前列腺癌組織中Aurora-A蛋白及mRNA的表達(dá)變化及意義

顧潤國，李科威，來衛(wèi)東，劉琳琳

(1山東醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，山東臨沂276000;2濰坊醫(yī)學(xué)院)

Aurora-A基因是新近發(fā)現(xiàn)的調(diào)解中心體、微管功能的絲氨酸/蘇氨酸激酶［1］，其過表達(dá)被認(rèn)為與多種實(shí)體腫瘤的發(fā)生有關(guān)［2］，是一種新的癌基因［3］。有研究發(fā)現(xiàn)在前列腺癌形成過程中Aurora-A可能起一定作用［4］。2010年3～12月，我們觀察了前列腺癌組織Aurora-A蛋白和Aurora-A mRNA的表達(dá)變化，并分析Aurora-A表達(dá)與前列腺癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 46例前列腺癌患者，年齡56～93歲，平均69.32歲。高分化24例、中分化10例、低分化12例;臨床分期A期9例、B期18例、C期13例、D期6例。取其手術(shù)切除前列腺癌組織標(biāo)本為前列腺組。另取46例良性前列腺增生患者手術(shù)切除的前列腺組織標(biāo)本為前列腺增生組，28例無前列腺疾病尸體的前列腺組織為對照組。

1.2 Aurora-A蛋白的檢測方法 采用免疫組化SP法。操作按試劑盒說明書進(jìn)行。以PBS代替一抗為陰性對照，以已知陽性切片為陽性對照。

1.3 Aurora-A mRNA的檢測方法 采用RT-PCR法。Aurora-A上游引物序列5'-ACCTTCGGCATCCTAACT-3'，下游引物序列 5'-GAGGCTTCCCAACTACAT-3'，擴(kuò)增產(chǎn)物長度423 bp。擴(kuò)增產(chǎn)物行2%瓊脂糖凝膠電泳，采用凝膠成像分析系統(tǒng)攝像并進(jìn)行半定量分析，mRNA表達(dá)量=目的基因條帶積分吸光度值/內(nèi)參照β-action基因條帶積分吸光度值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量數(shù)據(jù)以±s表示，比較用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料比較用χ2檢驗(yàn)。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

前列腺癌組39例(84.78%)Aurora-A蛋白陽性，Aurora-A mRNA 表達(dá)量為 1.15 ±0.52;前列腺增生組分別為 2 例(4.35%)、0.25 ±0.17，對照組分別為0例、0.11±0.04。前列腺癌組 Aurora-A 蛋白陽性表達(dá)率和Aurora-A mRNA表達(dá)量均明顯高于前列腺增生組和對照組(P均＜0.05)。前列腺癌組中低分化者Aurora-A mRNA表達(dá)量為1.43±0.50，明顯高于中、高分化者的 0.99 ±0.51(P ＜0.05)，Aurora-A mRNA表達(dá)量與前列腺癌分化程度有關(guān)。前列腺癌組中臨床分期為A、B期者Aurora-A mRNA 表達(dá)量為0.94±0.45，明顯低于 C、D 期者的1.35 ±0.57(P ＜0.05)，Aurora-A mRNA 表達(dá)量與前列腺癌臨床分期有關(guān)。

3 討論

Aurora激酶家族包括三個(gè)成員:Aurora-A、Aurora-B、Aurora-C［5］。研究表明 Aurora-A 與惡性腫瘤具有明顯相關(guān)性，乳腺癌［6］、食管癌［7］、肝癌［8］和膀胱癌［9］中均發(fā)現(xiàn)有Aurora-A的過表達(dá)。Aurora-A不僅參與中心體的復(fù)制、分離和成熟，而且還參與紡錘體組裝及其穩(wěn)定性的維持，中心體對于細(xì)胞準(zhǔn)確完成有絲分裂必不可少，因此當(dāng)Aurora-A過表達(dá)時(shí)將會導(dǎo)致染色體組的不穩(wěn)定性及中心體數(shù)目擴(kuò)增，最終導(dǎo)致腫瘤的形成［10］。目前關(guān)于Aurora-A的研究主要集中在Aurora-A參與的一些與腫瘤成因相關(guān)的信號通路的調(diào)節(jié)、細(xì)胞周期調(diào)節(jié)及中心體行為等方面，關(guān)于Aurora-A與腫瘤的分化程度及臨床分期相關(guān)性的研究鮮有報(bào)告。本研究結(jié)果顯示Aurora-A蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)中，細(xì)胞核中偶有表達(dá)，在前列腺癌組織中的表達(dá)量明顯高于良性增生及正常前列腺組織，表明前列腺癌組織中Aurora-A過表達(dá)，且Aurora-A過表達(dá)可能參與了前列腺癌的發(fā)生發(fā)展過程。其機(jī)制可能是使染色質(zhì)纖維解凝集、蛋白質(zhì)復(fù)合體向染色質(zhì)集結(jié)，導(dǎo)致中心體分離缺陷及染色體不穩(wěn)定性增加［11，12］，在一定程度上影響有絲分裂的準(zhǔn)確性，促使前列腺癌的發(fā)生和發(fā)展。本研究結(jié)果顯示，Aurora-A mRNA表達(dá)量明顯高于良性增生及正常前列腺組織，且與分化程度及臨床分期密切相關(guān)。提示Aurora-A基因的過表達(dá)與前列腺癌的臨床進(jìn)展、腫瘤的侵襲性轉(zhuǎn)移以及腫瘤細(xì)胞的惡性程度相關(guān)。

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