大腸桿菌致家兔膽囊炎的動(dòng)物模型研究

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(1.吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院 藥效毒理評(píng)價(jià)中心，吉林 長(zhǎng)春 130012；2.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 外科，吉林 長(zhǎng)春 130031)

膽囊炎是由于膽道系統(tǒng)的結(jié)石、細(xì)菌感染及其他原因引起的膽囊炎性疾病，其發(fā)病率為8%～10%,隨著我國(guó)人民生活水平的提高,飲食結(jié)構(gòu)發(fā)生了很大變化,導(dǎo)致膽囊炎發(fā)病人數(shù)與日俱增。研究治療膽囊炎藥物的單位越來越多，制做膽囊炎模型較為關(guān)鍵，現(xiàn)將筆者制做的比較成型的膽囊炎模型介紹如下，供大家參考。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 動(dòng)物 新西蘭家兔，雌雄各半，體質(zhì)量(2.4±0.2)kg,購(gòu)自中國(guó)人民解放軍208醫(yī)院，生產(chǎn)許可證編號(hào)〔SCXK(軍)-2002-005〕。

1.2 菌株 ATCC 25922標(biāo)準(zhǔn)大腸桿菌菌株，105CFC/mL。由吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院化驗(yàn)科提供。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 造型 取家兔在實(shí)驗(yàn)觀察室適應(yīng)2 d后，隨機(jī)分2組。正常對(duì)照組和模型組。全部家兔禁食24 h，不禁水。耳動(dòng)脈采血1 mL，用于白細(xì)胞計(jì)數(shù)。30 mg/kg戊巴比妥鈉麻醉，剪去腹部毛，強(qiáng)力碘消毒，鋪上無菌巾。腹部正中切口，暴露膽囊，在膽囊底部進(jìn)針抽出膽汁后，正常對(duì)照組向膽囊內(nèi)注射生理鹽水0.2 mL/只,模型組向膽囊內(nèi)注射標(biāo)準(zhǔn)ATCC25922大腸桿菌菌株105CFC/mL 0.2 mL/只，結(jié)扎針口。雙層關(guān)閉腹腔。正常飼養(yǎng)7 d。

試驗(yàn)結(jié)束后取膽囊，作膽囊組織病理學(xué)檢查。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 一般狀態(tài) 給予大腸桿菌后，家兔精神萎靡，活動(dòng)明顯減少，弓背倦怠，皮毛松，無光澤，體重下降。

3.2 對(duì)家兔白細(xì)胞、膽道內(nèi)壓、降速及膽汁流量的影響 見表1。

表1 對(duì)家兔白細(xì)胞值、降速、膽道內(nèi)壓、膽汁流量的影響

3.3 膽囊檢查 對(duì)照組家兔膽囊壁薄，膽囊較大，膽汁呈黃綠色，透明無顆粒。模型組家兔膽囊壁不同程度增厚，膽汁顏色深綠色，發(fā)暗，不透明,有顆粒懸浮或堆積(色素樣顆粒)，約占膽囊體積的1/4～1/6。膽囊光鏡下觀察，正常家兔：膽囊黏膜一層高柱狀上皮，固有膜較薄，含小血管和淋巴管，肌層排列不規(guī)整，外被一層漿膜。模型組的家兔黏膜下血管充血，有黏膜水腫、潰瘍、壞死，固有層有大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)，有的深達(dá)肌層。

4 討論

向家兔膽囊內(nèi)注射標(biāo)準(zhǔn)ATCC 25922大腸桿菌菌株105CFC/mL 0.2 mL/只，可以引起家兔急性膽囊炎。臨床上膽囊炎主要致病菌為大腸桿菌(占60%～70%)，故用大腸桿菌制做膽囊炎模型，臨床上膽囊炎患者常見膽汁潴留，排泄不暢，導(dǎo)致膽囊內(nèi)壓力增高，膽汁酸刺激膽囊黏膜，使膽囊黏膜出現(xiàn)水腫、充血、滲出等炎癥反應(yīng)，嚴(yán)重者出現(xiàn)潰瘍、壞死等癥狀。筆者所做的家兔膽囊炎模型出現(xiàn)的膽囊變化與這些癥狀非常相似。大腸桿菌是臨床常見菌株，容易得到，試驗(yàn)方法操作簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性好，通過筆者反復(fù)試驗(yàn)證明注射105CFC/mL 0.2 mL/只大腸桿菌就可以造成家兔急性膽囊炎。

[1]李儀奎,金若敏,王欽茂.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].2版.上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,2006:481-484.