家蠶細(xì)菌病防治藥劑“蠶寧”的防效試驗(yàn)與推廣應(yīng)用

葉建美

(湖北省農(nóng)科院經(jīng)濟(jì)作物研究所 武漢 430070)

家蠶細(xì)菌病防治藥劑 煙酸諾氟沙星粉(蠶用)是由湖北省農(nóng)科院經(jīng)濟(jì)作物研究所2000年研制成功的一種新藥，當(dāng)時(shí)取名為“蠶病靈”，2007年經(jīng)農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)同意地方標(biāo)準(zhǔn)上升為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，2008年1月8日農(nóng)業(yè)部獸藥產(chǎn)品批準(zhǔn)文號(hào)批件批復(fù)，獸藥通用名為:煙酸諾氟沙星粉(蠶用)，商品名改為:蠶寧。批準(zhǔn)文號(hào)為:獸藥字(2008)170359835，含量規(guī)格為每小包5g:0．25g，5小包為1大袋。由湖北農(nóng)科生物化學(xué)有限公司生產(chǎn)與銷售。

1 對(duì)家蠶細(xì)菌性敗血病的防治效果

1．1 試驗(yàn)方法

1．1．1試驗(yàn)動(dòng)物

蠶品種為春蕾×鎮(zhèn)珠，由湖北省農(nóng)科院經(jīng)濟(jì)作物研究所蠶桑研究室提供。在常規(guī)條件下飼養(yǎng)至5齡起蠶時(shí)進(jìn)行試驗(yàn)，接種后試驗(yàn)蠶在24～25℃的溫度下飼養(yǎng)。

1．1．2菌懸液的制備與接種

試驗(yàn)菌種為黑胸?cái)⊙【?Bacillus sp．)和黏質(zhì)沙雷氏菌(Serratia marcescens Bizio)，均為湖北省農(nóng)科院經(jīng)濟(jì)作物研究所提供。試驗(yàn)前將以上菌種接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)72h，試驗(yàn)時(shí)，將10 ml無(wú)菌水加入新鮮斜面培養(yǎng)試管中，用毛細(xì)吸管將細(xì)菌培養(yǎng)物輕輕吹吸下來(lái)后，經(jīng)充分振動(dòng)，使菌體完全分散，用細(xì)菌濃度比濁測(cè)定法粗測(cè)含菌濃度，然后用無(wú)菌水調(diào)成含菌約108～109個(gè)/ml的菌懸液。用經(jīng)酒精燈火焰滅菌的接種針蘸取少量菌液給5齡起蠶進(jìn)行體表下穿刺接種。

1．1．3試驗(yàn)組的設(shè)計(jì)

受試藥物“蠶寧”由湖北農(nóng)科生物化學(xué)有限公司提供，生產(chǎn)批號(hào):20090202。規(guī)格:5g:煙酸諾氟沙星250mg。

推薦劑量為500 mg/l，根據(jù)臨床檢驗(yàn)劑量設(shè)計(jì)的原則，在推薦劑量上、下各增加1個(gè)劑量進(jìn)行試驗(yàn)。設(shè)高、中、低劑量:250mg/l、500 mg/l和 1 000 mg/l三個(gè)劑量組，同時(shí)設(shè)陽(yáng)性對(duì)照組和陰性對(duì)照組，陽(yáng)性對(duì)照組即感染不給藥組，陰性對(duì)照組即不感染不給藥組。每組50頭蠶，重復(fù)3區(qū)。

1．1．4給藥方法

將“蠶寧”用蒸餾水配成250mg/l、500mg/l和1 000 mg/l三種濃度的藥液，然后用噴霧器均勻地噴在桑葉上，以正反面濕潤(rùn)為宜，稍干后喂蠶。從接種結(jié)束后開始喂藥葉，第1天內(nèi)24h全部喂藥葉，第2、3天分別喂藥葉6h。

1．1．5發(fā)病調(diào)查

根據(jù)試驗(yàn)蠶發(fā)病死亡的癥狀進(jìn)行調(diào)查。即:黑胸?cái)⊙⌒Q剛死不久胸部變黑，繼后擴(kuò)展到全身;靈菌敗血病死后不久全身發(fā)紅。陽(yáng)性對(duì)照組調(diào)查統(tǒng)計(jì)72h內(nèi)的發(fā)病死亡率，給藥處理組除了調(diào)查給藥期間的發(fā)病個(gè)體數(shù)外，給藥結(jié)束后繼續(xù)飼養(yǎng)48h調(diào)查發(fā)病死亡蠶個(gè)數(shù)，合計(jì)總的發(fā)病數(shù)，計(jì)算發(fā)病死亡率。

1．1．6治療有效率的計(jì)算

試驗(yàn)重復(fù)3次，統(tǒng)計(jì)平均有效率。a為陽(yáng)性對(duì)照組發(fā)病死亡率;b為藥物試驗(yàn)組發(fā)病死亡率。

1．1．7結(jié)果判定

陽(yáng)性對(duì)照組發(fā)病死亡率≥90．0%;以平均有效率≥95．0%判定該抗微生物藥物治療有效。

1．2 試驗(yàn)結(jié)果及分析

1．2．1 “蠶寧”對(duì)家蠶黑胸?cái)⊙〉姆乐涡Ч?/p>

經(jīng)過(guò)3次臨床試驗(yàn)(表1)，“蠶寧”對(duì)家蠶黑胸?cái)⊙〉姆乐涡ЧS著劑量的增加其有效率也呈增加的趨勢(shì)，250mg/l、500 mg/l和 1 000 mg/l“蠶寧”溶液的平均有效率分別為93．61%、95．96%和96．80%。從3次試驗(yàn)結(jié)果看，500 mg/l和1 000 mg/l的每次有效率都在95%以上，而250mg/l的有效率每次都低于95%。因此，“蠶寧”對(duì)家蠶黑胸?cái)⊙∵_(dá)到有效治療作用的劑量在500mg/l以上。

表1 “蠶寧”對(duì)家蠶黑胸?cái)⊙〉姆乐涡Ч?2009年)

1．2．2 “蠶寧”對(duì)家蠶靈菌敗血病的防治效果

3次臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示(表 2)，250mg/l和500mg/l的“蠶寧”對(duì)家蠶靈菌敗血病無(wú)良好治療作用，1 000mg/l的平均有效率也僅有7．25%。另外，試驗(yàn)中觀察到，500mg/l和1 000mg/l的“蠶寧”給藥組蠶的發(fā)病死亡都發(fā)生在停藥后48h內(nèi)，說(shuō)明“蠶寧”對(duì)家蠶靈菌僅有一定的抑菌作用，不能完全殺滅蠶體內(nèi)的菌體，停藥后細(xì)菌大量繁殖導(dǎo)致蠶發(fā)病死亡。結(jié)果表明“蠶寧”不能有效地防治家蠶靈菌敗血病。

表2 “蠶寧”對(duì)家蠶靈菌敗血病的防治效果(2009年)

2 臨床使用推薦劑量及方法

根據(jù)臨床試驗(yàn)結(jié)果表明，“蠶寧”能有效地防治家蠶黑胸?cái)⊙?，臨床使用推薦劑量為500mg/l。

給藥方法為:取本品一小包加少量約65℃熱水溶解后，再加清水至500ml，噴桑葉5kg，在4齡第3天、5齡第1天、第3天、上蔟前一天各用藥一次;當(dāng)發(fā)現(xiàn)病蠶時(shí)，用兩小包溶于500ml清水中，第1天連續(xù)添食三次，每8h一次，以后每天一次，每次6h。因縮短給藥時(shí)間會(huì)影響防病效果，必須充分保證給藥的時(shí)間。

3 推廣應(yīng)用情況

新蠶藥“蠶寧”自2001年投產(chǎn)以來(lái)，到2010年的10年中共推廣應(yīng)用到湖北、湖南、廣西、廣東、云南、四川、山東、安徽、重慶等9省市，共推廣應(yīng)用150多萬(wàn)袋，平均每袋應(yīng)用到1張蠶種上，共應(yīng)用到150萬(wàn)張蠶種，平均每張蠶種增產(chǎn)蠶繭2．4kg，累計(jì)增加蠶繭產(chǎn)量3 600t，增加產(chǎn)值6 660萬(wàn)元，取得了較大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。

新蠶藥“蠶寧”為可溶性粉劑，采用的配方解決了該抗生素在水中難以溶解和不穩(wěn)定的問(wèn)題，為鋁鉑袋包裝，具有藥效穩(wěn)定、不吸潮、使用方便(1次1小包獨(dú)立包裝，5小包裝1袋)、有效期長(zhǎng)(2年)和貯運(yùn)方便等特點(diǎn)。在蠶桑生產(chǎn)中的應(yīng)用量已越來(lái)越大，主要用于防治以芽孢桿菌為主所引起的家蠶黑胸?cái)⊙?，?duì)病毒病也有一定的抑制作用。實(shí)踐證明，在生產(chǎn)中添食“蠶寧”后，全繭量有所增加，秋蠶期尤為明顯，是目前替代蠶用氯霉素溶液的較佳產(chǎn)品。