羥基酮 (1),1,3-二甲氧基 -8-羥基酮 (2),川西獐芽菜內(nèi)酯 I(3)、獐芽菜苦苷 (4)、龍膽苦苷 (5)、獐芽菜苷 (6)、豆甾醇 (7)和β-谷甾醇 (8).其中,化合物 3是首次從該屬植物中分到.對(duì)這些化合物進(jìn)行了抗糖尿病的藥理篩選,發(fā)現(xiàn)化合物 1對(duì)醛糖還原酶的抑制率為18.3%(10-5mol/L).

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 材料與儀器

NMR譜用 BrukerAV-400型超導(dǎo)核磁共振儀測定,以 CDCl3或 CD3OD作溶劑,T MS為內(nèi)標(biāo);薄層色譜硅膠 GF254和柱色譜硅膠 (0.077～0.054 mm)均為青島海洋化工廠產(chǎn)品;RP-18和葡聚糖凝膠 LH-20購自Merck公司.安捷倫 LC-1100液相色譜儀、二極管陣列檢測器 (DAD)、制備柱 (7μm,21.2mm ×250mm)、安捷倫半制備反相柱 (5μm,9.4 mm×250 mm),所用溶劑為工業(yè)純 (重蒸),其它試劑為化學(xué)純或分析純.

植物樣品于 2006年 5月采自云南省香格里拉縣海拔 3 500 m的山溝和山坡上,經(jīng)云南省迪慶州藏醫(yī)院扎西澤仁醫(yī)師鑒定為川西獐牙菜(Swertia m ussotiiFranch).

1.2 提取和分離

風(fēng)干的川西獐牙菜全草 9.5 kg粉碎后用 70%的乙醇浸提取,共 4次,每次 4 h,提取液濾過、合并、濃縮得棕色浸膏約 980 g,然后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取 5次.乙酸乙酯萃取部分 168 g依次用 50∶1～1∶10的石油醚 -乙酸乙酯梯度洗脫,得到 4個(gè)流份 A1～A4.A2流份經(jīng)硅膠柱層析和葡聚糖凝膠 LH-20柱色譜分離得到化合物 1、2、7和 8;A3流份經(jīng)硅膠柱層析和高效液相色譜 RP-18柱制備得到化合物 3;A4流份經(jīng)葡聚糖凝膠 LH-20柱層析和反復(fù)硅膠柱層析得到化合物 4、5和 6.

2 結(jié)果與討論

2.1 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物 1淡黃色粉末,分子式為 C16H14O6,1HNMR(CDCl3,400MHz)δ:13.3(-OH),7.33(1H,d,J=9.2Hz,H-3),7.16(1H,d,J=9.2Hz,H-4),6.33(1H,d,J=2.0Hz,H-7),6.31(1H,d,J=2.0Hz,H-5),4.00(3H,s,1-OCH3),3.93(3H,s,2-OCH3),3.88(3H,s,6-OCH3);13C NMR(CDCl3,100MHz)δ:181.9(C=O),166.4(s,C-6),163.9(s,C-8),157.2(s,C-4b),151.0(s,C-4a),149.3(s,C-1),148.9(s,C-2),120.5(d,C-3),115.8(s,C-8b),112.8(d,C-4),104.1(s,C-8a),96.9(d,C-7),92.1(d,C-5),61.8(q,1-OCH3),57.2(q,2-OCH3),55.8(q,6-OCH3).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5]對(duì)照基本一致,化合物1鑒定為 1,2,6-trimethoxy-8-hydroxyxanthone.

化合物 2淡黃色粉末,分子式為 C15H12O5,1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:12.8(-OH),7.74(1H,dd,J=1.6,8.0Hz,H-7),7.24(1H,t,J=8.0Hz,H-6),7.17(1H,dd,J=1.6,8.0Hz,H-5),6.48(1H,d,J=2.0Hz,H-2),6.30(1H,d,J=2.0Hz,H-4),3.99(3H,s,1-OCH3),3.86(3H,s,3-OCH3);13C NMR(CDCl3,100MHz)δ:180.7(C=O),166.7(s,C-3),163.2(s,C-1),157.5(s,C-4a),148.2(s,C-8),146.2(s,C-4b),123.5(d,C-6),121.4(s,C-8a),116.6(d,C-7),115.5(d,C-5),103.8(s,C-8b),97.5(d,C-2),92.7(d,C-4),56.4(q,1-OCH3),55.8(q,3-OCH3).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]對(duì)照基本一致,化合物 2鑒定為 1,3-dimethoxy-8-hydroxyxanthone.

化合物 3無色油狀物;分子式為 C12H16O5;1H NMR(400MHz,CD3Cl3)δ:1.90(3H,d,J=7.2Hz,H-12),2.56(1H,dt,J=17.2,4.0Hz,H-4a),2.65(1H,m,H-4b),3.59(3H,s,H-13),3.65(3H,s,H-14),4.38-4.46(2H,m,H=3),5.47(1H,d,J=1.6Hz,H-8),5.48(1H,d,J=0.8Hz,H-6),6.22(1H,dq,J=1.2,7.2Hz,H-11).13CNMR(100MHz,CD3Cl3)δ:163.2(s,C-1),65.0(t,C-3),22.8(t,C-4),130.7(s,C-5),95.0(d,C-6),94.1(d,C-8),119.9(s,C-9),143.8(s,C-10),133.7(d,C-11),14.3(q,C-12),55.6(q,C-13),57.3(q,C-14).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]對(duì)照一致鑒定為 (Z)-5-Ethylidene-3,4,5,6-tetrahydro-cis-6,8-dimethoxy-1H,8H-pyrano-[3,4-c]pyran-1-one.

化合物 4無色油狀物,分子式為 C16H22O10;1H NMR(400MHz,CD3OD)δ:1.65(1H,d,J=14.0Hz,H-6a),1.82(1H,dt,J=4.8,14.0Hz,H-6b),2.83(1H,dd,J=1.2,8.8Hz,H-9),4.55(1H,d,J=8.0Hz,H-1′),5.62(1H,s,H-1),7.55(1H,s,H-3).13CNMR(100MHz,CD3OD)δ:99.2(d,C-1),154.9(d,C-3),108.9(s,C-4),64.4(s,C-5),33.8(t,C-6),66.0(t,C-7),133.9(d,C-8),51.9(d,C-9),121.3(t,C-10),168.1(s,C-11),100.3(d,C-1′),74.4(d,C-2′),77.8(d,C-3′),71.4(d,C-4′),78.5(d,C-5′),62.6(d,C-6′),以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]對(duì)照基本一致,化合物 4鑒定為獐牙菜苦苷.

化合物 5無色油狀物,分子式為 C16H20O9;1H NMR(400MHz,CD3OD)δ:18(1H,dd,J=9.2,8.0Hz,H-9),4.67(1H,d,J=8.0Hz,H-1′),5.01(1H,m,H-7a),5.10(1H,m,H-7b),5.21-5.28(2H,m,H-10),5.64(1H,m,H-6),5.68(1H,d,J=2.8Hz,H-1),5.74-5.82(1H,m,H-8),7.47(1H,d,J=1.6Hz,H-3).13CNMR(100MHz,CD3OD):δ98.6(d,C-1),150.7(d,C-3),105.0(s,C-4),127.0(s,C-5),117.2(d,C-6),70.9(t,C-7),135.0(d,C-8),46.6(d,C-9),118.6(t,C-10),166.3(s,C-11),100.2(d,C-1′),74.6(d,C-2′),78.0(d,C-3′),71.5(d,C-4′),78.5(d,C-5′),62.8(d,C-6′),以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]對(duì)照基本一致,化合物 5鑒定為龍膽苦苷.

化合物 6分子式為 C16H22O9,無色油狀物;1H NMR(400MHz,CD3OD)δ:1.68-1.80(2H,m,H-6),2.71(1H,dd,J=5.6,8.4Hz,H-9),4.38(1H,dd,J=1.6,11.2Hz,H-7a),4.46(1H,dd,J=2.4,11.2Hz,H-7b),4.68(1H,d,J=8.0Hz,H-1′),5.28(1H,d,J=10.4Hz,H-10a),5.33(1H,dd,J=0.8,10.4Hz,H-10b),5.53(1H,m,H-8),5.56(1H,d,J=1.2Hz,H-1),7.60(1H,d,J=1.6Hz,H-3).13CNMR(100MHz,CD3OD):δ98.0(d,C-1),154.0(d,C-3),106.1(s,C-4),28.5(d,C-5),25.9(t,C-6),69.8(t,C-7),133.4(d,C-8),43.8(d,C-9),120.9(t,C-10),168.6(s,C-11),99.7(d,C-1′),74.7(d,C-2′),77.9(d,C-3′),71.5(d,C-4′),78.4(d,C-5′),62.7(d,C-6′),以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn) [8]對(duì)照基本一致 ,化合物 4鑒定為獐牙菜苷.

化合物 7無色針狀晶體,其薄層層析 Rf值及1H NMR、13C NMR數(shù)據(jù)與標(biāo)準(zhǔn)品一致,鑒定為 24R-Stigmast-5,22(E)-dien-3β -ol,即豆甾醇.

化合物 8無色針狀晶體,其薄層層析 Rf值及1H NMR、13CNMR數(shù)據(jù)與標(biāo)準(zhǔn)品一致,鑒定為β-谷甾醇.

2.2 討論

云南產(chǎn)獐牙菜屬植物的研究工作還比較薄弱,迄今為止僅有 10余個(gè)品種見諸報(bào)道,相關(guān)的藥理和化學(xué)成分研究工作都明顯不足.因此,繼續(xù)深入研究云南產(chǎn)獐牙菜屬植物藥、充分發(fā)掘和利用該屬植物資源很有潛力.

我們對(duì)云南香格里拉縣的川西獐芽菜的化學(xué)成分進(jìn)行了繼續(xù)研究,用乙酸乙酯萃取其乙醇提取物,通過植物化學(xué)方法分離鑒定了 8個(gè)化合物.其中化合物 3最早由國外學(xué)者從龍爪七葉科 (Potaliaceae)植物斐濟(jì)金檀(Fagraea gracilipesA.Gray)中分離鑒定.我們首次從獐牙菜屬植物中分離得到該化合物,國內(nèi)還未見有該化合物的報(bào)道,所以將其命名為川西獐芽菜內(nèi)酯 I.國內(nèi)外的相關(guān)研究表明,酮具有很好的保肝、降血糖、抗氧化等作用,為了進(jìn)一步闡明獐牙菜屬植物的藥效物質(zhì)基礎(chǔ),對(duì)這些化合物進(jìn)行了抗糖尿病的藥理篩選,發(fā)現(xiàn)化合物 1對(duì)醛糖還原酶的抑制率為 18.3%(10-5mol/L).研究結(jié)果有助于川西獐芽菜的深入開發(fā)利用,通過比較不同獐芽菜品種之間的化學(xué)成分差異,對(duì)辨認(rèn)藥材品質(zhì)和尋找習(xí)用藥材的替代品,以及對(duì)于植物分類學(xué)研究均具有參考價(jià)值.

[1]賈敏如,李星煒.中國民族藥志要[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2005:591-593.

[2]郭愛華.龍膽科獐牙菜屬藥用植物化學(xué)成分和藥理作用的研究進(jìn)展[J].山西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2005,1(6):57-59.

[3]張建勝,王雪梅,董秀華,等.川西獐牙菜化學(xué)成分研究[J].中藥材,2009,32(4):511-514.

[4]文榮榮,董秀華,段沅杏,等.獐牙菜的化學(xué)成分研究[J].云南民族大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2010,19(2):93-96.

[5]NAGEM T J,S ILVEIRA J C.Haploxanthone from haploclathra species[J].Phytochemistry,1989,28(8):2 211-2 212.

[6]YANG Xuedong,XU Lizhen,YANG Shilin.Xanthones from the stems of securidaca inappendiculata[J].Phytochemistry,2001,58(8):1 245-1 249.

[7]CAMB IE R C,LAL A R,R ICHARD C E F,et al.Chemistry of Fijian Plants.V.:Constituents of Fagraea gracilipes A.Gray[J].Chem Pharm,Bull,1990,38(7):1 857-1 861.

[8]王世盛,徐青,肖紅斌,等.抱莖獐牙菜中的苷類成分 [J].中草藥,2004,35(8):847-849.

(責(zé)任編輯王 琳)

Studies on Chemical Constituents in Swertia mussotii Franch

ZHOU Yong-fu,HUANG Fei-yan,WEN Rong-rong,LIGan-peng
(KeyLaboratory of EthnicMedicine Resources Chemistry,State Ethnic Affairs Commission&Ministry of Education,School of Chemistry and Biotechnology,Yunnan University ofNationalities,Kunming 650500,China)

As a continuation of our studies on chemical constituents ofSwertiaplant,from the over-ground parts ofSwertia m ussotiiFranch which is a traditional Tibetan medicine,eight compounds,1,2,6-Trimethoxy-8-hydroxyxanthone(1),1,3-Dimethoxy-8-hydroxyxanthone(2),(z)-5-Ethylidene-3,4,5,6-tetrahydrocis-6,8-dimethoxy-1H,8H-pyrano-[3,4-c]pyran-1-one(3),swertiamarin(4),gentiopicroside(5),Sweroside(6),Stigmasterol(7)andβ-sitosterol(8),were isolated.Their structures were deter mined by using conventional spectroscopic methods.Compound 3 was isolated from the genus for the first time.The effect of compound 1 on aldose reductase was 18.3%(10-5mol/L).

Swertia mussotii Franch;xanthone;aldose reductase in hibitors

R 284.1

A

1672-8513(2011)01-0014-03

10.3969/j.issn.1672-8513.2011.01.003

2010-10-15.

教育部科學(xué)技術(shù)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(208132).

周永福 (1983-),男,碩士研究生.主要研究方向:天然藥物化學(xué).

李干鵬 (1972-),男,博士,教授.主要研究方向:天然藥物化學(xué).