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    血漿骨橋蛋白水平與冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度的關(guān)系研究

    2011-05-23 07:31:50李曉濤夏岳郭喜朝魏立業(yè)戚國(guó)慶
    中國(guó)循環(huán)雜志 2011年4期
    關(guān)鍵詞:骨橋蛋白支數(shù)甘油三酯

    李曉濤,夏岳,郭喜朝,魏立業(yè),戚國(guó)慶

    冠心病是一種常見的臨床疾病,其發(fā)病有多種因素參與。骨橋蛋白是一種分泌型的糖基化磷蛋白,它在細(xì)胞外基質(zhì)中具有重要的功能。研究表明動(dòng)脈粥樣硬化病變部位存在骨橋蛋白信使核糖核酸(mRNA)呈高表達(dá)狀態(tài),而且細(xì)胞外基質(zhì)中的骨橋蛋白含量也明顯升高。本研究通過觀察冠心病患者和非冠心病患者血漿骨橋蛋白的水平,探討血漿骨橋蛋白水平與冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度的關(guān)系。

    1 資料和方法

    研究對(duì)象:選取2008-10至2009-10我院住院經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影證實(shí)的冠心病患者70例(冠心病組),男39,女31,平均年齡(63±8)歲;另選同期冠狀動(dòng)脈造影陰性的非冠心病患者30例(對(duì)照組),男13,女17,平均年齡(62±7)歲。排除標(biāo)準(zhǔn):有明確的細(xì)菌、病毒感染者;急、慢性炎癥性和免疫性疾病、慢性結(jié)締組織病患者;惡性腫瘤者、血液病患者;1個(gè)月內(nèi)有手術(shù)或創(chuàng)傷史者;已知的血栓性疾病患者;嚴(yán)重貧血、出血性疾病患者;嚴(yán)重肝、腎功能不全者;急性心肌梗死患者。

    研究方法:所有患者均詳細(xì)記錄臨床病史和一般資料,包括性別、年齡、身高、體重、吸煙史、血壓等情況。包括血常規(guī)、生化及免疫學(xué)檢查。血漿骨橋蛋白的測(cè)定:于入院后次日晨空腹抽取靜脈血5ml,置于10ml肝素抗凝管。標(biāo)本采集后以3000 r/min速度離心10 min,取上清液血漿分裝于EP管,置于-70℃低溫保存以備日后統(tǒng)一檢測(cè)。血漿骨橋蛋白的檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),試劑盒由深圳晶美生物工程有限公司代理,具體操作嚴(yán)格按說明書操作。應(yīng)用Judkins方法進(jìn)行選擇性冠狀動(dòng)脈造影,每支血管選擇最佳多體位投照,造影結(jié)果由2名有經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)師分析完成。冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度采用累積記分法進(jìn)行狹窄程度積分。并根據(jù)其冠狀動(dòng)脈血管病變支數(shù)又將冠心病組分為1支病變亞組(n=24)、2支病變亞組(n=21)和3支病變亞組(n=25),分別比較3亞組之間血漿骨橋蛋白的水平。

    統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:首先進(jìn)行組間均衡性檢驗(yàn);正態(tài)分布或輕度偏態(tài)分布的計(jì)量資料以表示,兩組比較應(yīng)用t檢驗(yàn)分析。明顯偏態(tài)分布的計(jì)量資料以中位數(shù)(第25百分位數(shù),第75百分位數(shù))表示,兩組比較應(yīng)用Mann-Whitney檢驗(yàn)。三組間計(jì)量資料服從正態(tài)分布且方差齊的成組設(shè)計(jì)采用方差分析,組間比較采用SNK-q檢驗(yàn);非正態(tài)分布的計(jì)量資料采用Kruskal-Wallis法進(jìn)行成組設(shè)計(jì)的多樣本比較,組間的兩兩比較采用Neminyie法進(jìn)行檢驗(yàn)。在單因素分析的基礎(chǔ)上采用多元線性回歸分析。計(jì)數(shù)資料以百分率表示,采用χ2檢驗(yàn)。數(shù)據(jù)間相關(guān)性采用相關(guān)分析;冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度積分與各參數(shù)的關(guān)系采用多元線性回歸分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,以上所有數(shù)據(jù)處理均用SPSS17.0軟件。

    2 結(jié)果

    冠心病組較對(duì)照組血漿骨橋蛋白水平、甘油三脂、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、所服用阿司匹林、服用β受體阻滯劑比例升高,高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。兩組之間其它臨床資料比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見表1。

    表1 兩組一般臨床資料比較()

    表1 兩組一般臨床資料比較()

    注:與對(duì)照組比*P<0.05?!髅黠@偏態(tài)分布的計(jì)量資料以中位數(shù)(第25百分位數(shù),第75百分位數(shù))表示。HDL-C:高密度脂蛋白膽固醇;LDL-C:低密度脂蛋白膽固醇;ACEI:血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑;ARB:血管緊張素受體拮抗劑

    對(duì)照組(n=30) 冠心病組(n=70)62±7 63±8男性[例(%)]13(43) 39(56)吸煙史[例(%)]11(37) 33(47)高血壓?。劾?%)]17(57) 43(61)服用ACEI或ARB[例(%)]9(30) 32(46)服用阿司匹林[例(%)]5(17) 53(76*)服用β受體阻滯劑[例(%)]6(20) 42(60*)服用他汀類藥物[例(%)]10(33) 35(50)體重指數(shù)△(kg/m2) 23.50(21.75,25.83) 24.40(22.38,26.15)血糖△(mmol/L) 5.73(4.91,7.32) 6.32(5.33,7.82)甘油三脂△(mmol/L) 1.61(1.28,2.11) 1.93(1.53,2.63)*總膽固醇(mmol/L) 4.7±1.3 5.2±1.4 HDL-C△(mmol/L) 1.14(1.02,1.34) 0.99(0.80,1.19)*LDL-C(mmol/L) 2.04±0.83 2.45±0.91*血漿骨橋蛋白△(ng/L) 391(287,537) 537(372,725)年齡(歲)*

    冠心病組不同冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)亞組間兩兩比較,血漿骨橋蛋白水平、甘油三酯、總膽固醇、HDL-C、LDL-C差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,表2)。在經(jīng)協(xié)變量進(jìn)行協(xié)方差分析后,甘油三酯、總膽固醇、LDL-C在三組間分布差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P分別為0.003、0.046、0.000)。采用多元線性回歸分析均衡了年齡、性別、吸煙史、高血壓病、血糖、所服用藥物、血脂等影響后,不同冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)亞組間的血漿骨橋蛋白水平差異仍具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

    冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度積分、病變血管支數(shù)與各變量的偏相關(guān)分析:將年齡、吸煙史、高血壓病、性別作為控制變量,冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度積分、病變血管支數(shù)與各變量進(jìn)行偏相關(guān)分析可知,冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度積分與骨橋蛋白(r=0.416,P<0.01)、甘油三酯(r=0.434,P<0.001)、LDL-C(r=0.402,P<0.01)呈顯著性正相關(guān);病變血管數(shù)與骨橋蛋白水平(r=0.372,P<0.01)、甘油三酯(r=0.415,P<0.001)、總膽固醇(r=0.262,P<0.05)、LDL-C(r=0.489,P<0.001)呈顯著性正相關(guān)。

    從冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度積分與各參數(shù)的多元線性回歸分析:以冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度積分為應(yīng)變量,以年齡、性別、吸煙史、高血壓病、體質(zhì)量指數(shù)、甘油三酯、總膽固醇、HDL-C、LDL-C、血糖、骨橋蛋白、所服用藥物為自變量,進(jìn)行多元逐步線性回歸分析可知,冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度積分與骨橋蛋白(β=0.295,P<0.05)、甘油三酯(β=0.308,P<0.05)、LDL-c(β=0.296,P<0.05)獨(dú)立正相關(guān)。見表3。

    表2 不同冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)亞組間臨床特征的比較()

    表2 不同冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)亞組間臨床特征的比較()

    注:不同冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)亞組間兩兩比較▲P<0.05?!髅黠@偏態(tài)分布的計(jì)量資料以中位數(shù)(第25百分位數(shù),第75百分位數(shù))表示。英文縮略語注見表1。

    冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)1支病變亞組(n=24)2支病變亞組(n=21)3支病變亞組(n=25)年齡(歲) 65±7 63±8 63±9男性[例(%)]13(54) 9(43) 17(68)吸煙史[例(%)]11(46) 9(43) 13(52)高血壓?。劾?%)]13(54) 10(48) 15(60)服用ACE I或ARB[例(%)]11(46) 7(33) 14(56)服用阿司匹林[例(%)]18(75) 15(71) 20(80)服用β受體阻滯劑[例(%)]15(63) 12(57) 15(60)服用他汀類藥物[例(%)]10(42) 10(48) 15(60)體重指數(shù)△(kg/m2) 24.45(22.55,26.25) 23.70(21.95,26.45) 24.90(22.40,26.00)血糖(mmol/L) 6.30±1.32 6.62±1.62 6.77±1.55甘油三酯△(mmol/L) 1.65(1.30,2.00)▲ 1.93(1.46,2.52)▲ 2.15(1.93,2.75)▲總膽固醇(mmol/L) 4.58±1.45▲ 5.49±1.33▲ 5.43±1.17▲HDL-C△(mmol/L) 1.09(0.79,1.20)▲ 1.12(0.90,1.24)▲ 0.83(0.71,1.02)▲LDL-C(mmol/L) 1.99±0.83▲ 2.31±0.91▲ 3.02±0.67▲血漿骨橋蛋白△(ng/L) 455(295,667)▲ 519(323,591)▲ 678(492,911)▲冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度積分△ 5.0(4.0,5.0)▲ 9.0(7.5,9.5)▲ 12.0(10.0,13.5)▲

    表3 冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度積分與各參數(shù)的多元線性回歸分析

    3 討論

    骨橋蛋白是細(xì)胞外基質(zhì)中一種重要的功能性蛋白,其相對(duì)分子質(zhì)量約為44 kDa,是一種分泌型糖基化磷蛋白,因其介導(dǎo)骨組織細(xì)胞與骨基質(zhì)的連接、參與骨基質(zhì)礦化和重吸收過程而得名[1]。作為一種基質(zhì)功能性非膠原蛋白,骨橋蛋白主要通過激活細(xì)胞內(nèi)特異性信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)而介導(dǎo)細(xì)胞粘附、遷移和增殖。在心血管系統(tǒng)中,一系列參與動(dòng)脈粥樣硬化和血管成形術(shù)后再狹窄的活性因子,如血小板衍生因子、堿性成纖維生長(zhǎng)因子、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β、血管緊張素Ⅱ等能夠刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞表達(dá)骨橋蛋白分子。

    在正常的動(dòng)脈壁骨橋蛋白表達(dá)甚微或幾乎不表達(dá),但是Dhore等[2]人用免疫組織化學(xué)染色發(fā)現(xiàn)在動(dòng)脈粥樣斑塊處的泡沫細(xì)胞中或者鈣化的部位骨橋蛋白表達(dá)明顯增加,人主動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的巨噬細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞都可以表達(dá)骨橋蛋白mRNA及合成骨橋蛋白。此外,不僅動(dòng)脈粥樣硬化病變部位的內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞內(nèi)骨橋蛋白mRNA呈高表達(dá)狀態(tài)[3],而且細(xì)胞外基質(zhì)中的骨橋蛋白含量也明顯升高。研究表明,骨橋蛋白可以通過促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移、對(duì)巨噬細(xì)胞趨化作用以及促進(jìn)外膜成纖維細(xì)胞向內(nèi)膜遷移而參與冠狀動(dòng)脈動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展。近來研究表明,骨橋蛋白作為一個(gè)細(xì)胞因子調(diào)節(jié)細(xì)胞功能而參與組織修復(fù)和炎癥過程[4],研究發(fā)現(xiàn)在疾病和組織損傷引起的炎癥部位骨橋蛋白的水平增高。臨床研究表明穩(wěn)定性心絞痛患者中骨橋蛋白水平較正常對(duì)照組升高[5]。

    本研究發(fā)現(xiàn),冠心病患者中血漿骨橋蛋白明顯升高,相關(guān)分析顯示冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度積分與骨橋蛋白、甘油三酯、LDL-C呈顯著性正相關(guān);病變血管數(shù)與骨橋蛋白、甘油三酯、總膽固醇和LDL-C水平呈顯著性正相關(guān)。在經(jīng)過多因素線性回歸分析均衡了年齡、性別、吸煙史、高血壓病等影響后顯示,骨橋蛋白、甘油三酯、LDL-C水平仍與冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度相關(guān)。表明血漿骨橋蛋白與冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度有關(guān),與相關(guān)研究結(jié)果一致[6]。

    本研究顯示血漿骨橋蛋白在冠心病患者中明顯升高,并且血漿骨橋蛋白水平在冠狀動(dòng)脈病變血管數(shù)分組中的存在顯著性差異,并與其冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度呈正相關(guān),表明冠心病患者血漿骨橋蛋白水平可能在一定程度上反映了冠狀動(dòng)脈病變的狹窄程度。

    [1]Oldberg A,F(xiàn)ranzen A,Heinegard D.Cloning and sequence analysis of rat bone sialoprotein(osteopontin)cDNA reveals an Arg-Gly-Asp cell-binding sequence .Proc Natl Acad Sci USA,1986,83(23):8819-8823.

    [2]Dhore CR,Cleutjens JP,Lutgens E,et al.Differential expression of bone matrix regulatory proteins in human atherosclerotic plaques.Arterioscler Thromb Vasc Biol,2001,21(12):1998-2003.

    [3]Panda D,Kundu GC,Lee BI,et al.Potential roles of osteopontin and alphaVbeta3 integrin in the development of coronary artery restenosis after angioplasty.Proc Natl Acad Sci USA,1997,94 (17):9308-9313.

    [4]O’Regan A,Berman JS.Osteopontin:A key cytokine in cell-mediated and granulomatous inflammation.Int J EXP Pathol,2000,81(6):373-390.

    [5]Coskun S,Atalar E,Ozturk E,et al.Plasma osteopontin levels are elevated in non-ST-segment elevation acute coronary syndromes.J Natl Med Assoc,2006,98(11):1746 – 1750.

    [6]Momiyama Y,Ohmori R,F(xiàn)ayad ZA,et al.Associations between plasma osteopontin levels and the severities of coronary and aortic atherosclerosis.Atherosclerosis,2010,210(2):668-670.

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