原因不明復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)患者主動免疫治療前后血清 IL-6、IL-10、TNF-α水平變化

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(山東中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院,濟南 250001)

原因不明復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)(URSA)是指排除所有已知原因(包括內(nèi)生殖器解剖、內(nèi)分泌指標(biāo)、遺傳、感染、自身抗體等),連續(xù)3次或 3次以上的早期流產(chǎn)[1]。目前認為母體 Th1類細胞因子及 Th2類細胞因子與 URSA的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)[2]。近年來,主動免疫治療 URSA已取得良好效果。2006年 1月～2010年 6月,本研究觀察了 URSA患者主動免疫治療前后血清 IL-6、IL-10、TNF-α水平的變化?，F(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 ①URSA組:URSA患者 50例。年齡 24～39歲,自然流產(chǎn)≥3次,孕 5～11周。 ②正常非孕組:婦科門診要求取環(huán)、放環(huán)或婦科檢查婦女共 50例,年齡 24～40歲。既往有生育史,無難免流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎死產(chǎn)等不良孕產(chǎn)史。③對照組:行藥物流產(chǎn)或人工流產(chǎn)的婦女 50例,年齡 21～42歲。均有妊娠和分娩史,無死胎、死產(chǎn)或自然流產(chǎn)史。B超示胚胎發(fā)育正常。

1.2 主動免疫治療方法 免疫原采用丈夫或健康志愿者淋巴細胞。抽取靜脈血 20 ml,肝素抗凝,10 m l生理鹽水稀釋,混勻后分別放入含有淋巴細胞分離液的試管中,洗滌 1次,制成(3～4)×107/ml淋巴細胞懸液,于妻子臂內(nèi)側(cè)皮下注射 4～6點位。3周重復(fù) 1次,3次為 1個療程,1個療程后試孕,妊娠后鞏固 1次。

1.3 血清 IL-6、IL-10、TNF-α的檢測方法 采用ELISA法。分別于正常非孕組、對照組及 URSA組主動免疫治療前、治療 1個療程后 2周、妊娠后孕50 d抽取外周血檢測 IL-6、IL-10、TNF-α。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用 SPSS17.0統(tǒng)計軟件。計量資料用±s表示,用單因素方差分析(One-way ANOVA)。兩兩比較采用 SNK法。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 URSA組主動免疫治療結(jié)果 URSA中,10例1個療程后半年未孕。40例治療后 3～6個月內(nèi)妊娠,其中 30例在確定宮內(nèi)妊娠后即鞏固 1次,孕周≥28周治愈;1例孕 40 d宮外孕行手術(shù)治療;9例又出現(xiàn) URSA,其中 3例在確定宮內(nèi)妊娠后予免疫治療 1次,6例在行鞏固治療前流產(chǎn)。

2.2 URSA組治療前后及正常非孕組、對照組血清IL-6、IL-10、TNF-α水平比較 見表1。

表1 URSA組治療前后及正常非孕組、對照組血清IL-6、IL-10、TNF-α水平比較(±s)

表1 URSA組治療前后及正常非孕組、對照組血清IL-6、IL-10、TNF-α水平比較(±s)

注:與正常非孕組相比,*P＜0.05;與 URSA組治療前相比,#P＜0.05;與對照組相比,△P＞0.05;與URSA組治療后妊娠者、對照組相比,☆P＜0.05

組別 n IL-6(ng/L)IL-10(ng/L)TNF-α(ng/L)IL-6/TNF URSA組治療前 50 3.94±0.03*0.18±0.02*3.21±0.38*1.24±0.18*治療后 50 6.48±0.36#0.23±0.02#1.77±0.02#3.72±0.55#治療后妊娠者 30 13.46±0.94△ 0.29±0.03△ 0.55±0.04△24.50±2.34△治療后流產(chǎn)者 9 5.37±0.65☆ 0.18±0.01☆ 2.20±0.63☆ 2.63±0.83☆正常非孕組 50 5.58±0.40 0.21±0.03 1.86±0.13 3.02±0.23對照組 50 12.92±0.79 0.28±0.03 0.54±0.05 24.04±2.62

3 討論

目前許多對輔助性T細胞(Th)的研究證實,Th1與 Th2之間的平衡對維持正常妊娠起重要作用。正常妊娠表現(xiàn)為 Th2現(xiàn)象,處于 Th1抑制狀態(tài)[3]。

IL-6、IL-10同系 Th2型細胞因子。正常妊娠早期,IL-6通過自分泌或旁分泌調(diào)節(jié)胎盤激素的合成。IL-6低水平可能導(dǎo)致滋養(yǎng)細胞侵入表淺及胎盤血管形成障礙,最終導(dǎo)致妊娠失敗[4]。IL-10是由蛻膜NK細胞分泌的 Th2細胞因子之一。IL-10與子宮內(nèi)膜對胚胎植入的容受性形成有關(guān)[5]。Th2型細胞因子可抑制 Th1細胞因子介導(dǎo)的免疫應(yīng)答,使妊娠得以成功進行[5]。

TNF-α系 Th1型細胞因子。低濃度的 TNF能促進胚胎發(fā)育。若妊娠期間異常分泌大量 TNF-α,可抑制蛻膜血管形成,嚴重影響胎兒生長,乃至引起流產(chǎn)和早產(chǎn)[6]。張昌軍等[7]研究發(fā)現(xiàn),Th2/Th1細胞因子偏倚在超促排卵過程即呈現(xiàn)出 Th1型細胞因子分泌重度抑制,Th2型細胞因子分泌輕度抑制的趨勢;卵泡液 IL-6/TNF-α比值與胚胎質(zhì)量、妊娠結(jié)局呈正相關(guān)。

本研究結(jié)果顯示,URSA組治療前與對照組相比,IL-6、IL-10水平降低,而 TNF-α水平升高。提示出現(xiàn)“Th1優(yōu)勢”而導(dǎo)致妊娠失敗。URSA組主動免疫治療后,IL-10水平上升,TNF-α水平下降,而該組治療后再次流產(chǎn)者血清 IL-10水平降低,提示檢測IL-10水平對妊娠結(jié)局的評估有一定意義。

本研究發(fā)現(xiàn),URSA患者免疫治療后,IL-6、IL-10水平上升,TNF-α水平下降,且治療后成功妊娠者亦出現(xiàn)該趨勢,IL-6/TNF-α比值明顯上升,且 IL-6、IL-10、TNF-α水平與正常妊娠者相比無顯著差異。提示主動免疫治療可上調(diào) IL-6、IL-10水平,下調(diào) TNF-α水平,促使 Th1向 Th2轉(zhuǎn)換,并進一步使妊娠獲得成功。

[1]Costeas PA,Koumouli A,Giantsious-Kyriakou A,et al.Th1/Th2 cytokine genotypesare assotiated with pregnancy loss[J].Hum lmmunol,2004,65(2):135-141.

[2]Kayisli UA,MahutteNG,Arici A.Uterine chemokines in reproductive physiology and pathology[J].Reprod Immunol,2002,47(4):213-221.

[3]Beydoun H,Saftlas AF.Association of human leucocyte antigen sharingwith recurrent spontaneous abortions[J].Tissue Antigens,2005,65(2):123-135.

[4]張立.正常妊娠不同孕期血清 HCG及 IL-1β、IL-6和TNF-α水平的變化趨勢[J].武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2008,10(17):865.

[5]邱麗華.原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與 Th1/Th2型細胞因子[J].國外醫(yī)學(xué):計劃生育分冊,2000,19(1):20-23.

[6]IdrissHT,Naism i JH.TNF-alpha and the TNF receptor super family:structure function relationship[J].Micros Res,2000,50(3):184-195.

[7]張昌軍,王華,周艷梅,等.白細胞介素 6及腫瘤壞死因子對體外受精胚胎移植結(jié)局的影響[J].鄖陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2003,22(5):257-261.