結(jié)膜松弛癥的組織病理學(xué)及超微結(jié)構(gòu)變化研究

陳祎祎 彭建軍

(武漢市普仁醫(yī)院眼科 武漢 430081)

結(jié)膜松弛癥(conjunctivochalasis)是老年患者臨床中較為常見(jiàn)的眼科疾病,主要是因?yàn)榍蚪Y(jié)膜出現(xiàn)松弛過(guò)度和下瞼緣張力明顯增高所引起,最終導(dǎo)致眼表淚液學(xué)出現(xiàn)明顯異?，F(xiàn)象,同時(shí)還伴有眼部干澀,眼內(nèi)異物感覺(jué)及溢淚等多種不適癥狀[1～2]。本研究擬觀察結(jié)膜松弛癥的組織病理學(xué)及超微結(jié)構(gòu)變化情況。

1 資料與方法

1.1 一般資料

30例結(jié)膜松弛癥患者均為本院2007年10月至2008年3月期間行手術(shù)治療病例,同期選擇30例正常對(duì)照組。結(jié)膜松弛癥組：男性12例,女性18例,平均年齡為(71.3±6.4)歲,Ⅰ級(jí)15眼,Ⅱ級(jí)20眼,Ⅲ級(jí)20眼,Ⅳ級(jí)5眼;對(duì)照組：男性14例,女性16例,平均年齡為(70.7±6.6)歲。采集10例結(jié)膜松弛癥例患者的組織標(biāo)本,其中男性4例,女性6例,平均年齡為(70.8±6.2)歲,Ⅰ級(jí)2例,Ⅱ級(jí)3例,Ⅲ級(jí)4例,Ⅳ級(jí)1例;同期選擇本院非結(jié)膜松弛癥患者10例為對(duì)照組,其中男性4例,女性6例,平均年齡為(70.2±5.7)歲。2組在年齡、性別等各方面無(wú)顯著性差異(P>0.05),具有可比性。

1.2 組織標(biāo)本采集具體方法

松弛結(jié)膜癥患者及對(duì)照組切除部位均為雙眼鼻下方的區(qū)域,組織標(biāo)本應(yīng)做到相同部位,相同切除面積和相同采集方法。

1.3 淚液羊齒狀試驗(yàn)

淚液羊齒狀試驗(yàn)時(shí)間應(yīng)為每日10:00～12:00am,利用玻璃毛細(xì)管在患者下瞼結(jié)膜囊淚阜部位處通過(guò)吸取淚液組織標(biāo)本,操作過(guò)程中避免接觸眼球表面,將淚液組織標(biāo)本放置在載玻片上,經(jīng)處理后在顯微鏡下觀察分析并作出具體評(píng)級(jí),根據(jù)淚液羊齒狀結(jié)晶的完整性,均勻性和分支狀態(tài)等方面分為四個(gè)等級(jí)。Ⅰ級(jí):羊齒狀分支結(jié)晶圖表現(xiàn)為均勻且致密,空間間隔相對(duì)很小;Ⅱ級(jí):羊齒狀結(jié)晶圖表現(xiàn)為分支數(shù)量較少,且形態(tài)表現(xiàn)也較小,空間間隔相對(duì)較大;Ⅲ級(jí):羊齒狀結(jié)晶圖表現(xiàn)為分支數(shù)量明顯減少,空間間隔顯著增大;Ⅳ級(jí):很難發(fā)現(xiàn)有羊齒狀結(jié)晶圖,結(jié)晶呈不定型表現(xiàn)。其中Ⅰ、Ⅱ級(jí)均為正常表現(xiàn),而Ⅲ、Ⅳ級(jí)為異常表現(xiàn)。

表1 TFT的分級(jí)比例比較[例(%)]

1.4 組織標(biāo)本染色

組織標(biāo)本經(jīng)處理后采用PAS和AB等染色方法顯示杯狀細(xì)胞,同時(shí)制作電鏡標(biāo)本進(jìn)行觀察。

2 結(jié)果

2.1 TFT測(cè)定

結(jié)膜松弛癥組與對(duì)照組經(jīng)TFT檢測(cè)后發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組比較結(jié)膜松弛癥組患眼淚液中羊齒狀結(jié)晶明顯減少(P<0.05),隨著患者病情程度出現(xiàn)加重趨勢(shì),淚液中羊齒狀結(jié)晶明顯減少(P<0.05),見(jiàn)表1。

2.2 球結(jié)膜杯狀細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)

結(jié)膜松弛癥組球結(jié)膜杯狀細(xì)胞形態(tài)表現(xiàn)：球結(jié)膜鱗狀上皮呈厚薄不均勻的現(xiàn)象,一般為4～7層,上皮層中杯狀細(xì)胞的數(shù)量多少不等,但細(xì)胞的大小及組織形態(tài)相一致,各上皮細(xì)胞層中均可發(fā)現(xiàn)有杯狀細(xì)胞的存在,經(jīng)統(tǒng)計(jì)和分析發(fā)現(xiàn)100個(gè)上皮細(xì)胞內(nèi)約有2.74%為杯狀細(xì)胞,其細(xì)胞形態(tài)與脂肪細(xì)胞極為相似,杯狀細(xì)胞經(jīng)AB染色處理后表現(xiàn)為藍(lán)色,經(jīng)PAS染色處理后則表現(xiàn)為紅色,此外還可以發(fā)現(xiàn)有少數(shù)基底細(xì)胞色素沉著的現(xiàn)象。正常對(duì)照組球結(jié)膜杯狀細(xì)胞形態(tài)表現(xiàn)：球結(jié)膜上皮厚度較薄,僅有4～5層,且上皮層中杯狀細(xì)胞的數(shù)量多少不等,形態(tài)與結(jié)膜松弛癥的球結(jié)膜杯狀細(xì)胞形態(tài)表現(xiàn)相類(lèi)似,經(jīng)統(tǒng)計(jì)和分析發(fā)現(xiàn)100個(gè)上皮細(xì)胞內(nèi)約有4.63%的杯狀細(xì)胞。

2.3 球結(jié)膜杯狀細(xì)胞數(shù)量比較

結(jié)膜松弛癥組杯狀細(xì)胞平均密度為(2.74±1.98)/100個(gè)上皮細(xì)胞,對(duì)照組為(4.63±2.35)/100個(gè)上皮細(xì)胞,2組間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。根據(jù)臨床分級(jí)為Ⅰ～Ⅳ級(jí),Ⅰ級(jí)3.9%,Ⅱ級(jí)2.96%,Ⅲ級(jí)2.05%,Ⅳ級(jí)1.33%,結(jié)果顯示隨著結(jié)膜松弛癥病情程度的加重趨勢(shì),杯狀細(xì)胞密度也明顯出現(xiàn)下降。

2.4 球結(jié)膜杯狀細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)電鏡觀察

結(jié)膜松弛癥組電鏡觀察:可見(jiàn)杯狀細(xì)胞頂面胞質(zhì)內(nèi)堆積有大量漿液性分泌顆粒,顆粒呈不規(guī)則形狀,內(nèi)含有特殊的條紋樣物質(zhì),細(xì)胞基底面處含有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),內(nèi)有少量的線粒體,細(xì)胞核常位于細(xì)胞質(zhì)的一側(cè)。正常對(duì)照組電鏡觀察:可見(jiàn)杯狀細(xì)胞胞質(zhì)中存在大量電子密度較高,形態(tài)大小不等的黏液小滴狀物質(zhì);內(nèi)含有豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),鄰近細(xì)胞核的上部有一較大的高爾基體,黏液小滴可形成巨大團(tuán)塊。

3 討論

3.1 結(jié)膜松弛癥的組織病理學(xué)特點(diǎn)[3～4]

(1)結(jié)膜表面呈彎曲和皺褶等現(xiàn)象：在眼球與下瞼緣之間堆積松弛結(jié)膜,從而導(dǎo)致結(jié)膜表面出現(xiàn)彎曲和皺褶等現(xiàn)象,隨著結(jié)膜松弛程度的逐漸加重,彎曲和皺褶等現(xiàn)象的程度也逐漸加重,Ⅱ級(jí)未出現(xiàn)明顯的皺褶現(xiàn)象,Ⅲ級(jí)大多數(shù)出現(xiàn)皺褶現(xiàn)象,Ⅳ級(jí)均出現(xiàn)皺褶現(xiàn)象;(2)結(jié)膜鱗狀上皮增生明顯,且出現(xiàn)角化不全現(xiàn)象：結(jié)膜表面形成的彎曲皺褶要明顯突出于患者的眼球表面,使得淚河變的明顯狹窄不全,故在眼球結(jié)膜上難以形成正常的淚膜,進(jìn)而導(dǎo)致結(jié)膜異常干燥、充血水腫,失去原有的光澤現(xiàn)象,鱗狀上皮增生現(xiàn)象明顯;(3)基底細(xì)胞有明顯的色素沉著現(xiàn)象：Ⅰ、Ⅱ級(jí)基底細(xì)胞色素表現(xiàn)為局灶性沉著現(xiàn)象,Ⅲ級(jí)部分基底細(xì)胞中呈現(xiàn)疏密程度不同的色素沉著現(xiàn)象,Ⅳ級(jí)局部基底細(xì)胞呈現(xiàn)色素沉著的現(xiàn)象;(4)固有層中的血管出現(xiàn)明顯擴(kuò)張,瘀血、水腫及慢性炎癥反應(yīng)現(xiàn)象明顯：由于長(zhǎng)期反復(fù)的炎癥刺激以及眼瞼的摩擦損害,松弛結(jié)膜癥患者皺褶內(nèi)血管極易脆性變,眼瞼壓迫松弛的球結(jié)膜則易導(dǎo)致血管出現(xiàn)破裂現(xiàn)象,進(jìn)而發(fā)生結(jié)膜下出血現(xiàn)象;(5)彈力纖維出現(xiàn)異常變性和減少等現(xiàn)象,且膠原纖維也出現(xiàn)異常變性：各等級(jí)患者結(jié)膜內(nèi)彈力纖維出現(xiàn)程度不一的變性現(xiàn)象,而Ⅲ、Ⅳ級(jí)彈力纖維則顯著下降。既往大量研究結(jié)果表明：結(jié)膜松弛癥患者組織病理檢查結(jié)果可發(fā)現(xiàn)彈性纖維出現(xiàn)明顯的斷裂現(xiàn)象,而膠原纖維減少異常,彈力纖維減少這種現(xiàn)象的出現(xiàn)可導(dǎo)致球結(jié)膜彈性功能顯著下降,張力大小降低明顯,易產(chǎn)生結(jié)膜的松弛現(xiàn)象,故應(yīng)認(rèn)為是結(jié)膜自身生理改變的主要發(fā)病原因。

3.3 結(jié)膜松弛癥患者的超微組織結(jié)構(gòu)改變情況[5]

結(jié)膜松弛癥患者成纖維細(xì)胞的細(xì)胞胞質(zhì)中存在著較多擴(kuò)張的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和游離核糖體物質(zhì),而細(xì)胞胞質(zhì)外周?chē)鷧^(qū)則有較多衣小泡的吞飲泡組織結(jié)構(gòu),結(jié)膜成纖維細(xì)胞生理功能發(fā)生顯著性改變,必然會(huì)引起細(xì)胞外上述各種組織成分的顯著變化,從而影響外基質(zhì)各種成分的平衡狀態(tài)和穩(wěn)定性,最終發(fā)生結(jié)膜松弛癥。

本研究結(jié)果顯示：結(jié)膜松弛癥患者的淚液分泌量明顯減少,淚膜的穩(wěn)定性狀態(tài)顯著下降,淚液中羊齒狀結(jié)晶形成異常減少等現(xiàn)象,均可以間接證實(shí)患者淚液中的黏蛋白成分異常減少。故可知,隨著結(jié)膜松弛癥程度加重,結(jié)膜松弛癥球結(jié)膜杯狀細(xì)胞組織形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)有異常改變。

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