水飛薊果實(shí)中的黃酮類(lèi)化合物

張 丹，張朝鳳，張 勉

中國(guó)藥科大學(xué) 現(xiàn)代中藥教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，生藥學(xué)研究室，南京 211198

水飛薊是菊科植物水飛薊 (Silybum marianum L.Gaertn)的干燥成熟果實(shí)，原產(chǎn)于南歐、北非[1]。水飛薊作為歐洲民間用藥，用于治療肝膽疾病已有悠久的歷史。我國(guó)于1972年從西德引種水飛薊，現(xiàn)已在陜西、黑龍江、遼寧、新疆、山西等地成功推廣種植。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，水飛薊在清除自由基、抗脂質(zhì)過(guò)氧化、保護(hù)肝細(xì)胞膜、促進(jìn)肝細(xì)胞的修復(fù)再生、抗肝纖維化、抗腫瘤、降血脂等方面具有良好的療效[2]。水飛薊果實(shí)中含有多種化學(xué)成分，主要有黃酮木質(zhì)素、黃酮、生物堿、甾醇、脂肪酸、蛋白質(zhì)等類(lèi)型的化合物[2]，其保肝活性的主要成分為黃酮木質(zhì)素類(lèi)即水飛薊素類(lèi)化合物。本課題對(duì)水飛薊的化學(xué)成分進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究，目前從乙酸乙酯部位分離鑒定了9個(gè)化合物，分別為：水飛薊賓（1），2,3-脫氫水飛薊賓（2），水飛薊亭（3），2,3-脫氫水飛薊亭（4），4'-甲氧基紫杉葉素（5），紫杉葉素（6），二氫山奈酚（7），槲皮素（8）和 3,4-二羥基苯甲酸（9），其中化合物5，7，9為首次從該屬植物中分得。

1 材 料

X-4型顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀（溫度未校正）；Brucker ACF-300，500 型核磁共振儀；Agilent 1100 LC-MS型質(zhì)譜儀。薄層色譜和柱色譜用硅膠均為青島海洋化工廠生產(chǎn)；Sephadex LH-20為Pharmacia公司產(chǎn)品；所用試劑均為分析純。

水飛薊藥材購(gòu)買(mǎi)于河北省安國(guó)市藥材市場(chǎng)，經(jīng)本課題組張勉鑒定為水飛薊 （Silybum marianum L.Gaertn）的干燥成熟果實(shí)。憑證標(biāo)本 （SMZ-ZD-200908）存放于中國(guó)藥科大學(xué)生藥學(xué)研究室。

2 提取與分離

水飛薊果實(shí)12 kg，以85%的乙醇加熱回流提取3次，每次2 h，減壓回收溶劑得總浸膏1200 g。以水混懸，分別依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，減壓回收得到乙酸乙酯部位浸膏255 g。取乙酸乙酯部位（250 g），經(jīng)硅膠柱色譜，用石油醚-乙酸乙酯（30︰1～1︰2）、乙酸乙酯-甲醇（100︰0～1︰1）梯度洗脫，根據(jù)TLC結(jié)果合并相同流分，再經(jīng)硅膠柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜分離，從石油醚-乙酸乙酯（2︰1）洗脫部分得到化合物7（20mg），從石油醚-乙酸乙酯（1︰1）洗脫部分得到化合物5（15 mg）和9（30 mg），從石油醚-乙酸乙酯（1︰2）洗脫部分得到化合物 1（10 g），2（500 mg），3（4 g），4（20 mg），6（20 mg）和 8（80 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1～4,6,8與文獻(xiàn)對(duì)照基本一致，分別鑒定為水飛薊賓(1)[3]，2,3-脫氫水飛薊賓(2)[4]，水飛薊亭(3)[3]，2,3-脫氫水飛薊亭(4)[5]，紫杉葉素(6)[7]和槲皮素(8)[7]。

化合物5 淡黃色粉末（氯仿-甲醇），mp175～177℃。365 nm紫外光下顯黃色熒光，鹽酸-鎂粉反應(yīng)陽(yáng)性，F(xiàn)eCl3反應(yīng)呈陽(yáng)性。ESI-MS:m/z 319[M+H]+。1H-NMR(300 MHz,DMSO-d6)δ:11.91(1H,s,5-OH)，10.80(1H,s,7-OH)，9.09(1H,s,3'-OH)，7.10(1H,d,J=1.65 Hz,H-2')，6.90(1H,dd,J=1.83 Hz,H-6')，6.78(1H,d,J=8.04 Hz,H-5')，5.91(1H,d,J=2.22 Hz,H-8)，5.86(1H,d,J=2.91 Hz,H-6)，5.73(1H,s,3-OH)，5.03(1H,d,J=11.34 Hz,H-2)，4.64(1H,dd,J=6.20 Hz,H-3)，3.78(3H,s,H-OCH3)。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]報(bào)道相一致，鑒定化合物 5 為 3，3'， 5，7-四羥基-4'-甲氧基二氫黃酮,即4'-甲氧基紫杉葉素。

化合物7白色粉末 （氯仿-甲醇），mp 212～213℃。365nm紫外光下顯黃色熒光，鹽酸-鎂粉反應(yīng)陽(yáng)性，F(xiàn)eCl3反應(yīng)呈陽(yáng)性。 ESI-MS：m/z287[M-H]-。1HNMR(300 MHz,DMSO-d6) δ：11.85(1H,s,5-OH),10.76(1H,s,7-OH)，9.49(1H,s,4'-OH)，7.26(2H,d,J=8.4 Hz,H-2',6＇)，6.73(2H,d,J=8.22Hz,H-3',5')，5.84(2H,dd,J=8.612.01 Hz,H-8,6)，5.69(1H,s,3-OH)，5.00(1H,d,J=11.52 Hz,H-2)，4.53(1H,dd,J=3.24 Hz,H-3)；13C-NMR(75 MHz,DMSO-d6) δ：197.9(C=O)，166.74(C-7)，163.26(C-5)，162.54(C-9)，157.70(C-4')，129.42(C-1')，127.52(C-2',6')，114.86(C-3',5')，100.44(C-10)，95.97(C-6)，94.95(C-8)，82.84(C-2)，71.41(C-3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]報(bào)道相一致，鑒定化合物7為3,4',5,7-四羥基二氫黃酮，即二氫山奈酚。

化合物9 無(wú)色針狀結(jié)晶 （氯仿-丙酮），mp 195～196℃。 ESI-MS：m/z153[M-H]-。1H-NMR(300 MHz，Acetone-d6) δ：7.53(1H,d,J=1.95 Hz,H-2),7.47 (1H,dd,J=1.92,2.25 Hz,H-6)，6.89(1H,d,J=8.25 Hz,H-5)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]報(bào)道相一致，鑒定化合物9為3,4-二羥基苯甲酸，即原兒茶酸。

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