謝燕賢,陳麗娜,溫中明,李東(1.深圳市寶安區(qū)石巖人民醫(yī)院,深圳市 518108;.深圳市寶安區(qū)人民醫(yī)院,深圳市 518101;.深圳市光明新區(qū)公明人民醫(yī)院,深圳市 518106;.深圳市人民醫(yī)院,深圳市 51800)
鹽酸洛美沙星是第3代喹諾酮類抗菌藥物,具有優(yōu)良的藥動學(xué)和藥效學(xué)特征,毒副作用小,不易產(chǎn)生耐藥性,抗菌譜廣,對金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、變形桿菌及大腸桿菌都有很強的抗菌活性,在國外已被廣泛應(yīng)用[1]。地塞米松為甾體類強效抗炎藥,對各種耳部手術(shù)后的輔助治療有顯著作用,能有效減輕病變過程中的炎癥反應(yīng)和組織損害,減少疤痕形成,抑制抗原抗體反應(yīng),使炎癥反應(yīng)過程縮短[2]。炎癥常由細(xì)菌感染引起,在應(yīng)用抗菌藥物抗感染的同時應(yīng)用強效抗炎藥以產(chǎn)生協(xié)同作用來防止或減輕炎癥很有必要。目前市場上五官科制劑數(shù)量少,耐藥菌日益增多,臨床急需新型藥物,為此筆者研發(fā)了復(fù)方洛美沙星緩釋凝膠滴耳劑(Compound Lomefloxacin Gel Eardrops,CLGE),用于治療敏感菌引起的中耳炎、外耳道炎,使用方法為滴耳,每日2次,每次3~4滴。為控制其質(zhì)量,筆者對其質(zhì)量進行了考察。
鹽酸洛美沙星標(biāo)準(zhǔn)品(批號:0452-200001,純度:90.0%)、地塞米松標(biāo)準(zhǔn)品(批號:100122-200304,純度:98.5%)均由中國藥品生物制品檢定所提供;復(fù)方洛美沙星緩釋凝膠滴耳劑(深圳市人民醫(yī)院,批號:20100923、20100924、20100925,規(guī)格:每支5 mL);卡波姆-940(上海人民制藥廠,批號:040823);其他輔料均為藥用級,試劑均為分析純。
1100型高效液相色譜(HPLC)儀(美國Agilent公司);AEL204電子微量分析天平(瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司);KQ-500B超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);7530G分光光度計(上?;萜辗治鰞x器有限公司)。
2.1.1 處方組成。
鹽酸洛美沙星3 g,地塞米松1 g,丙二醇30 mL,甘油20 mL,乙醇20 mL,卡波姆-94010.0 g,三乙醇胺13.5 g,純化水適量,加至1000 mL。
2.1.2 制備方法。
將處方量的卡波姆-940攪拌后緩慢加到適量的水中,充分?jǐn)嚢?,使溶脹分散均勻,加入甘油研勻,然后邊攪拌邊加入三乙醇胺,使成凝膠基質(zhì);取處方量的鹽酸洛美沙星和地塞米松加入水中,再加入乙醇和丙二醇攪拌使溶解混勻,將藥液滴加到凝膠基質(zhì)中,在攪拌下將蒸餾水加至全量,攪拌均勻,調(diào)節(jié)pH值為5.5~6.5,得白色半透明膠體,分裝即得。
2.2.1 性狀。
本品為白色半透明凝膠,均勻細(xì)膩,分散性好。
2.2.2 鑒別。
(1)鹽酸洛美沙星:取本品2 g,置于水浴上加熱蒸干,加丙二酸30 mg、醋酐0.5 mL,水浴加熱10 min,顯紅棕色。
(2)地塞米松:取本品2 mg,加硫酸2 mL,振搖溶解,5 min內(nèi)溶液顯淡紅棕色,加水10 mL混勻,顏色消失。
2.2.3 檢查。
取本品5 g,加純化水25 mL稀釋,攪拌5 min后測定pH值為5.8,符合滴耳劑弱酸性的要求。
2.2.4 含量測定[3,4]。
本品系含鹽酸洛美沙星和地塞米松的復(fù)方制劑,在控制產(chǎn)品質(zhì)量時需要檢測此2種成分。但因上述2種成分在同一色譜條件下不易完全分離,故分別參照陳麗娜等[3,4]所述方法建立不同的HPLC色譜條件分別進行檢測。
(1)色譜條件:①地塞米松。色譜柱:Alltima HP C1(8250 mm ×4.6 mm,5 μm);流動相:乙腈-水(40∶60),pH:3.0~3.5;流速:1.0 mL·min-1;檢測波長:240 nm;柱溫:40 ℃;進樣量:20 μL。理論板數(shù)以地塞米松計算不低于5000。②鹽酸洛美沙星。色譜柱:Diamonsil C1(8250 mm×4.6 mm,5μm);流動相:0.05 mol·L-1枸櫞酸溶液(用三乙胺調(diào)節(jié)pH至4.0)-乙腈(85∶15);流速:1.0 mL·min-1;檢測波長:287 nm;柱溫:25 ℃;進樣量:20 μL。理論板數(shù)以鹽酸洛美沙星計算不低于2500。
(2)方法學(xué)考察:按規(guī)定方法進行含量測定方法學(xué)考察,結(jié)果表明,所建立的方法線性關(guān)系、精密度、穩(wěn)定性、回收率均較好,各成分色譜峰可達(dá)基線分離,分離度大于1.5,空白輔料無干擾。
(3)含量測定:分別精密吸取標(biāo)準(zhǔn)品與供試品溶液[3,4]各20 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定,記錄色譜,以外標(biāo)法計算樣品中鹽酸洛美沙星和地塞米松的含量,結(jié)果見表1。
表1 樣品含量測定結(jié)果(n=3)Teb 1 Results of content determination of samples(n=3)
2.2.5 體外釋放度的測定。
取本品3 mL(約相當(dāng)于鹽酸洛美沙星9 mg,地塞米松3 mg),裝入透析袋中,加入1 mL含5%乙醇的磷酸鹽緩沖液(pH=7.4)。透析袋用膠線封好,放入100 mL錐形瓶中,加入50 mL釋放介質(zhì)(含5%乙醇的磷酸鹽緩沖液),固定于恒溫水浴振蕩器中(37 ℃,60 r·min-1)。分別在1、12、24、36、48、64、72、84 h時取樣5 mL(補充相同溫度的釋放介質(zhì)5 mL),以色譜法測定含量,計算凝膠中藥物的累積釋放百分率,釋藥曲線見圖1。
圖1 復(fù)方洛美沙星緩釋凝膠滴耳劑體外釋藥曲線Fig 1 Accumulative released curve of Compound lomefloxacin sustained-release gel eardrops in vitro
由圖1可見,復(fù)方洛美沙星緩釋凝膠滴耳劑有明顯的緩釋作用,鹽酸洛美沙星和地塞米松1 h時累積釋藥百分率均小于30%,36 h時分別為53%、52%,72 h時均大于80%,符合緩釋制劑釋放度規(guī)定。
2.2.6 穩(wěn)定性試驗。
(1)光照試驗:取本品在照度(4500±500)lx條件下放置10 d,分別于0、1、3、5、10 d時取樣,觀察外觀變化,測定pH值、主藥含量。結(jié)果10 d時制劑外觀顏色稍加深,pH值略有下降,鹽酸洛美沙星和地塞米松含量分別下降為90.1%和92.2%,結(jié)果詳見表2。
表2 樣品光照和高溫試驗結(jié)果Tab 2 Results of light and high temperature tests
(2)高溫試驗:取本品在60℃恒溫水浴箱中放置10 d,并分別于0、1、3、5、10 d時取樣,觀察外觀變化,測定pH值及鹽酸洛美沙星和地塞米松的含量。結(jié)果10 d內(nèi)制劑外觀無明顯變化,pH值、鹽酸洛美沙星和地塞米松的含量也無明顯變化,結(jié)果詳見表2。
(3)離心試驗:取本品置于離心管中,3000 r·min-1離心30 min后觀察,未見分層現(xiàn)象。
(4)耐熱耐寒試驗:將本品分別置于55℃水浴6 h和-4℃冰箱24 h,未見分層現(xiàn)象,性狀和黏度也均無變化。
(5)放置試驗:取3批本品各5支,分別于(39±1)、(25±1)、(5±2)℃下避光放置6個月,結(jié)果,性狀、黏度均無變化,pH值、含量、粒度、裝量和微生物限度符合2010年版《中國藥典》(二部)凝膠劑和滴耳劑項下規(guī)定[5],結(jié)果詳見表3。
表3 樣品放置試驗結(jié)果(n=3)Tab 3 Results of placement tests(n=3)
2.2.7 衛(wèi)生學(xué)檢查。
選用膜過濾法檢查本品,結(jié)果細(xì)菌總數(shù)<10個/mL,霉菌總數(shù)<10個/mL,未檢出綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌。
復(fù)方洛美沙星緩釋凝膠滴耳劑為新型復(fù)方制劑,選用抗菌譜廣、活性強的鹽酸洛美沙星與強效抗炎藥地塞米松配伍,安全性更好,生物利用度高。由于目前國內(nèi)洛美沙星尚無凝膠滴耳劑研制的文獻(xiàn)報道,因此其有非常廣闊的應(yīng)用前景。
本制劑選用卡波姆-940為處方基質(zhì),采用膠體磨和緩釋技術(shù)制備而成??ú?940是丙烯酸基蔗糖交聯(lián)的高分子聚合物,水溶性高,穩(wěn)定性強,對皮膚和黏膜無刺激性[5]。將鹽酸洛美沙星、地塞米松與卡波姆-940混合制成親水性凝膠滴耳劑,不僅使藥物易于分散,而且能增大黏度,延長藥物與病灶接觸面積和滯留時間,利于提高藥物利用率。另外,在處方中加入甘油可進一步延長藥物在病灶周圍的滯留時間,使之具有明顯緩釋功效。而乙醇可增加藥物穿透作用,使其充分發(fā)揮藥效。三乙醇胺作為中和劑,將pH值調(diào)至5.5~6.5,使其具有良好的穩(wěn)定性和有效性,符合耳科用藥特點。
穩(wěn)定性試驗表明,鹽酸洛美沙星和地塞米松對光不穩(wěn)定,與相關(guān)文獻(xiàn)[6,7]報道一致。因此,在制備和分析測試過程中應(yīng)采取黑布遮光,本品也宜采取避光放置貯存。
綜上所述,該制劑制備工藝簡單,質(zhì)量可控,具有明顯的緩釋作用,避光保存為宜。
[1]方淑賢,杜 光,方建國.臨床藥物指南[M].第2版.北京:科學(xué)出版社,2005:49.
[2]李淑華.鼓室內(nèi)注射地塞米松治療突發(fā)性耳聾臨床觀察[J].中國臨床醫(yī)藥研究雜志,2008,7(2):9.
[3]陳麗娜,李 東,謝燕賢,等.高效液相色譜法測定復(fù)方洛美沙即型凝膠滴耳劑中地塞米松含量[J].中國藥業(yè),2010,19(12):36.
[4]陳麗娜,李 東,謝燕賢,等.HPLC法測定復(fù)方洛美沙星即型凝膠滴耳劑中洛美沙星的含量[J].中國藥房,2010,21(25):2371.
[5]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典(二部)[S].2010年版.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:711-712,附錄16、19.
[6]楊 紅,陳 艷,陸 彬,等.醋酸地塞米松眼用凝膠劑的制備與質(zhì)量控制[J].中國藥師,2004,7(11):839.
[7]王樹平,張廣求,劉 文.復(fù)方鹽酸洛美沙星凝膠的制備及質(zhì)量控制[J].中國藥業(yè),2008,17(11):40.