漿膜腔積液涂片和細(xì)胞塊雙方法檢測(cè)白血病細(xì)胞在臨床中的應(yīng)用

張功亮，黃金長(zhǎng)，彭 芳，曾金林，王 建，郭廣秀，肖軍蘭，湛 曦，陳 青，余燕琪

(江西省贛州市人民醫(yī)院病理科，江西 贛州 341000)

漿膜腔積液是白血病患者常見(jiàn)的臨床表現(xiàn)[1]，診斷漿膜腔積液中的白血病細(xì)胞難度較大。本文對(duì)有骨髓涂片對(duì)照的伴發(fā)漿膜腔積液的白血病病例1例，用漿膜腔積液涂片加細(xì)胞塊方法對(duì)其細(xì)胞形態(tài)、免疫表型等特征進(jìn)行分析，探討如何用漿膜腔積液涂片加細(xì)胞塊檢測(cè)方法正確診斷漿膜腔積液中的淋巴造血組織腫瘤。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 患者男性，75歲，因頭暈，乏力，胸悶3月余入院。查體：重度貧血外貌，全身皮膚黏膜未見(jiàn)出血點(diǎn)和瘀斑，脾臟中度腫大。血常規(guī)：白細(xì)胞：13.2×109/L，中性粒細(xì)胞百分比：45.2%，單核細(xì)胞百分比 22.3%，紅細(xì)胞 1.98×1012/L，血紅蛋白 59g/L，血小板75×109/L。血涂片異常白細(xì)胞形態(tài)觀察：見(jiàn)有幼稚細(xì)胞。骨髓涂片：有核細(xì)胞增生明顯活躍，原粒細(xì)胞20%，早幼粒細(xì)胞1%，原單4%，幼單11.5%，診斷：急性粒-單核細(xì)胞白血病。X線：雙側(cè)胸腔中度積液。

1.2 漿膜腔積液標(biāo)本由臨床醫(yī)師采集，制備細(xì)胞離心涂片和細(xì)胞塊切片，細(xì)胞涂片采用瑞氏染色，細(xì)胞塊切片采用蘇木素-伊紅染色。

1.3 免疫細(xì)胞化學(xué) 用3μm厚細(xì)胞塊石蠟切片做免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)，使用的第一抗體有LCA、MPO、CD117、CD34、CD68、Calretini。 抗體均購(gòu)自福建邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司，免疫細(xì)胞化學(xué)染色采用SP法。陽(yáng)性信號(hào)定位：LCA陽(yáng)性信號(hào)位于細(xì)胞膜;MPO、CD117、CD68、Calretinin 陽(yáng) 性 信 號(hào) 位 于 細(xì) 胞質(zhì)；CD34陽(yáng)性信號(hào)位于細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)。

2 結(jié)果

2.1 血性胸水500ml。

2.2 細(xì)胞涂片 查見(jiàn)大量形態(tài)一致中等偏小的幼稚細(xì)胞(約占70%～80%)，另見(jiàn)部分中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞(圖 1)。

2.3 細(xì)胞塊切片均查見(jiàn)形態(tài)一致中等偏小的細(xì)胞，散在分布，細(xì)胞胞質(zhì)少，核圓形或卵圓形，染色質(zhì)細(xì)膩(圖 2)。

2.4 免疫細(xì)胞化學(xué)特征：腫瘤細(xì)胞表達(dá)MPO(圖3)、CD117、CD34 和 CD68，淋巴細(xì)胞表達(dá) LCA,間皮細(xì)胞表達(dá)Calretinin。

圖1 細(xì)胞涂片中形態(tài)一致中等偏小的腫瘤細(xì)胞約占70%～80%瑞氏染色 ×400

圖2 細(xì)胞塊中腫瘤細(xì)胞形態(tài)一致中等偏小，細(xì)胞胞質(zhì)少，核圓形或卵圓形 HE染色×200

圖3 腫瘤細(xì)胞MPO陽(yáng)性 SP法 ×400

2.5 胸水細(xì)胞涂片和細(xì)胞塊切片診斷：查見(jiàn)髓系白血病細(xì)胞。

3 討論

漿膜腔積液是白血病患者常見(jiàn)的并發(fā)癥，多數(shù)白血病患者發(fā)生漿膜腔積液是由于腫瘤浸潤(rùn)漿膜或器官所致，出現(xiàn)漿膜腔積液提示預(yù)后不良[1，2]。漿膜腔積液中白血病細(xì)胞的特征是較多散在的形態(tài)較一致的不成熟細(xì)胞，但不同類型的淋巴造血組織腫瘤細(xì)胞形態(tài)不同，需要借助輔助方法來(lái)進(jìn)一步確診。細(xì)胞塊的應(yīng)用彌補(bǔ)了細(xì)胞涂片方法單一的缺點(diǎn)，使細(xì)胞標(biāo)本得以保存，具有了連續(xù)切片的可能，有利于進(jìn)行多項(xiàng)檢查 ，而且操作方法簡(jiǎn)便，無(wú)需特殊儀器。用細(xì)胞塊石蠟切片可以進(jìn)行多種抗體的免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)，操作方便[3，4]。免疫細(xì)胞化學(xué)染色操作簡(jiǎn)便，陽(yáng)性物質(zhì)定位準(zhǔn)確、敏感性高、特異性強(qiáng)，使用免疫表型來(lái)協(xié)助確定細(xì)胞學(xué)診斷，不僅可以區(qū)分是否是白血病細(xì)胞，而且可以進(jìn)一步確定腫瘤細(xì)胞的免疫表型，從而提高腫瘤細(xì)胞學(xué)診斷的準(zhǔn)確性[5]。以漿膜腔積液為首發(fā)癥狀的淋巴造血組織腫瘤容易誤診，需要與良性淋巴細(xì)胞增生性病變以及其他小圓細(xì)胞腫瘤等進(jìn)行鑒別診斷。

本例為急性粒-單核細(xì)胞白血病患者的血性胸腔積液，積液涂片全片70%～80%為幼稚細(xì)胞，這些細(xì)胞形態(tài)一致中等偏小，散在分布，細(xì)胞胞質(zhì)少，核圓形或卵圓形，染色質(zhì)細(xì)膩，免疫表型表達(dá)LCA、MPO、CD117、CD34和CD68，胸水細(xì)胞涂片和細(xì)胞塊切片診斷：查見(jiàn)髓系白血病細(xì)胞。細(xì)胞病理診斷漿膜腔積液的白血病細(xì)胞難度較大，本文介紹的經(jīng)驗(yàn)為及時(shí)發(fā)現(xiàn)白血病細(xì)胞和檢測(cè)該病的復(fù)發(fā)提供依據(jù)。

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