尿糖對白細胞干化學法檢測結果的影響

關 濤 （長江大學荊州臨床醫(yī)學院 荊州市中心醫(yī)院臨床醫(yī)學檢驗部，湖北 荊州434020）

為探討尿糖對尿液分析儀白細胞干化學檢測結果的影響，我們分析了我院門診干化學檢測尿糖陽性且鏡檢白細胞陽性的患者尿液標本200例的尿檢資料，現(xiàn)報道如下。

1 臨床資料

1．1 設備與試劑

本實驗室所用儀器為GEB-600自動尿液分析儀 （廣州市花都高爾寶生物技術有限公司），及配套的試紙條GEB-11（100人份／筒）；尿液質控品 （上海伊華醫(yī)學科技有限公司生產(chǎn)）；鏡檢用雙目顯微鏡（日本產(chǎn)奧林巴斯公司）；10ml定量吸管；牛鮑氏計數(shù)板；低速自動平衡離心機 （4000r／min）。

1．2 標本來源

隨機選取我院門診干化學尿糖≥2．8mmol／L為陽性的尿液標本200例，其中男50例，女150例，年齡18～65歲。

1．3 檢測方法及結果

1．3．1 尿液分析儀檢測尿糖 用定量吸管吸取混勻的10ml新鮮尿液于玻璃試管中，將尿試紙條浸入1s后取出，試紙帶由藍色→棕色的顏色變化來指示，藍色為無尿糖，用 “-”表示，棕色越深，“＋”越多，尿糖越高。結果報告為±、＋、2＋、3＋、4＋。檢測結果見表1。

表1 尿液檢測結果

1．3．2 鏡檢 取尿液10ml于試管中，以2000r／min離心5min，棄去上清液，留沉淀0．2ml。充分混勻后，取出約20μl滴于載玻片上，加蓋玻片，然后用較弱的光線先以低倍鏡觀察全貌，再用高倍鏡辨認細胞。為避免尿液中有形成分的破壞，所有檢測均在取樣后1h內(nèi)完成。尿液干化學質控參照叢玉?。?］報道的方法。尿沉渣鏡檢判讀標準：以白細胞≥14×106個／L為陽性［2］。

2 討 論

尿液干化學分析儀是測定尿中某些化學及有形成分的自動化儀器，它無論是在哪一級醫(yī)院里都是非常普通但又是非常重要的自動化檢測設備，這種儀器具有體積小、操作簡單、快速等優(yōu)點。但是在使用中有許多因素都有可能影響該儀器檢測結果的準確性，不僅會引起實驗結果的偏差，而且耽誤了臨床醫(yī)生的診斷。因此，除了要求操作者熟練掌握尿液分析儀的原理、使用方法、注意事項及影響因素等方面之外，還要定期對其進行保養(yǎng) （如日、周、月、年保養(yǎng)等），這樣才能確保尿液分析儀處在一個最佳狀態(tài)，從而讓它所檢測的結果更準確。

尿液干化學分析儀各測試項目的主要檢測原理是依據(jù)多聯(lián)試紙帶上各自對應模塊化學反應后顏色變化的深淺來確定尿液中的含量，其測試原理的本質是光的吸收和反射，試劑塊顏色的深淺對光的吸收、反射是不一樣的，光值量越小，反射光量值越大，反射率也越大。換言之，特定試劑塊顏色的深淺與尿液中特定化學成分濃度成正比，因此任何外源性物質或人為因素對尿液標本對多聯(lián)試紙帶模塊的干擾，均可引起檢測結果的誤差。我科采用的與儀器配套的GEB11型尿試紙條檢測白細胞模塊的原理則是白細胞酯酶法，因為單核細胞、淋巴細胞無這種酯酶，只有中性粒細胞內(nèi)含有酯酶，這種酶能水解一種3-羥基吲哚酚酯類底物，釋放出酚從而與重氮試劑反應生成紫紅色化合物，所以干化學法白細胞檢測方法只對粒細胞敏感。另外，如果白細胞被破壞后，酯酶釋放到尿液中，其干化學結果為陽性，而沉渣結果為陰性，在實際操作中應注意。尿糖測定的原理則是基于葡萄糖氧化酶的酶促反應，只與葡萄糖發(fā)生反應，當葡萄糖氧化酶特異性氧化β-D-葡萄糖醛縮合過氧化氫，過氧化氫在過氧化物酶的作用下，使指示劑氧化而呈現(xiàn)出棕色，試紙后一步反應為氧化還原反應，當尿液中含有比色素還原能力更強的物質時，可使尿糖結果偏低，甚至可以出現(xiàn)假陰性；如尿液中含有維生素C，可使尿糖結果偏低，可出現(xiàn)假陰性［3］，當尿糖陽性即尿糖≥2．8mmol／L時，干化學法檢測白細胞的結果的假陰性率達35%～85%，尿糖對于化學法測定白細胞的干擾程度隨著尿糖含量的增加而升高。

3 體 會

①尿干化學分析須使用新鮮尿液標本，標本量應該在10ml以上。②在使用任何一種尿試紙前，首先應該認真閱讀使用說明書，并嚴格按照它的要求和操作方法執(zhí)行。試紙應該在有效期內(nèi)使用，禁止用手觸摸試紙上的試劑反應區(qū)。每次取出試帶后應立即蓋緊蓋子，將余下的試帶儲藏在避光、干燥的試帶瓶內(nèi)，室溫條件下保存。③各廠家生產(chǎn)的尿試紙，其反應原理和項目排列方式都有不同，反應時間、顏色變化、靈敏度等各有不同，選用的測定單位也不一致，因此，不能混合使用或用不同的比色板比色。④試紙浸入尿液的時間不要太長，嚴格掌握比色時間，在規(guī)定時間時完成比色。某些反應如葡萄糖、酮體、潛血試驗等會因比色時間延長而使得結果偏高。⑤由于干化學法是依靠顏色變化來反映檢測結果的，因此人眼睛對顏色的識別和判斷非常重要。但是目測法因人與人之間對顏色的辨別能力不同，會出現(xiàn)判別誤差，因此在有條件的情況下盡量使用半自動或全自動尿液分析儀。⑥干化學儀器法檢查白細胞只能作為一種篩選試驗，絕不能代替顯微鏡檢查。

［1］叢玉隆 ．尿液常規(guī)分析質量控制及臨床應用體會 ［J］．臨床檢驗雜志，2001，19（4）：241-243．

［2］李小龍，郭仁勇，陳曉東．Diasys尿沉渣測定方法的參考值確定 ［J］．臨床檢驗雜志，2003，21（1）：46-47．

［3］葉應嫵，王毓三，申子喻 ．全國臨床檢驗操作規(guī)程 ［M］．3版 ．南京：東南大學出版社，2006：284-285．