復(fù)方洛美沙星緩釋凝膠滴耳劑的制備及其質(zhì)量控制

謝燕賢，陳麗娜，溫中明，李東（1.深圳市寶安區(qū)石巖人民醫(yī)院，深圳市 518108；.深圳市寶安區(qū)人民醫(yī)院，深圳市 518101；.深圳市光明新區(qū)公明人民醫(yī)院，深圳市 518106；.深圳市人民醫(yī)院，深圳市 51800）

鹽酸洛美沙星是第3代喹諾酮類抗菌藥物，具有優(yōu)良的藥動學(xué)和藥效學(xué)特征，毒副作用小，不易產(chǎn)生耐藥性，抗菌譜廣，對金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、變形桿菌及大腸桿菌都有很強的抗菌活性，在國外已被廣泛應(yīng)用[1]。地塞米松為甾體類強效抗炎藥，對各種耳部手術(shù)后的輔助治療有顯著作用，能有效減輕病變過程中的炎癥反應(yīng)和組織損害，減少疤痕形成，抑制抗原抗體反應(yīng)，使炎癥反應(yīng)過程縮短[2]。炎癥常由細(xì)菌感染引起，在應(yīng)用抗菌藥物抗感染的同時應(yīng)用強效抗炎藥以產(chǎn)生協(xié)同作用來防止或減輕炎癥很有必要。目前市場上五官科制劑數(shù)量少，耐藥菌日益增多，臨床急需新型藥物，為此筆者研發(fā)了復(fù)方洛美沙星緩釋凝膠滴耳劑（Compound Lomefloxacin Gel Eardrops，CLGE），用于治療敏感菌引起的中耳炎、外耳道炎，使用方法為滴耳，每日2次，每次3～4滴。為控制其質(zhì)量，筆者對其質(zhì)量進行了考察。

1 試藥與儀器

1.1 試藥

鹽酸洛美沙星標(biāo)準(zhǔn)品（批號：0452-200001，純度：90.0%）、地塞米松標(biāo)準(zhǔn)品（批號：100122-200304，純度：98.5%）均由中國藥品生物制品檢定所提供；復(fù)方洛美沙星緩釋凝膠滴耳劑（深圳市人民醫(yī)院，批號：20100923、20100924、20100925，規(guī)格：每支5 mL）；卡波姆-940（上海人民制藥廠，批號：040823）；其他輔料均為藥用級，試劑均為分析純。

1.2 儀器

1100型高效液相色譜（HPLC）儀（美國Agilent公司）；AEL204電子微量分析天平（瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司）；KQ-500B超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；7530G分光光度計（上?；萜辗治鰞x器有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 復(fù)方洛美沙星緩釋凝膠滴耳劑的制備

2.1.1 處方組成。

鹽酸洛美沙星3 g，地塞米松1 g，丙二醇30 mL，甘油20 mL，乙醇20 mL，卡波姆-94010.0 g，三乙醇胺13.5 g，純化水適量，加至1000 mL。

2.1.2 制備方法。

將處方量的卡波姆-940攪拌后緩慢加到適量的水中，充分?jǐn)嚢?，使溶脹分散均勻，加入甘油研勻，然后邊攪拌邊加入三乙醇胺，使成凝膠基質(zhì)；取處方量的鹽酸洛美沙星和地塞米松加入水中，再加入乙醇和丙二醇攪拌使溶解混勻，將藥液滴加到凝膠基質(zhì)中，在攪拌下將蒸餾水加至全量，攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH值為5.5～6.5，得白色半透明膠體，分裝即得。

2.2 質(zhì)量控制

2.2.1 性狀。

本品為白色半透明凝膠，均勻細(xì)膩，分散性好。

2.2.2 鑒別。

（1）鹽酸洛美沙星：取本品2 g，置于水浴上加熱蒸干，加丙二酸30 mg、醋酐0.5 mL，水浴加熱10 min，顯紅棕色。

（2）地塞米松：取本品2 mg，加硫酸2 mL，振搖溶解，5 min內(nèi)溶液顯淡紅棕色，加水10 mL混勻，顏色消失。

2.2.3 檢查。

取本品5 g，加純化水25 mL稀釋，攪拌5 min后測定pH值為5.8，符合滴耳劑弱酸性的要求。

2.2.4 含量測定[3，4]。

本品系含鹽酸洛美沙星和地塞米松的復(fù)方制劑，在控制產(chǎn)品質(zhì)量時需要檢測此2種成分。但因上述2種成分在同一色譜條件下不易完全分離，故分別參照陳麗娜等[3，4]所述方法建立不同的HPLC色譜條件分別進行檢測。

（1）色譜條件：①地塞米松。色譜柱：Alltima HP C1（8250 mm ×4.6 mm，5 μm）；流動相：乙腈-水（40∶60），pH：3.0～3.5；流速：1.0 mL·min－1；檢測波長：240 nm；柱溫：40 ℃；進樣量：20 μL。理論板數(shù)以地塞米松計算不低于5000。②鹽酸洛美沙星。色譜柱：Diamonsil C1（8250 mm×4.6 mm，5μm）；流動相：0.05 mol·L－1枸櫞酸溶液（用三乙胺調(diào)節(jié)pH至4.0）-乙腈（85∶15）；流速：1.0 mL·min－1；檢測波長：287 nm；柱溫：25 ℃；進樣量：20 μL。理論板數(shù)以鹽酸洛美沙星計算不低于2500。

（2）方法學(xué)考察：按規(guī)定方法進行含量測定方法學(xué)考察，結(jié)果表明，所建立的方法線性關(guān)系、精密度、穩(wěn)定性、回收率均較好，各成分色譜峰可達(dá)基線分離，分離度大于1.5，空白輔料無干擾。

（3）含量測定：分別精密吸取標(biāo)準(zhǔn)品與供試品溶液[3，4]各20 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，記錄色譜，以外標(biāo)法計算樣品中鹽酸洛美沙星和地塞米松的含量，結(jié)果見表1。

表1 樣品含量測定結(jié)果（n＝3）Teb 1 Results of content determination of samples（n＝3）

2.2.5 體外釋放度的測定。

取本品3 mL（約相當(dāng)于鹽酸洛美沙星9 mg，地塞米松3 mg），裝入透析袋中，加入1 mL含5%乙醇的磷酸鹽緩沖液（pH＝7.4）。透析袋用膠線封好，放入100 mL錐形瓶中，加入50 mL釋放介質(zhì)（含5%乙醇的磷酸鹽緩沖液），固定于恒溫水浴振蕩器中（37 ℃，60 r·min－1）。分別在1、12、24、36、48、64、72、84 h時取樣5 mL（補充相同溫度的釋放介質(zhì)5 mL），以色譜法測定含量，計算凝膠中藥物的累積釋放百分率，釋藥曲線見圖1。

圖1 復(fù)方洛美沙星緩釋凝膠滴耳劑體外釋藥曲線Fig 1 Accumulative released curve of Compound lomefloxacin sustained-release gel eardrops in vitro

由圖1可見，復(fù)方洛美沙星緩釋凝膠滴耳劑有明顯的緩釋作用，鹽酸洛美沙星和地塞米松1 h時累積釋藥百分率均小于30%，36 h時分別為53%、52%，72 h時均大于80%，符合緩釋制劑釋放度規(guī)定。

2.2.6 穩(wěn)定性試驗。

（1）光照試驗：取本品在照度（4500±500）lx條件下放置10 d，分別于0、1、3、5、10 d時取樣，觀察外觀變化，測定pH值、主藥含量。結(jié)果10 d時制劑外觀顏色稍加深，pH值略有下降，鹽酸洛美沙星和地塞米松含量分別下降為90.1%和92.2%，結(jié)果詳見表2。

表2 樣品光照和高溫試驗結(jié)果Tab 2 Results of light and high temperature tests

（2）高溫試驗：取本品在60℃恒溫水浴箱中放置10 d，并分別于0、1、3、5、10 d時取樣，觀察外觀變化，測定pH值及鹽酸洛美沙星和地塞米松的含量。結(jié)果10 d內(nèi)制劑外觀無明顯變化，pH值、鹽酸洛美沙星和地塞米松的含量也無明顯變化，結(jié)果詳見表2。

（3）離心試驗：取本品置于離心管中，3000 r·min－1離心30 min后觀察，未見分層現(xiàn)象。

（4）耐熱耐寒試驗：將本品分別置于55℃水浴6 h和－4℃冰箱24 h，未見分層現(xiàn)象，性狀和黏度也均無變化。

（5）放置試驗：取3批本品各5支，分別于（39±1）、（25±1）、（5±2）℃下避光放置6個月，結(jié)果，性狀、黏度均無變化，pH值、含量、粒度、裝量和微生物限度符合2010年版《中國藥典》（二部）凝膠劑和滴耳劑項下規(guī)定[5]，結(jié)果詳見表3。

表3 樣品放置試驗結(jié)果（n＝3）Tab 3 Results of placement tests（n＝3）

2.2.7 衛(wèi)生學(xué)檢查。

選用膜過濾法檢查本品，結(jié)果細(xì)菌總數(shù)＜10個/mL，霉菌總數(shù)＜10個/mL，未檢出綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌。

3 討論

復(fù)方洛美沙星緩釋凝膠滴耳劑為新型復(fù)方制劑，選用抗菌譜廣、活性強的鹽酸洛美沙星與強效抗炎藥地塞米松配伍，安全性更好，生物利用度高。由于目前國內(nèi)洛美沙星尚無凝膠滴耳劑研制的文獻(xiàn)報道，因此其有非常廣闊的應(yīng)用前景。

本制劑選用卡波姆-940為處方基質(zhì)，采用膠體磨和緩釋技術(shù)制備而成?？ú?940是丙烯酸基蔗糖交聯(lián)的高分子聚合物，水溶性高，穩(wěn)定性強，對皮膚和黏膜無刺激性[5]。將鹽酸洛美沙星、地塞米松與卡波姆-940混合制成親水性凝膠滴耳劑，不僅使藥物易于分散，而且能增大黏度，延長藥物與病灶接觸面積和滯留時間，利于提高藥物利用率。另外，在處方中加入甘油可進一步延長藥物在病灶周圍的滯留時間，使之具有明顯緩釋功效。而乙醇可增加藥物穿透作用，使其充分發(fā)揮藥效。三乙醇胺作為中和劑，將pH值調(diào)至5.5～6.5，使其具有良好的穩(wěn)定性和有效性，符合耳科用藥特點。

穩(wěn)定性試驗表明，鹽酸洛美沙星和地塞米松對光不穩(wěn)定，與相關(guān)文獻(xiàn)[6，7]報道一致。因此，在制備和分析測試過程中應(yīng)采取黑布遮光，本品也宜采取避光放置貯存。

綜上所述，該制劑制備工藝簡單，質(zhì)量可控，具有明顯的緩釋作用，避光保存為宜。

[1]方淑賢，杜 光，方建國.臨床藥物指南[M].第2版.北京：科學(xué)出版社，2005：49.

[2]李淑華.鼓室內(nèi)注射地塞米松治療突發(fā)性耳聾臨床觀察[J].中國臨床醫(yī)藥研究雜志，2008，7（2）：9.

[3]陳麗娜，李 東，謝燕賢，等.高效液相色譜法測定復(fù)方洛美沙即型凝膠滴耳劑中地塞米松含量[J].中國藥業(yè)，2010，19（12）：36.

[4]陳麗娜，李 東，謝燕賢，等.HPLC法測定復(fù)方洛美沙星即型凝膠滴耳劑中洛美沙星的含量[J].中國藥房，2010，21（25）：2371.

[5]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（二部）[S].2010年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：711-712，附錄16、19.

[6]楊 紅，陳 艷，陸 彬，等.醋酸地塞米松眼用凝膠劑的制備與質(zhì)量控制[J].中國藥師，2004，7（11）：839.

[7]王樹平，張廣求，劉 文.復(fù)方鹽酸洛美沙星凝膠的制備及質(zhì)量控制[J].中國藥業(yè)，2008，17（11）：40.