抗高效氟吡甲禾靈日本看麥娘生長速率與生長密度研究

張 彬，李 俊，2，董立堯，2

(1.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院/農(nóng)業(yè)部作物病蟲害監(jiān)測與防控重點開放實驗室，江蘇南京 210095； 2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院/江蘇省農(nóng)藥學(xué)重點實驗室，江蘇南京 210095)

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抗高效氟吡甲禾靈日本看麥娘生長速率與生長密度研究

張 彬1，李 俊1，2，董立堯1，2

(1.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院/農(nóng)業(yè)部作物病蟲害監(jiān)測與防控重點開放實驗室，江蘇南京 210095； 2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院/江蘇省農(nóng)藥學(xué)重點實驗室，江蘇南京 210095)

抗性日本看麥娘種群與敏感種群種子在低溫(4 ℃)清水浸泡處理超過6 d后萌發(fā)率均能達(dá)90%以上，但抗性種群休眠解除的時間要長于敏感種群；敏感種群在播種后的前15 d內(nèi)生長速率快于抗性種群，但此后抗性種群生長速率逐漸超過敏感種群；抗性種群在播種后20 d開始長出第2片葉，比敏感種群晚2 d，播種后25 d兩種群出現(xiàn)第2片葉的比例均超過95%，進(jìn)一步說明在生長后期抗性種群生長速率超過敏感種群；在相同的播種密度下，抗性種群長勢優(yōu)于敏感種群，150～200株/0.11m2的密度范圍內(nèi)有利于日本看麥娘的生長，抗性種群的最佳生長密度為208株/0.11m2，而敏感種群為186株/0.11m2。

日本看麥娘； 解除休眠； 生長速率； 生長密度

種子休眠是大多數(shù)雜草種子都具有的特性，是雜草在長期自然選擇過程中形成的對不良環(huán)境的適應(yīng)[1]。韓建國將種子休眠定義為“具有生活力而停留在不能發(fā)芽的狀態(tài)”[2]。而國外學(xué)者則將種子休眠定義為“成熟而完好無損的種子在最適宜的條件下不能發(fā)芽或延遲發(fā)芽的現(xiàn)象”[3-4]。種子休眠對處于惡劣環(huán)境中的植物保持其自身繁衍發(fā)展具有重要的生態(tài)學(xué)意義[5]。大多雜草種子都具有休眠的特性，不同種類的植物及不同品種之間種子休眠時間長短差異很大。楊彩宏等分別采用地下沉積和低溫清水浸泡兩種休眠解除方法對日本看麥娘種子休眠解除進(jìn)行了相關(guān)的研究，結(jié)果表明低溫清水浸泡法能有效的解除所有日本看麥娘種群種子的休眠[6]。適合度(fitness)簡單的說就是植物的存活及繁殖成效，即在某種環(huán)境條件下，某已知基因型的個體將其基因傳遞到后代基因庫中的相對能力，是衡量個體存活和繁殖機(jī)會的尺度[7-8]。適合度越大，存活和繁殖機(jī)會越高。國內(nèi)外對抗性種群適合度的研究已經(jīng)有很多報道，大多學(xué)者已經(jīng)證明，新的抗性種群的產(chǎn)生會伴隨著適合度的降低[9-11]，但也有研究表明抗藥性能導(dǎo)致其適合度升高[12-13]，因此對兩種雜草種群之間相對適合度的比較研究就顯得非常重要。

1 材料與方法

1.1 供試材料

日本看麥娘(AlopecurusjaponicusSteud.)種子采集于2009年6月份。通過種子生物測定法檢測不同地點日本看麥娘種群的抗性水平。經(jīng)測定，將采集于江蘇省句容市油菜田的日本看麥娘作為抗性種群，將江蘇省南京市紫金山草坪地中的日本看麥娘作為敏感種群(種子萌發(fā)率均為90%以上)。

供試除草劑為10.8%高效氟吡甲禾靈EC，美國陶氏益農(nóng)公司生產(chǎn)。

1.2 試驗方法

1.2.1 低溫清水浸泡時間對解除抗高效氟吡甲禾靈日本看麥娘種子休眠的方法研究 取足量大小均勻、籽粒飽滿的成熟日本看麥娘種子置于潔凈的培養(yǎng)皿中，加適量的蒸餾水(以浸泡種子為準(zhǔn))，置于4 ℃冰箱中。分別在第0、1、2、3、4、5、6、7、8、9天取出40粒放于直徑為9 cm鋪有1張濾紙的培養(yǎng)皿中，加5 mL超純水，加蓋以保持水分，置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)觀察(溫度：白天18 ℃，夜間13 ℃；光周期：12 D/12 L)，4次重復(fù)。每天統(tǒng)計種子的萌發(fā)數(shù)并計算萌發(fā)率(胚芽長至2 mm時即為萌發(fā))，并比較兩個種群種子萌發(fā)率間的差異。

1.2.2 抗高效氟吡甲禾靈日本看麥娘幼苗生長速率的研究 試驗采用盆缽法。將細(xì)土均勻的裝入直徑為9 cm的塑料盆缽內(nèi)，每盆播30粒已解除休眠的日本看麥娘種子，放于室內(nèi)培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件如1.2.1。各盆缽?fù)寥朗冀K保持濕潤，4次重復(fù)。出苗后每盆定苗20株，每隔2 d記錄日本看麥娘的株高，觀察記錄雜草長第2片葉的時間，并比較兩個種群幼苗的生長速率。試驗期間人工拔除其他雜草。

1.2.3 抗高效氟吡甲禾靈日本看麥娘最佳種群生長密度的研究 試驗采用盆缽法。將均勻的細(xì)土裝入直徑為11.5 cm的塑料盆缽內(nèi)，每盆分別播50、40、30、20、10粒已解除休眠的日本看麥娘種子，放于室內(nèi)培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件如1.2.1。各盆缽?fù)寥朗冀K保持濕潤，4次重復(fù)。出苗后分別每盆定苗40、35、30、25、20、15、10、5株，出苗后第35天測量日本看麥娘的株高，并比較兩個種群間幼苗株高的差異。試驗期間人工拔除其他雜草。

其中，x為每盆的雜草株數(shù)，R為盆缽的半徑。

1.3 統(tǒng)計分析

試驗采用Excel 2003計算平均值和標(biāo)準(zhǔn)差并作圖，用DPS v3.01統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。

雜草隨時間變化而變化規(guī)律應(yīng)用一元回歸模型進(jìn)行研究，即以雜草生長時間為自變量(x)，以雜草的株高為因變量(y)，公式為y=f(x)。以相關(guān)系數(shù)最大、離回歸方差最小為原則進(jìn)行優(yōu)選[14-15]。

不同種植密度下日本看麥娘的長勢應(yīng)用一元二次曲線方程模型進(jìn)行研究，即以雜草的種植密度為自變量(x)，以雜草的株高為因變量(y)，公式為y=ax2+bx+c。以相關(guān)系數(shù)最大、離回歸方差最小為原則進(jìn)行優(yōu)選[14-15]。

2 結(jié)果與分析

2.1 低溫清水浸泡時間對解除抗高效氟吡甲禾靈日本看麥娘種子休眠的影響

抗高效氟吡甲禾靈日本看麥娘種子休眠解除時間長于敏感種群(圖1)。隨著低溫清水浸泡時間的延長，2個日本看麥娘種群種子萌發(fā)率均逐漸增加。未經(jīng)低溫清水浸泡處理的兩個日本看麥娘種群種子萌發(fā)率很低，分別只有5.56%、16.67%。在第6天時2個日本看麥娘種群種子萌發(fā)率分別達(dá)到84.44%、92.22%，但抗性種群萌發(fā)率仍低于敏感種群。因此，抗性日本看麥娘種群種子比敏感種群難于解除休眠。

2.2 抗高效氟吡甲禾靈日本看麥娘生長速率

抗高效氟吡甲禾靈日本看麥娘生長速率不同于敏感種群(圖2)。在生長早期，抗性種群生長速度稍微慢于敏感種群，但生長18 d以后，抗性種群生長速率逐步加快，并超過敏感種群。通過兩個日本看麥娘種群生長速率的線性比較也驗證了這點(R為0.617 2；S為0.511 4)。

抗高效氟吡甲禾靈日本看麥娘第二片葉片的出現(xiàn)時間晚于敏感種群(圖3)，在種植第18天時，敏感種群生出第二片葉，而第19天時抗性種群開始生第二片葉，第25天時，兩種日本看麥娘種群幾乎都長出第二片葉，出現(xiàn)比率達(dá)到95%以上。通過曲線回歸方程也可以看出抗性種群的二次項系數(shù)為0.952 4，敏感種群的二次項系數(shù)為-0.937 5，說明抗性日本看麥娘種群在生長后期快于敏感種群。

2.3 抗高效氟吡甲禾靈日本看麥娘最佳種群生長密度

在同等密度下抗性日本看麥娘種群長勢優(yōu)于敏感種群(圖4)。150 ～200株/0.11m2種植密度有利于日本看麥娘的生長，低密度和高密度都不利于日本看麥娘的生長。初步建立了日本看麥娘種群密度與株高的二次曲線方程，通過曲線方程可以推算出抗性日本看麥娘種群的最佳生長密度為208株/0.11m2，大于敏感種群的186株/0.11m2。

3 討論

種子休眠是植物在長期系統(tǒng)發(fā)育過程中形成的抵抗不良環(huán)境條件的適應(yīng)性，是調(diào)節(jié)種子萌發(fā)的最佳時間和空間分布的有效方法，具有普遍的生態(tài)意義。種子休眠時間的長短因不同種類和不同品種間差異很大，而且不同種子破除休眠的方法不盡相同。對于室內(nèi)雜草的研究，低溫清水浸泡破除日本看麥娘種子休眠是最有效、最快捷的方法[6]。試驗中通過對抗高效氟吡甲禾靈日本看麥娘種群種子低溫清水浸泡解除休眠研究發(fā)現(xiàn)，與敏感種群相比，抗性種群的休眠解除明顯困難。但到目前為止，出現(xiàn)這種結(jié)果的原因尚未有相關(guān)的報道和說明，因此需要進(jìn)一步研究。

大多抗性種群的產(chǎn)生都會伴隨其適合度的降低，但本試驗研究發(fā)現(xiàn)抗性日本看麥娘種群在某些特性上優(yōu)于敏感種群。在生長早期，抗高效氟吡甲禾靈日本看麥娘種群生長速率慢于敏感種群，但生長后期抗性種群生長速率及長勢要優(yōu)于敏感種群，與Sibony and Rubin(2002)和Holt and Thill(1994)報道的致使產(chǎn)生抗性的變異并沒有降低適合度相吻合。Shrestha等在2010報道了對草甘膦產(chǎn)生抗性的加拿大乍蓬(Conyzacanadensis)在田間試驗研究中表現(xiàn)出強(qiáng)于敏感種群的競爭優(yōu)勢[16]，但對于抗性種群適合度增高的原因尚未見報道，尤其是本試驗中發(fā)現(xiàn)的抗性日本看麥娘種群其表現(xiàn)出的適合度增高的原因，需要進(jìn)一步的試驗證明。

日本看麥娘屬群集性生長的一種雜草，田間出苗率很高[17]。過高或過低的種群密度都不利于其正常的生長。試驗證明，150～200株/0.11m2范圍內(nèi)有利于日本看麥娘的生長，抗性日本看麥娘種群的最佳生長密度208株/0.11m2，而敏感型為186株/0.11m2，這是否與抗性和敏感兩種種群的生長環(huán)境有關(guān)，需要進(jìn)一步的試驗研究。但其最佳種群密度結(jié)果的發(fā)現(xiàn)，對以后田間日本看麥娘的控制和防除有一定的幫助和支持。

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Research on Growth Rate and Planting Density of Japanese Foxtail (Alopecurusjaponicus) Resistant to Haloxyfop-R-methyl

ZHANG Bin1, LI Jun1,2, DONG Li-yao1,2

(1.College of Plant Protection,Nanjing Agricultural University/Key Laboratory of Monitoring and Management of Crop Diseases and Pest Insects,Ministry of Agriculture,Nanjing 210095,China；2.College of Science,Nanjing Agricultural University/Jiangsu Key Laboratory of Pesticide Science,Nanjing 210095,China)

The germination rate of Japanese foxtail(Alopecurusjaponicus)in the resistant and sensceptible population to haloxyfp-R-methyl could reach to more than 90% after 6 days for water soaking at 4 ℃,but dormancy breaking in the resistant population needed more time than that of sensceptible population.The resistant population presented a lower growths rate than that of sensceptible population after 15 days of sowing,but after that date the growth rate in resistant poputation was getting higher than that of sensceptible poputation. The resistant population began to appear the second leaf after 20 days for sowing that was later than sensceptible population by 2days,and the rate for the second leaf appearance in both populations could reach to 95% affer 25 days of sowing which proved that the resistant population grew more rapidly than that of sensceptible population during the later period of growth time after sowing. The resistant population performed a better growth than that of sensceptible population under the same planting density. Japanese foxtail could grow well under the planting density of 150～200 plants/0.11m2. The suitable growth density for resistant population cowld he designed as 208 plants/0.11m2,but 186 plants/0.11m2for sensceptible population.

Japanese foxtail(Alopecurusjaponicus);dormancy breaking; growth rate; growth densitity

2011-04-11

國家自然科學(xué)基金(編號：30971928)；國家博士點基金新教師類項目(編號：20090097120046)。

張 彬(1985—)，男，碩士研究生，研究方向為除草劑毒理及抗藥性。E-mail:2008102117@njau.edu.cn。

董立堯，博士，教授，從事除草劑毒理及抗藥性研究。Tel:(025)84395672； E-mail:dly@njau.edu.cn。

S451

A

1003-935X(2011)02-0043-04