乙肝ELISA檢測(cè)中HBeAg和抗－HBe雙陽(yáng)性原因分析

張建強(qiáng)

(江蘇省金壇市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科 213200)

乙型肝炎病毒HBeAg陽(yáng)性，表明病毒復(fù)制活躍、 傳染性強(qiáng)，與HBsAg同時(shí)陽(yáng)性發(fā)生肝癌的危險(xiǎn)系數(shù)增加60倍，抗－HBe陽(yáng)性說(shuō)明病毒復(fù)制減少，傳染性弱。近年來(lái)，普遍使用ELISA一步法，在工作中遇到HBeAg和抗－HBe雙陽(yáng)性的少見(jiàn)模式，為了分析這一現(xiàn)象，筆者進(jìn)行了研究，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 本院門(mén)診和住院患者887例，其中36例初篩模式為 HBsAg、HBeAg、抗 －HBe、抗 －HBc4項(xiàng)陽(yáng)性。

1.2 試劑和儀器(1)HBeAg和抗－HBe為中山達(dá)安生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品，批號(hào)分別為:20100316、20100516，HBeAg 樣品吸光度值/臨界值(S/N)≥2.1判陽(yáng)性，抗－HBe以抑制率＞50%判陽(yáng)性。

1.3 方法(1)初篩:一步法，嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作，每加5份血消加入酶標(biāo)抗體。分別檢測(cè)HBeAg、抗－HBe。(2)復(fù)核:溶血標(biāo)本重抽血，脂法患者禁脂3天后抽血;血塊收縮不良，分離不完全標(biāo)本，經(jīng)3000r/minl0～15min的離心。

2 結(jié)果

初篩36份HBeAg和抗－HBe雙陽(yáng)血清。經(jīng)復(fù)核:8份 HBeAg陰性，抗 －HBe仍陽(yáng)性，20份HBe陰性，HBeAg仍陽(yáng)性，8份 HBeAg和 HBeAg仍為雙陽(yáng)。

3 討論

有學(xué)者提出 HBeAg和抗 －HBe雙陽(yáng)是HBeAg向抗HBe轉(zhuǎn)化的過(guò)渡階段［1］。本次試驗(yàn)與以上理論不完全相符，雙陽(yáng)性結(jié)果是假陽(yáng)性所致，可能的原因?yàn)?溶血標(biāo)本釋放大量過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白，產(chǎn)生干擾。血塊收縮不良，分離不徹底，血清中混有過(guò)氧化物酶成分，對(duì)HBeAg產(chǎn)生正干擾［2］。脂濁致抗－HBe干擾主要考慮乳糜微粒引起，它造成血清黏度增大的運(yùn)動(dòng)速度減慢或產(chǎn)生屏蔽效應(yīng)，抗原抗體結(jié)合幾率下降，最終顯色降低，產(chǎn)生假陽(yáng)性。一步法對(duì)抗－HBe易產(chǎn)生前帶現(xiàn)象，若血清中有大量HBeAg，使固相HBeAb－HBeAg－HBeAh－HRP生成減少，顯色下降產(chǎn)生假陽(yáng)性。一步法若加入血清放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，再加酶標(biāo)抗體也會(huì)產(chǎn)生抗－HBe假陽(yáng)性［3］。另仍然有8份標(biāo)本為雙陽(yáng)性，推測(cè)可能是由于方法方面的因素導(dǎo)致，由于條件所限未能進(jìn)一步確證。

綜上所述，HBeAg和抗一HBe雙陽(yáng)多為操作不規(guī)范和標(biāo)本影響因素造成。工作中嚴(yán)格按照SOP操作，對(duì)于溶血，脂血等不合格標(biāo)本應(yīng)予退回或重新抽血復(fù)查。

［1］朱忠勇.實(shí)用醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué).北京:人民軍醫(yī)出版社，1992，900 －901.

［2］趙友云，劉光中，馬煜南.酶免疫檢測(cè)HBeAg假陽(yáng)性原因分析.臨床檢驗(yàn)雜忐，2000，18:263.

［3］騰龍，陳鋼，洪加林.酶免疫競(jìng)爭(zhēng)一步法檢測(cè)乙型肝炎病毒抗－HBe影響因素探討.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，2003，26:111.