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    連作對烤煙根際土壤微生物數(shù)量和酶活性的動態(tài)影響

    2011-05-10 02:07:28古戰(zhàn)朝習向銀劉紅杰劉朝科周顯波湯書開張重義
    河南農(nóng)業(yè)大學學報 2011年5期
    關(guān)鍵詞:根際年限烤煙

    古戰(zhàn)朝,習向銀,劉紅杰,劉朝科,周顯波,湯書開,張重義,4

    (1.河南農(nóng)業(yè)大學,河南鄭州450002;2.西南大學,重慶400715;3.川渝中煙工業(yè)公司,四川成都610031;4.福建農(nóng)林大學,福建 福州350002)

    煙草是忌連作作物,由于受耕地有限、經(jīng)濟利益驅(qū)動和種植條件等因素的制約,煙葉生產(chǎn)耕作制度單一,也即連作或復種連作的面積越來越大,使得連作障礙成為煙草農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的突出問題.趙凱等[1]對典型煙區(qū)調(diào)查發(fā)現(xiàn),烤煙連作3 a以上就會對煙葉的外觀與內(nèi)在質(zhì)量均產(chǎn)生顯著的不良影響.主要表現(xiàn)在中上等煙比例與煙葉的煙堿、還原糖、鉀含量以及施木克值、糖堿比和鉀氯比等重要化學指標上.晉艷等[2]在1998—2000年對連作烤煙煙葉產(chǎn)量和品質(zhì)狀況的研究結(jié)果表明,連作造成煙株株高、葉面積指數(shù)、煙葉產(chǎn)量、產(chǎn)值、中上等煙比例、均價等均有不同程度的降低.導致連作障礙的因素相當復雜,如土壤微生物活動、土壤酶活性、土壤根系分泌物[3]、土壤養(yǎng)分狀況等.而微生物是土壤物質(zhì)轉(zhuǎn)化的重要參與者,土壤有機質(zhì)轉(zhuǎn)化所需能量的90%以上來自微生物的分解作用,是土壤有機質(zhì)和養(yǎng)分轉(zhuǎn)化與循環(huán)的動力[4,5].土壤中微生物的種類較多,有細菌、真菌、放線菌和原生動物等,數(shù)量也很大,它們具有較大的比表面積,代謝活動旺盛[6].大部分土壤微生物對作物的生長發(fā)育是有益的,它們參與土壤的形成、物質(zhì)循環(huán)和肥力演變,是影響作物生長發(fā)育的重要環(huán)境條件之一.賈志紅等[7]通過提取土壤細菌總DNA,用PCR-DGGE法研究了烤煙輪作和連作對土壤細菌群落多樣性的影響,認為連作會導致土壤微生物多樣性下降.王茂盛等[8]研究表明,隨著煙草連作年限的增加,細菌數(shù)量下降,青枯病病原菌數(shù)量逐漸減少,真菌數(shù)量增加.土壤酶主要來自微生物和植株根系分泌等途徑,此外還有土壤動植物活體分泌和動植物殘體的分解[9].連作可使土壤中磷酸酶和脲酶活性降低,使蔗糖酶活性增強,而轉(zhuǎn)化酶活性只有連作年限超過5 a后才表現(xiàn)出減少趨勢[10].婁翼來等[11]研究發(fā)現(xiàn),隨著植煙年限的延長,表層土壤過氧化氫酶、轉(zhuǎn)化酶、脲酶和中性磷酸酶活性的變化均表現(xiàn)為先增強后減弱,而它們在次表層土壤中則均呈現(xiàn)不同程度的降低.于寧等[12]研究表明,與正茬煙田相比,連作煙田的轉(zhuǎn)化酶、脲酶、中性磷酸酶和過氧化氫酶活性顯著下降,這將直接影響土壤養(yǎng)分的轉(zhuǎn)化及作物對土壤養(yǎng)分的有效吸收.前人的研究結(jié)果表明,烤煙根際土壤受到烤煙根系生長的直接影響,烤煙根際土壤微生物和酶活性的平衡發(fā)展是預防煙草連作障礙發(fā)生的基礎(chǔ).但之前的研究對生育期內(nèi)烤煙根際土壤微生物數(shù)量和酶活性的動態(tài)變化情況研究較少,特別是在受控條件下的研究未見報道.本研究試圖通過修建隔離池探討不同連作年限對煙草移栽后5個時期的根際土壤微生物數(shù)量及其酶活性動態(tài)變化,為進一步研究烤煙連作對根際土壤微生態(tài)系統(tǒng)的影響,探討烤煙連作障礙的消減技術(shù)提供理論依據(jù)和技術(shù)支撐.

    1 材料與方法

    1.1 試驗設(shè)計

    該試驗于2010年在重慶市武隆縣和順鎮(zhèn)青木池村川渝中煙科技示范園隔離池內(nèi)進行.供試烤煙品種為云煙87.試驗設(shè)3個處理,分別為:處理1,正茬(未種植過煙草);處理2,連作3 a;處理3,連作8 a.試驗用土分別取自正茬、連作3 a和連作8 a的地塊耕層土壤.試驗地前茬作物一致,均為玉米.試驗采用隨機區(qū)組設(shè)計,3次重復,每小區(qū)面積5 m ×2.2 m.烤煙移栽期為2010-05-16,行株距為1.2 m×0.55 m,留葉數(shù)為21片.肥料種類為煙草專用肥和硝酸鉀.m(氮)∶m(磷)∶m(鉀)=1∶1.5∶2.5.施純氮量為 105 kg·hm-2,純氮 60% 于移栽前條施,40%按當?shù)刈贩柿晳T于團棵期追施.田間管理按重慶市煙草田間管理技術(shù)規(guī)程執(zhí)行.試驗土壤類型為黃壤,具體養(yǎng)分狀況見表1.

    表1 不同處理土壤基礎(chǔ)養(yǎng)分狀況Table 1 Soil nutrient status in different treatments

    1.2 根際土樣的采集

    烤煙根際土壤樣品的采集時間分別為移栽后45,65,75,98,113 d.采集方法為抖根法.用 5 點取樣法采集土樣,混合均勻后用無菌自封袋包裝,分2部分保存:一部分保存在4℃冰箱中,供土壤生物數(shù)量分析;一部分風干、研磨,過60目篩,供土壤養(yǎng)分及土壤酶活性分析.

    1.3 項目分析測定方法

    1.3.1土壤酶活性的測定 脲酶采用比色法,其活性用24 h后1 g土壤中NH3-N的毫克數(shù)表示;過氧化氫酶采用滴定法,其活性用1 h后1 g土壤的0.1 mol·L-1K2MnO4的毫升數(shù)表示;蔗糖酶采用比色法,其活性用24 h后1 g土壤葡萄糖的毫克數(shù)表示;磷酸酶采用比色法,其活性用24 h后1 g土壤釋放出的酚的毫克數(shù)表示[13].

    1.3.2 微生物區(qū)系分析 細菌在36℃下,在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基中培養(yǎng)30 h;放線菌和真菌在28~30℃條件下,分別在高氏1號培養(yǎng)基和馬丁氏培養(yǎng)基中培養(yǎng)5 d.

    細菌、放線菌和真菌的計數(shù)采用平板計數(shù)法[14].

    1.4 數(shù)據(jù)分析

    采用Microsoft Excel 2007和SPSS 18.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析.

    2 結(jié)果與分析

    2.1 連作年限對煙草根際土壤微生物數(shù)量的影響

    由表2可知,根際土壤中細菌數(shù)量在烤煙生育期內(nèi)呈“升-降-升-降”的變化趨勢,且在移栽后65和98 d分別出現(xiàn)1個峰值.不同連作年限處理間相比較,連作3 a的細菌數(shù)量最多,且在移栽后98 d前與其它處理間存在極顯著性差異,正茬的細菌數(shù)量次之.連作8 a的細菌數(shù)量最少,且除在移栽后45 d與正茬的無顯著性差異外,與其它處理相比,在各個生育時期均存在極顯著性差異.各處理根際土壤中真菌數(shù)量均在移栽后65 d前逐漸增加到最高峰,之后逐漸下降.在各個生育時期根際土壤中真菌數(shù)量均以正茬的最多,最多時達到9.20 ×105個·g-1,連作 3 a的次之,兩者在移栽后65和75 d時存在顯著性差異,但在各生育時期均與連作8 a的存在顯著性差異.各處理間相比較來說,真菌數(shù)量隨著連作年限的增加呈下降趨勢.各處理根際土壤中放線菌數(shù)量在烤煙生育期內(nèi)除連作8 a呈下降趨勢外,其余2個處理均先降后升.不同處理間相比,連作3 a的放線菌數(shù)量最多,其次為正茬,且除移栽后75 d外,兩者放線菌數(shù)量在其余各生育時期均與連作8 a的存在極顯著性差異.

    表2 連作年限對煙草根際土壤微生物數(shù)量的動態(tài)影響Table 2 Effect of microbial quantity in different consecutive cropping years

    2.2 連作年限對煙草根際土壤脲酶活性的影響

    從圖1可以看出,隨著烤煙生育期的推進,3個處理的根際土壤脲酶活性大致呈“升-降-升-降”的變化規(guī)律,且在移栽后65和98 d分別出現(xiàn)1個峰值.這說明在烤煙生育的旺長期和打頂后,需要較多的營養(yǎng)物質(zhì)供給,此時脲酶活性顯著增強,可以促進尿素的分解,滿足烤煙生長的需要.各處理之間,根際土壤脲酶活性在各時期均以連作3 a的最大,正茬次之,連作8 a的最小.在移栽后45 d時,3個處理根際土壤脲酶活性相差較小,但正茬、連作3 a與連作8 a之間存在顯著性差異,而正茬與連作3 a之間無顯著性差異.隨著烤煙的生長發(fā)育,正茬和連作8 a的根際土壤脲酶活性的差距又逐漸增大,且差異顯著.

    圖1 連作年限對煙草根際土壤脲酶活性的影響Fig.1 Effect of urease activity in different consecutive cropping years

    2.3 連作年限對煙草根際土壤磷酸酶活性的影響

    從圖2可以看出,連作3 a的根際土壤磷酸酶活性移栽后113 d時,比45 d時下降了7.06%.各處理之間相比,各時期根際土壤磷酸酶活性大小為:連作3 a>正茬>連作8 a.正茬與連作8 a之間除移栽后65 d外,存在顯著性差異.在烤煙生育期內(nèi),3個處理土壤磷酸酶呈“升-降-升-降”的變化趨勢,且在烤煙移栽后65和98 d分別出現(xiàn)1個峰.根際土壤磷酸酶的活性變化與烤煙的生長發(fā)育狀況相一致,在烤煙生育的旺長期(移栽后65至98 d),需要較多的營養(yǎng)物質(zhì)供給,此時磷酸酶活性顯著增強,可以促進無機磷酸的釋放,滿足烤煙生長的需要.而在移栽98 d時連作8 a的峰值很小,這可能是由于隨著烤煙的生長發(fā)育,土壤中有機質(zhì)含量減少,導致土壤磷酸酶的活性降低[15].

    圖2 連作年限對煙草根際土壤磷酸酶活性的影響Fig.2 Effect of phosphatase activity in different consecutive cropping years

    2.4 連作年限對煙草根際土壤蔗糖酶活性的影響

    從圖3可以看出,隨著烤煙連作年限的增加,根際土壤蔗糖酶活性總體呈曲折下降趨勢,其中連作8 a的下降最為明顯,移栽后113 d時僅為移栽后45 d時的69.74%.根際土壤蔗糖酶活性與脲酶、磷酸酶的活性變化相似,在烤煙生長的移栽后65和98 d各出現(xiàn)1個峰.各處理之間,根際土壤蔗糖酶活性在烤煙生育各時期均存在顯著性差異,其中以連作3 a的最高,正茬的次之,連作8 a的最低.

    圖3 連作年限對煙草根際土壤蔗糖酶活性的影響Fig.3 Effect of invertase activity in different consecutive cropping years

    2.5 連作年限對煙草根際土壤過氧化氫酶活性的影響

    由圖4可見,根際土壤過氧化氫酶活性在烤煙生育期內(nèi)曲折下降,其中連作3 a的下降最為明顯,移栽后113 d時的過氧化氫酶活性僅為移栽后45 d時的63.48%.各處理之間,同一時期土壤過氧化氫酶活性均以連作3 a的最高,正茬的次之,連作8 a的最小,且3個處理之間均存在顯著性差異.

    圖4 連作年限對煙草根際土壤過氧化氫酶活性的影響Fig.4 Effect of hydrogen peroxidase activity in different consecutive cropping years

    3 結(jié)論與討論

    微生物是土壤中有機質(zhì)和養(yǎng)分轉(zhuǎn)化與循環(huán)的動力,正常的土壤中微生物數(shù)量一般是細菌最多.本試驗表明,各處理在整個烤煙生育期內(nèi),細菌數(shù)量大致呈“升-降-升-降”的變化趨勢,放線菌數(shù)量除連作8 a呈連續(xù)下降趨勢外,其余2個處理均先降后升,但均低于移栽初期水平,這與郭紅祥等[16]的研究結(jié)果一致.不同處理之間比較,各時期根際土壤中細菌對烤煙連作表現(xiàn)敏感,數(shù)量下降明顯,隨著連作年限的增加,真菌數(shù)量也有較為明顯的下降,放線菌數(shù)量先升后降,變化較穩(wěn)定.李仲強等[17]認為,不同連作年限之間比較,放線菌數(shù)量變化之所以較穩(wěn)定,可能是由于放線菌與細菌相比,生長較慢、受農(nóng)業(yè)技術(shù)措施的影響也表現(xiàn)較慢的緣故.總體上根際土壤微生物數(shù)量隨著連作年限的增加均呈下降趨勢,這與胡元森等[18]的研究結(jié)果一致,他認為真菌數(shù)量的下降可能是由于少數(shù)真菌類群富集,多數(shù)真菌類群數(shù)量減少,種群變化呈單一趨勢導致數(shù)量減少.本研究表明,不同處理間真菌所占微生物數(shù)量的比例,隨連作年限的增加有明顯的上升趨勢,而細菌所占比例有所下降.連作導致根際土壤的細菌數(shù)量下降,一方面可能是因為連作導致土壤中養(yǎng)分含量失衡,造成土壤貧瘠,劉訓理等[19]的研究表明,土壤肥沃的煙區(qū)根際細菌的數(shù)量最多,真菌數(shù)量較少;土壤貧瘠煙區(qū)根際真菌的數(shù)量較多,細菌數(shù)量較少;另一方面可能是由于土壤根系分泌物濃度抑制土壤微生物生長發(fā)育造成的,而細菌和放線菌對此反應較為敏感,真菌對此反應不太敏感,導致土壤微生物中真菌比例增加.由此可以看出,連作雖降低了土壤細菌、真菌等微生物的數(shù)量,但由于細菌數(shù)量降低明顯,導致烤煙根際微生物中真菌的比例反而升高,使土壤微生物區(qū)系從高肥的“細菌型”向低肥的“真菌型”轉(zhuǎn)化,這與于貴瑞[20]、于廣武[21]和鄒莉等[22]研究連作大豆土壤微生物種群變化時得出的結(jié)論一致.

    連作可能導致土壤中某一種養(yǎng)分過度消耗,結(jié)果迫使這些元素對作物的供應越來越不足,造成土壤養(yǎng)分的過度消耗[23].作物主要生育時期內(nèi),不同耕作方式下的土壤酶活性變化趨勢與作物的生長及需肥規(guī)律基本一致[24],土壤酶活性能夠體現(xiàn)土壤的生物學活性,表征土壤的綜合肥力及土壤養(yǎng)分轉(zhuǎn)化進程[25],人們通常用脲酶、磷酸酶、蔗糖酶、過氧化氫酶等酶活性來評價土壤肥力和肥效.在本研究中,土壤脲酶、磷酸酶、蔗糖酶活性以連作3 a最高,其次為正茬,連作8 a最低,且三者存在顯著性差異,結(jié)果表明,隨著連作年限的增加,土壤酶活性先升高后下降.這說明,短期連作使土壤酶活性升高,而長期連作會降低土壤酶活性.這與根際土壤微生物數(shù)量變化相一致,說明土壤酶活性隨土壤微生物數(shù)量和有機質(zhì)含量的變化而變化.在烤煙生育期內(nèi),隨著烤煙生育期的推進,土壤酶活性大致呈“M”型的變化趨勢,且在移栽后65和98 d分別出現(xiàn)1個峰值,這亦可能是由于在烤煙的旺盛生長期內(nèi),需要吸收大量的營養(yǎng)物質(zhì),土壤酶活性的變化規(guī)律與烤煙生長特性表現(xiàn)出了一定的協(xié)調(diào)性.

    薛小平等[26]研究認為,短期連作的烤煙根際土壤微生物群落與原始土壤的相比較,更適宜于煙株的生長.李坤等[27]的研究表明,葡萄短期種植根際土壤細菌和真菌的多樣性增加,且根圍土壤細菌和真菌的種群結(jié)構(gòu)不同于空地土壤.烤煙的根系分泌物為其次生代謝產(chǎn)物(化感物質(zhì)),張重義等[28]認為化感物質(zhì)引起植物產(chǎn)生自毒作用,是導致烤煙連作障礙的主導因子,自毒作用的方式具有濃度效應的特征.劉新虎等[29]的研究也發(fā)現(xiàn),低濃度的根系分泌物對棉花幼苗植株的根長、株高、地下部分鮮重、地上部分鮮重有明顯的促進作用,而高濃度則有抑制作用.根系分泌物作為根際微生物的營養(yǎng)來源之一,密切影響其種類和數(shù)量.由此推測,烤煙短期連作(小于3 a)情況下烤煙生長與土壤根際微生物群落關(guān)系密切,而長期連作與化感物質(zhì)引起的連作障礙效應關(guān)系密切,該推測還有待進一步研究.

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