蒼艾香薰油的氣相色譜——質(zhì)譜分析*

陳柏君，馬云淑，熊 磊

(云南中醫(yī)學院，云南 昆明 650500)

蒼艾香熏油系以熊磊教授預防上呼吸道感染的臨床效驗方為基礎(chǔ)，選用蒼術(shù)、艾葉、藿香等含揮發(fā)油成分較多、氣味清香、抗菌力強的中藥組方。方中蒼術(shù)、艾葉芳香化濕、避穢解毒為君;藿香芳香化濕、解表祛暑為臣，諸藥合用，共奏芳香化濁、避穢解毒之功。本研究將蒼艾復方制成新型鼻腔給藥吸入劑，通過水蒸氣蒸餾法提取復方中的揮發(fā)油，觀察蒼艾香薰油的穩(wěn)定性并用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用 (GC－MS)法對其主要化學成分進行分析鑒定，用歸一法計算各組分的相對百分含量，考察提取工藝的可行性。實驗結(jié)果證實蒼艾香薰油提取工藝可行，能較好的保留組方藥物的主要有效成分，現(xiàn)報道如下:

1 儀器與藥材

儀器:揮發(fā)油提取器、冷凝管、調(diào)溫電熱套(北京中興偉業(yè)儀器有限公司)，萬能粉碎機 (中草藥萬能粉碎機FW177型，天津市泰斯特儀器有限公司)，氣相色譜儀 (美國氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用儀Agilent Technologies公司HP5890)，氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用儀 (美國 Agilent Technologies公司HP6890GC/5973MS)。

藥材:蒼術(shù)為菊科植物北茅術(shù) (Atractylodes chinensis(DC．)Koidz．)的干燥根莖 (產(chǎn)品批號:20090301，毫州雙華中藥飲片廠);艾葉為菊科多年生植物艾葉 (Artemisia argyi Levl．et Vant．)的干燥葉 (產(chǎn)品批號:20090301，毫州雙華中藥飲片廠);藿香為唇形科植物廣藿香 (Pogostemon cablin(Blanco)Benth．)的干燥地上部分 (產(chǎn)品批號:20090204，鴻翔中草藥有限公司)。 (均購自昆明一心堂藥業(yè)，經(jīng)云南中醫(yī)學院中藥學院藥植鑒定教研室楊樹德教授鑒定備用。)

2 蒼艾香薰油提取

將蒼術(shù)、艾葉粗粉;精確稱取蒼術(shù)、艾葉各100g，其余組方藥各50g;將其置于5000mL的圓底燒瓶中，采用水蒸汽蒸餾法，選用揮發(fā)油提取器，按照2010版藥典附錄XD揮發(fā)油測定法－甲法進行實驗，每次加入8倍量水，浸泡8～10h，提取7h，收集到的蒼艾香薰油為金黃色油狀液體，密度＜1，用無水硫酸鈉除去其中多余的水分，保留在棕色瓶放入2～8℃的冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

3 氣質(zhì)色譜分析

3.1 待測樣品

1#:為水蒸氣提取后加入無水硫酸鈉除去多余的水分所得蒼艾香薰油

2#:為水蒸氣提取后繼續(xù)回流提純，300℃加熱30min所得蒼艾香薰油

3.2 GC條件

HP－5MS石英毛細管色譜柱 (30m×0.25mm×0.25μm)，柱溫80～240℃，程序升溫3℃/min;柱流量為1.0mL/min;進樣口溫度250℃，柱前壓100kPa，進樣量0.05μl;分流比40∶1，載氣為高純氦氣。

3.3 MS條件

電離方式 El，電子能量70eV，離子源溫度250℃，離子源溫度230℃，四級桿溫度150℃，質(zhì)量范圍35～500，采用wiley7n.1標準庫計算機索定性。

3.4 方法

考察香薰油的質(zhì)量以及在高溫加熱后的穩(wěn)定性。

3.5 結(jié)果

3.5.1 蒼艾香薰油的穩(wěn)定性變化高溫加熱后蒼艾香薰油的體積無明顯變化，顏色變化較為明顯，由原來的金黃色變成了紅褐色，性狀無明顯改變，但是流動性明顯增強了。見表1。

3.5.2 氣質(zhì)色譜分析

經(jīng)氣質(zhì)色譜分析，本實驗提取的揮發(fā)油共檢測出37種化學成分，鑒定了其中13種主要化學成分及含量，見圖1、表2所示。1號樣品的大部分化學成份的含量均高于2號樣品。說明高溫加熱后對藥物化學成分的含量有一定的影響，能降低其大部分有效成分的含量，產(chǎn)生刺鼻的香氣，顏色更深，但還不能肯定有無成份的變化。因此，我們選擇質(zhì)量和氣味更佳的1號樣品進行動物實驗。

表2 蒼艾香薰油主要成份及含量

4 討論

4.1 制劑工藝研究

目前，藥用植物中揮發(fā)油的提取方法研究報道較多，主要有:水蒸氣蒸餾法、有機溶劑提取法、吸收法、壓榨法、酶法、破碎提取法、超臨界流體萃取 (SFE)、微波膠囊—雙水相萃取、超臨界二氧化碳萃取—分子蒸餾、超聲波輔助提取法等[1]。由于水蒸氣蒸餾法具有設備簡單、容易操作、成本低、提油率高等優(yōu)點，故本實驗采用此方法，且參考前期研究結(jié)果[2]，確定制劑工藝為加水8倍，浸泡8～10h，提取7h，且共同蒸餾提取的揮發(fā)油對URI常見菌株抑菌作用較單味提取后混合的效果好。可能因為復方藥物在共同煎煮的過程中其各味中藥之間可能存在一些理化反應，產(chǎn)生協(xié)同作用提高臨床療效，但是要區(qū)分出其中的化學成分來自某藥就有難度，可能同時有幾種藥物都含有，因此不能確定該化學成分就一定是某種藥物提取出來的，只能推測可能來自組方中的某藥。

4.2 現(xiàn)代藥理研究

蒼艾香熏油以熊磊教授臨床用藥經(jīng)驗為基礎(chǔ)，選用蒼術(shù)、艾葉、藿香等含揮發(fā)油成分較多、氣味清香、抗菌力強的中藥為組方?，F(xiàn)代藥理研究表明，蒼術(shù)主要成分為揮發(fā)油，約5%～9%油中主要成分為蒼術(shù)醇;蒼術(shù)醇為β－桉葉油醇和茅術(shù)醇的混合物，兩者含量比約為6∶4[3]，此外還有反式石竹烯、γ欖香烯、月桂烯醇[4]等化合物。蒼術(shù)煙熏對結(jié)核桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草桿菌及銅綠假單飽桿菌有顯著的滅菌效果，與福爾馬林相似，而優(yōu)于紫外線及乳酸的消毒[5]。茅蒼術(shù)中果聚糖酸對白色酵母感染的小鼠有明顯的預防作用，可以延長小鼠存活時間[6];艾葉主要含揮發(fā)油及甾醇類、多糖類、微量元素等成分[7]，其揮發(fā)油主要含桉油精、β－檸檬烯醇、沉香醇[8]、樟腦、龍腦、芳樟醇、β－石竹烯、α－水芹烯、莰烯等[9]具有較強的抗菌作用[10]、抗病毒作用、抗呼吸道合胞病毒、增強網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞的吞噬功能[11]，此外，蒼術(shù)艾葉香熏后 SIgA含量明顯提高[12];藿香其莖葉中含有豐富的揮發(fā)油，含有較多的單萜烯、倍半萜烯、醇類、酮類醛類和烷酸類化合物[13]，廣藿香醇、丁香烯，β－蒎烯、α－莪術(shù)烯、γ－芹子烯、α－蒎烯[14－15]等，其水提物對金黃色葡萄球菌、枯草桿菌、綠膿桿菌、腸炎球菌等有較強抑菌作用[16]。另外，藿香揮發(fā)油有防腐作用，利于制劑的保存[17]。

與文獻中單味藥揮發(fā)油提取出的化學成分進行比較，組方中君藥的主要化學成份本復方揮發(fā)油中基本含有，說明蒼艾香薰油提取工藝可行，能較好的保留組方藥物中的主要有效成分。為將來制定蒼艾香薰油的質(zhì)量標準打下基礎(chǔ)。

[1]王亞莉，張昆，方巖雄，等．現(xiàn)代分離技術(shù)在揮發(fā)油提取中的應用研究 [J]．香料香精化妝品，2003，(10):27－29．

[2]明溪．蒼艾香熏油體外抑菌作用研究 [J]．云南中醫(yī)學院學報，2008，31(1):34－35．

[3]歐陽臻，江濤濤，繆亞東，等．蒼術(shù)的化學成分、道地性和藥理活性研究進展 [J]．時珍國醫(yī)國藥，2006，17(10):2612－2616．

[4]劉曉東．蒼術(shù)揮發(fā)油成分的分析 [J]．分析測試學報，1998，17(3):56－57．

[5]江蘇新醫(yī)學院．中藥大辭典 [M]．上海:上?？茖W技術(shù)出版社，1993:1006．

[6]Inagaki N，Komatsu Y，Sasaki H，et a1．Acidic polysaccharides from rhizomes of Atracty'lodes lancea as protective principle in Candida－lnfected mice．Planta Med，2001，67(5):428．

[7]徐新建，宋海，韓玉琦，等．艾葉揮發(fā)油化學成分的氣相色譜 －質(zhì)譜聯(lián)用分析 [J]，時珍國醫(yī)國藥，2007，18(11):2657－2658．

[8]丁林生，孟正木．中藥化學 [M]．南京:東南大學出版社，2005:113．

[9]劉向前，陳素珍，倪娜．湖南產(chǎn)艾葉揮發(fā)油成分的GC－MS研究 [J]．中藥材，2005，28(12):1069．

[10]孫麗，席家寧，康麗君，等．對氨基水楊酸異煙肼對耐INH和PAS結(jié)核菌的耐藥實驗觀察 [J]．中國防癆雜志，2001，23(2):110－111．

[11]梅全喜．艾葉的藥理作用研究概況 [J]．中草藥，1996，27(5):311－314．

[12]張其正，鄭志學，童葵塘，等．蒼術(shù)艾葉煙熏預防流感效果觀察 [J]．新醫(yī)學，1979， (9):412－415．

[13]張英，張金超，陳瑤，等．廣藿香生藥、化學及藥理學的研究進展 [J]．中草藥，2006，37(5):786－790．

[14]Du Y M，Chen R Z，Hu B R．Research progress on chemical constituents and pharmacological function of Pogostemon cablin Benth[J]．Tradit Chin Drug Res Clin Pharmacol，1998，9(4):238 －241．

[15]Zhang G W，Ma X Q，Su J Y，et al．Analysis of flavonoids isolated from Pogostemon cablin Benth [J]．Chin Tradit Herb Drugs，2001，32(10):871 －874．

[16]羅超坤．廣藿香水提物的抗菌實驗研究 [J]．中藥材，2005，28(8):700－701．

[17]Wang J H，F(xiàn)u H．Study on chemical constituents of the volatile oil ofCablin potchouli[J]．Lishizhen Med Mater Med Res，2000，11(7):579－580．