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    幾種藥物制備糖尿病小鼠模型效果的比較

    2011-08-24 14:28:10張雅琴吳萍萍向敏肖洋
    中國實用醫(yī)藥 2011年27期
    關(guān)鍵詞:菌素動物模型抵抗

    張雅琴 吳萍萍 向敏 肖洋

    中國中醫(yī)科學(xué)院糖尿病研究總院調(diào)查資料顯示,我國的糖尿病患者人數(shù)已達8000萬左右,占世界糖尿患者群總數(shù)的五分之一,患病率居世界第二位[1]。胰島素抵抗和胰島功能受損是糖尿病發(fā)病機制中兩個重要環(huán)節(jié)[2],為了深入對疾病的探討,我們必須依賴于實驗動物及模型,這需要我們繼續(xù)對該方面進行進一步的研究。本實驗選用地塞米松、氫化可的松、四氧嘧啶和鏈脲佐菌素藥物配合高糖高脂飲食制備小鼠糖尿病模型,通過檢測血糖及胰島素水平變化,計算胰島素抵抗指數(shù)評價這幾種藥物制備糖尿病模型的效果。目前糖尿病模型的制備研究較多,局限于綜述類,研究制備方法的多樣性和機制闡述,缺乏實際的實驗依據(jù),該實驗研究的意義在于為使用化學(xué)藥物誘導(dǎo)糖尿病動物模型時選用何種藥物達到預(yù)期的理想造模效果提供精準(zhǔn)的實驗數(shù)據(jù)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 實驗動物 昆明種小白鼠30只(6~8周齡),體質(zhì)量18~22 g雄性,購自蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心。

    1.2 實驗動物的分組及模型制備 實驗動物隨機分為五組,分別為空白對照組、地塞米松組、氫化可的松組、四氧嘧啶組和鏈脲佐菌素組,每組10只小鼠。空白對照組、四氧嘧啶組和鏈脲佐菌素組小鼠按36 mg/(kg·d)腹腔注射,地塞米松組和氫化可的松組小鼠按36 mg/(kg·d)肌內(nèi)注射,連續(xù)給藥30 d,分別于第10,20天和30天禁食8 h測定空腹血糖值,最后一次給藥前禁食,給藥后8 h內(nèi)眼眶采血收集血液標(biāo)本。

    1.3 實驗動物血糖、胰島素水平的檢測和胰島素抵抗指數(shù)的計算 實驗小鼠分別于給藥的第10,20天和30天禁食8 h采取尾動脈微量血,使用強生穩(wěn)豪倍易型血糖儀及血糖試紙測定空腹血糖值(FPG)。最后一次給藥模型制備結(jié)束后8 h內(nèi)眼眶采血收集血液標(biāo)本,4℃靜置半小時,吸取上層血清,使用小鼠胰島素水平檢測試劑盒ELISA測定空腹血清胰島素水平(FIN),使用公式計算胰島素抵抗指數(shù)HOMA-IR=[FPG(mmol/L)FIN(mIU/L)]/22.5。

    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 所有實驗結(jié)果采用SPSS 10.0軟件進行統(tǒng)計分析,結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)的形式表示。組間差異采用t檢驗。

    2 結(jié)果

    2.1 小鼠第10,20天和30天空腹血糖值(FPG),見表1。

    2.2 小鼠空腹胰島素水平(FIN)及胰島素抵抗指數(shù)(HOMAIR)計算,見表2。

    表1 五組小鼠第10、20、30天空腹血糖值(FPG)的比較

    表2 五組小鼠空腹胰島素水平(FIN)及胰島素抵抗指數(shù)、胰島素敏感指數(shù)的比較

    3 討論

    糖尿病動物模型的制備方法多種多樣,需根據(jù)研究目的和實驗條件,合理地制備實驗動物模型[3]。目前常用的是藥物誘導(dǎo)的方法建立糖尿病動物模型[4]。糖尿病成模效果的評價方法是造模研究的重要內(nèi)容,正常血糖-高胰島素鉗夾技術(shù)是目前評價體內(nèi)IR的金標(biāo)準(zhǔn),然而該試驗費時費力,胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)法評價胰島素抵抗與金標(biāo)準(zhǔn)明顯相關(guān)性,該法評價胰島素抵抗更優(yōu)于其他簡單的測試方法,尤其適合于動物模型評價基礎(chǔ)研究[5]。本實驗中各種方法制備的小鼠均出現(xiàn)出現(xiàn)了明顯的多飲、多食、多尿和體重減輕(即“三多一少”)癥狀,與空白對照組相比,地塞米松組、氫化可的松組、四氧嘧啶組和鏈脲佐菌素組血糖水平有顯著升高,胰島素分泌、胰島素抵抗指數(shù)顯著升高,胰島素敏感指標(biāo)顯著降低,說明各組均存在胰島素的大量分泌和對胰島素的敏感性下降。胰島素敏感指標(biāo)數(shù)據(jù)顯示,各組制備糖尿病模型的有效效果依次分別為鏈脲佐菌素、地塞米松、四氧嘧啶和氫化可的松。

    [1]秦玉祥.丹參滴丸聯(lián)合腸溶阿司匹林治療160例糖尿病血脂紊亂患者的臨床觀察.中國醫(yī)藥指南,2010,8(3):89-90.

    [2]Whitcroft S,Herriot A.Insulin resistance and management of the menopause:a clinical hypothesis in practice.Menopause Int,2011,17(1):24-28.

    [3]劉微,李冀,盛波.胰島素抵抗動物模型的研究進展.中醫(yī)藥信息,2008,25(6):9-11.

    [4]覃雯,唐愛華.糖尿病實驗性動物模型研究概況.時珍國醫(yī)國藥,2007,18(6):1511-1512.

    [5]王玉中,張志國,孫朝輝.2型糖尿病大鼠模型的建立與評價.毒理學(xué)雜志,2009,23(6):476-478.

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