圣愈超微粉顆粒中揮發(fā)油成分的GC-MS分析

馮善濤 張媛媛 任 利

(福建中醫(yī)學(xué)院，福建省福州市閩侯上街華佗路1號，350108)

圣愈超微粉顆粒系應(yīng)用超微粉碎技術(shù)將古方圣愈湯(含白芍、生地黃、當(dāng)歸、川芎、黃芪、人參)制成超微粉顆粒。鑒于方中當(dāng)歸、川芎所含揮發(fā)油具豐富的化學(xué)成分和廣泛的藥理作用，為最大限度地保留有效成分，將其制為超微粉入藥，制得顆粒。與傳統(tǒng)中藥湯劑相比，采用超微粉碎技術(shù)可明顯提高制劑的藥效學(xué)活性［1］。臨床研究發(fā)現(xiàn)，對缺血性心腦血管疾病有較好的療效［2-3］。本文采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GCMS)技術(shù)分析了其中揮發(fā)油的化學(xué)成分，現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

儀器:Agilent6890 GC-Agilent5973 MS氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，(美國安捷倫公司);試藥:圣愈超微粉顆粒制備于南京中醫(yī)藥大學(xué)植物藥深加工工程中心，所用藥材均購自江蘇省藥材公司。其中當(dāng)歸、川芎經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定學(xué)教研室鑒定為傘形科植物當(dāng)歸Angelica sinensis Diels的干燥根及傘形科(Umbelliferae)植物川芎Ligusticum Chuanxiong Hort.的干燥根莖。

2 方法

2.1 揮發(fā)油的制備 參照2005年版《中華人民共和國藥典》一部附錄XD方法［4］提取揮發(fā)油，用無水硫酸鈉過濾脫水處理后，置5mL容量瓶中定容，備用。

2.2 GC-MS分析條件 氣相色譜條件:HP-5MS毛細(xì)管柱(30mm×0.25mm×0.25mm);色譜柱程序升溫條件:初始溫度為60℃，以5℃/min開溫速率升至200℃，再以10℃/min升至250℃，保留5min;進(jìn)樣口溫度250℃，載氣為高純氨氣，流速為1.0mL/min;進(jìn)樣量1μL，分流進(jìn)樣，分流比為10∶1。質(zhì)譜條件:離子源溫度(接口溫度)230℃，四極桿溫度150℃，電離方式EI，電子能量 70ev，發(fā)射電流 150Ua，檢測電壓350V，掃描范圍33～550u，溶劑延遲為3min。

3 結(jié)果

按上述實(shí)驗(yàn)條件，對樣品進(jìn)行GC-MS分析，得到揮發(fā)油化學(xué)組分總離子流色譜圖，經(jīng)計(jì)算機(jī)內(nèi)存的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜庫檢索，確定出32種組分，根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)資料的檢索查閱，鑒定出其中28種化合物，根據(jù)總離子流色譜圖中峰面積歸一化法進(jìn)行處理，約占總量的98.06%，分析結(jié)果見表1。

4 討論

為了將川芎和當(dāng)歸中的揮發(fā)油成分完全分開，選擇較慢的程序升溫速度，初始溫度為60℃，然后以5℃/min的速度升溫。川芎和當(dāng)歸的揮發(fā)油成分在28min后已較少出峰，此時溫度為200℃，在溫度升到200℃后，可以用較快的升溫速度，以縮短分析時間。在進(jìn)樣口溫度250℃，接口溫度230℃，載氣 He，流速1.0mL/min，進(jìn)樣量 1μL，分流比 10∶1，程序升溫的色譜條件下，揮發(fā)油成分可達(dá)到較好分離。從研究結(jié)果來看，當(dāng)歸和川芎中不含相對密度在1.0以上的揮發(fā)油，故本實(shí)驗(yàn)采用水蒸氣蒸餾法提取，提取溶劑分別采用了醋酸乙酯和環(huán)己烷，預(yù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，因醋酸乙酯的極性大于環(huán)己烷，所以提取的成分較多，由預(yù)實(shí)驗(yàn)中GC-MS分析得到39種化合物，但通過標(biāo)準(zhǔn)譜庫檢索后發(fā)現(xiàn)，許多峰的匹配度不高，并且通過文獻(xiàn)資料查閱也無法解析出化合物，而用環(huán)己烷提取揮發(fā)油分析所得的色譜峰，經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)譜庫檢索后，大部分匹配度良好，且通過文獻(xiàn)查閱也證實(shí)該組分的存在。綜上所述，最終選擇環(huán)己烷為提取溶劑。

從表1結(jié)果可以看出，運(yùn)用GC-MS方法分析得到揮發(fā)油化學(xué)組成的總離子流色譜圖，分離出32個組分，鑒定出其中的28種化合物，占總成分的98.06%，其中相對含量最高的是藁本內(nèi)酯，占總含量的55.36%，除此之外，主要成分還有3-亞丁基苯酞(13.40%)、4-甲基苯酚(8.72%)、1-(2，4-二甲基苯基)-1-丙酮(5.05%)、(-)-匙葉桉油烯醇(2.26%)、4(14)，11-桉葉二烯(1.37%)等。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道［5］，在質(zhì)譜圖中找到藁本內(nèi)酯、3-亞丁基苯酞，可以顯示該復(fù)方中含有當(dāng)歸或川芎。由此可見，圣愈超微粉顆粒中的揮發(fā)油成分主要來自當(dāng)歸和川芎，且所用藥材為道地藥材。

當(dāng)歸和川芎的揮發(fā)油成分具有很強(qiáng)的生理活性和廣泛的藥理作用，能顯著增強(qiáng)復(fù)方制劑的藥效，其中，含量最高的藁本內(nèi)酯屬于內(nèi)酯類化合物，具有明顯的改善局灶性腦缺血損傷作用［6］，川芎揮發(fā)油能抑制血小板活性［7］。另據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，苯酞類成分具有心腦血管、抗驚厥、解痙平喘，鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛等多種生理活性［8］，為圣愈超微粉顆粒治療缺血性心腦血管疾病物質(zhì)基礎(chǔ)的闡明提供了部分?jǐn)?shù)據(jù)。

表1 圣愈超微粉顆粒中揮發(fā)油的化學(xué)成分

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