添加物對(duì)金線蓮離體培養(yǎng)生長(zhǎng)量的影響

甘勇輝，鄭加協(xié)

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添加物對(duì)金線蓮離體培養(yǎng)生長(zhǎng)量的影響

甘勇輝1，鄭加協(xié)2*

（1.漳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院 食品與生物工程系，福建 漳州 363000；2.福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 閩臺(tái)園藝研究中心，福建 漳州 363005）

以兩個(gè)金線蓮品種（s、）為試驗(yàn)樣本，通過培養(yǎng)基中添加不同的有機(jī)物及活性炭進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果表明培養(yǎng)基中添加適宜的有機(jī)物質(zhì)能顯著增加這兩種金線蓮培養(yǎng)植株的單株鮮重及干物質(zhì)含量；添加活性炭也可以顯著增加這兩種金線蓮植株的單株鮮重。

金線蓮；有機(jī)添加物；活性炭；生長(zhǎng)量

金線蓮為蘭科開唇蘭屬()植物，主要分布于中國(guó)、日本、斯里蘭卡、印度和尼泊爾等國(guó)，生長(zhǎng)在深山密林下或溪澗旁潮濕的草叢中或竹林下，特別是闊葉林下的潮濕地帶，一般呈稀疏、零星分布，很少成片密生[1]。金線蓮是我國(guó)傳統(tǒng)的珍貴藥材，因其葉脈呈金黃色的美麗脈紋，觀賞價(jià)值極高，也具有開發(fā)為室內(nèi)觀葉小盆栽的廣闊前景[2]。金線蓮含有多種化學(xué)成分，藥理作用顯著，臨床應(yīng)用十分廣泛[3]。分析其成分表明，其含有強(qiáng)心苷類、有機(jī)酸、氨基酸和多糖類、?；撬?、甾醇、生物堿、Sorghumol、黃酮苷及其衍生物、對(duì)羥基苯甲醛、阿魏酸、槲皮素、粗脂肪、胡蘿卜苷及微量元素如硒、鉬等[4]。金線蓮具有降血糖、抗腎炎、護(hù)肝、利尿、鎮(zhèn)靜、降血壓、抗氧化、改善骨質(zhì)疏松等作用[4-5]，其中多糖成分對(duì)癌細(xì)胞具有較好的殺傷作用，是非常有前景的抗腫瘤藥物或輔助抗腫瘤藥物[5]。

自然環(huán)境生長(zhǎng)的金線蓮因人為大量采挖及鳥、鼠等動(dòng)物啃食已大大降低了自然存量。近年來人工繁殖金線蓮的工作也相應(yīng)廣泛展開[6-9]，而金線蓮工廠化繁殖除了要解決組培污染率及移栽成活率等關(guān)鍵技術(shù)外，篩選單位時(shí)間內(nèi)能有效增加金線蓮單株鮮重及干物質(zhì)含量的培養(yǎng)方法也同樣的重要。本文從培養(yǎng)基中添加有機(jī)物等物質(zhì)對(duì)金線蓮離體快繁植株生長(zhǎng)量的影響進(jìn)行研究，探討在單位時(shí)間內(nèi)可增加其單株生長(zhǎng)量的有效培養(yǎng)基組成。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料：本試驗(yàn)采用目前人工繁殖較多的金線蓮品種，即臺(tái)灣種（白線開唇蘭，s）與本地種（花葉開唇蘭，）2個(gè)品種為試驗(yàn)樣本。

1.2 試驗(yàn)處理

1.2.1 有機(jī)添加物試驗(yàn)設(shè)如下5個(gè)配比：

1) 改良MS+6-BA 2.0g/L+NAA 0.5mg/L+糖20g+瓊脂8g +Ac 0.5g/L；

2) 改良MS+6-BA 2.0g/L+NAA 0.5mg/L+香蕉100g/L+糖20g+瓊脂8g +Ac 0.5g/L；

3) 改良MS+6-BA 2.0g/L+NAA 0.5mg/L+椰子汁100ml/L+馬齡薯40g/L+糖20g+瓊脂8g+ Ac 0.5g/L；

4) 改良MS+6-BA 2.0g/L+NAA 0.5mg/L+香蕉100g/L+馬齡薯40g /L+糖20g+瓊脂8g +Ac 0.5g/L；

5) 改良MS+6-BA 2.0g/L+NAA 0.5mg/L+香蕉50g/L+馬齡薯40g /L+地瓜粉50g/L+糖20g+瓊脂8g+Ac 0.5g/L。

1.2.2 活性炭添加試驗(yàn)設(shè)5個(gè)配比：

1) 改良MS+6-BA 1.0g/L+NAA 0.5mg/L+香蕉50g/L+馬齡薯40g /L+地瓜粉50g/L糖20g+瓊脂8g；

2) 改良MS+6-BA 1.0g/L+NAA 0.5mg/L+香蕉50g/L+馬齡薯40g /L+地瓜粉50g/L+糖20g+瓊脂8g+Ac 0.5 g/L；

3) 改良MS+6-BA 1.0g/L+NAA 0.5mg/L+香蕉50g/L+馬齡薯40g /L+地瓜粉50g/L+糖20g+瓊脂8g+Ac 1g/L；

4) 改良MS+6-BA 1.0g/L+NAA 0.5mg/L+香蕉50g/L+馬齡薯40g /L+地瓜粉50g/L+糖20g+瓊脂8g+ Ac2g/L；

5) 改良MS+6-BA 1.0g/L+NAA 0.5mg/L+香蕉50g/L+馬齡薯40g /L+地瓜粉50g/L+糖20g+瓊脂8g+ Ac 3g/L。

以上培養(yǎng)基滅菌前PH值均為5.8。

2個(gè)品種采用相同試驗(yàn)處理，試驗(yàn)所用的香蕉、馬齡薯采用超市購(gòu)品去皮、稱重、切碎，經(jīng)豆?jié){機(jī)絞勻后直接添加。椰子汁采用鮮汁。每處理接50瓶，每瓶接16個(gè)單芽莖段。培養(yǎng)瓶采用600mL帶橡膠塞玻璃瓶。培養(yǎng)溫度為25±1℃，光照10hr/天，光照強(qiáng)度約1600Lx。分別于接種后30、60、90、120、150天在每處理中隨機(jī)抽樣2瓶、每處理重復(fù)3次抽樣進(jìn)行單株鮮重、干重測(cè)定，取平均值。

1.3 水份測(cè)定方法

每次把試驗(yàn)抽樣植株洗去培養(yǎng)基后攤開，自然晾干后稱全草重即為單株鮮重。水份測(cè)定方法采用GB5009.3-2010方法進(jìn)行，對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 有機(jī)物添加試驗(yàn)

試驗(yàn)各處理單芽莖段接種16天左右均能萌發(fā)出新芽，在節(jié)上長(zhǎng)出少數(shù)氣生根，接種后45天左右芽基部長(zhǎng)出伸入培養(yǎng)基的基部根，隨培養(yǎng)時(shí)間繼續(xù)延長(zhǎng)苗不斷增壯，各處理平均單株鮮重及烘干重結(jié)果見表1。有機(jī)物添加處理（處理2-5）接種后2個(gè)金線蓮品種離體培養(yǎng)植株生長(zhǎng)量增加從大到小依次為第2、3、4月，隨后的月份生長(zhǎng)增加量減少，而處理1接種3個(gè)月后培養(yǎng)植株單株鮮重增加量迅速降低（見圖1）。本試驗(yàn)條件下，添加有機(jī)物比不添加有機(jī)物處理可極顯著增加金線蓮的單株鮮重與單株干重，而添加有機(jī)物的各處理間（處理2-5）對(duì)金線蓮生長(zhǎng)量的影響差異不明顯。有機(jī)物添加的各處理臺(tái)灣種烘干率為7.00%～7.22%，本地種烘干率為7.60%～7.89%。而不添加有機(jī)物處理臺(tái)灣種的烘干率為4.50%，本地種烘干率為4.68%（表2）。試驗(yàn)結(jié)果表明培養(yǎng)基中添加適量的有機(jī)物能提高金線蓮離體培養(yǎng)植株的烘干率，其中臺(tái)灣種能提高2.63%左右，本地種可提高3.05%左右。

表1 有機(jī)添加物對(duì)金線蓮生長(zhǎng)量的影響

圖1 有機(jī)物添加對(duì)金線蓮培養(yǎng)植株生長(zhǎng)量的影響

表2 有機(jī)物添加對(duì)金線蓮培養(yǎng)植株生長(zhǎng)量（120天）的影響

2.2 活性炭添加試驗(yàn)

活性炭添加的各處理試驗(yàn)結(jié)果見表3。結(jié)果表明處理1接種2金線蓮品種培養(yǎng)物均表現(xiàn)為接種后第2個(gè)月生長(zhǎng)量最大，第3個(gè)月生長(zhǎng)量降低，從第4個(gè)月后生長(zhǎng)量明顯減少直至趨于不增加。處理1接種的2個(gè)金線蓮品種培養(yǎng)物均表現(xiàn)節(jié)間短，節(jié)上的葉片小，基部易分化小側(cè)芽。添加有機(jī)物及活性炭的處理（處理2-5）第2、3兩個(gè)月鮮重增加較快，臺(tái)灣種第4個(gè)月增加量開始降低，本地種降低較不明顯（圖2）。處理2至處理5接種的培養(yǎng)物節(jié)間均明顯比處理1的培養(yǎng)植株節(jié)間長(zhǎng)，且葉片基本完全展開、葉片較大，不長(zhǎng)小側(cè)芽。添加活性炭各處理之間的單株鮮重、單株干重差異不明顯（表4），結(jié)果表明金線蓮離體培養(yǎng)壯苗/生根培養(yǎng)基中應(yīng)適量添加活性炭，以每升培養(yǎng)基中添加1g～2g活性炭為宜。

3 結(jié)果與討論

3.1 培養(yǎng)基中添加有機(jī)物質(zhì)能顯著增加2個(gè)金線蓮品種植株的單株鮮重及單株干重。添加有機(jī)物質(zhì)處理的培養(yǎng)物生長(zhǎng)量增加最快時(shí)間為接種后第2個(gè)月，其次為第3個(gè)月，第4個(gè)月后生長(zhǎng)增加量降低。從培養(yǎng)室及培養(yǎng)設(shè)備的利用效率考慮，金線蓮壯苗/生根培養(yǎng)以4個(gè)月為宜，太早移栽培養(yǎng)基的增產(chǎn)效果還沒有充分發(fā)揮，太遲則相應(yīng)降低了培養(yǎng)室及培養(yǎng)設(shè)備的利用效率。

3.2 培養(yǎng)基中添加有機(jī)物質(zhì)能顯著增加2個(gè)金線蓮品種培養(yǎng)植株的烘干率。臺(tái)灣種平均可提高2.63%左右，本地種可提高3.05%左右?？赡苁请x體培養(yǎng)的金線蓮植株較難以直接利用環(huán)境中的光、CO2和培養(yǎng)基中的簡(jiǎn)單化合物等合成自身的較大分子化合物，而通過添加有機(jī)物質(zhì)提供氨基酸、激素、酶等一些較復(fù)雜化合物，金線蓮離體培養(yǎng)植株可直接對(duì)其吸收利用，從而促進(jìn)了其細(xì)胞內(nèi)含物的大量增加，提高了細(xì)胞干物質(zhì)含量。

3.3 活性炭的添加有利于金線蓮離體培養(yǎng)時(shí)植株基部根的生長(zhǎng)。不添加活性炭處理的培養(yǎng)物很少長(zhǎng)基部根，植株的葉片小，彩色網(wǎng)紋不明顯。據(jù)報(bào)道1mg活性炭可吸附100ng左右的生長(zhǎng)活性物質(zhì)，少量的活性炭可完全吸附培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)?；钚蕴康奶砑蛹锤淖兞伺囵B(yǎng)基中有作用效果的激素量，也改變細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的比例，且活性炭具巨大表面積，孔隙度大，可吸持一定量的氧氣?？赡苁腔钚蕴康纳鲜鰪?fù)雜作用促進(jìn)了金線蓮植株基部根系的良好生長(zhǎng)，進(jìn)而提高了離體培養(yǎng)植株的生長(zhǎng)量。

表3 活性炭的添加對(duì)金線蓮生長(zhǎng)量的影響

表4 活性炭的添加對(duì)金線蓮生長(zhǎng)量（120天）的影響

圖2 活性炭添加對(duì)金線蓮培養(yǎng)植株生長(zhǎng)量的影響

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Effect ofOrganic Additives and Active Carbon on the Growth of Jewel Orchid

GAN Yong-hui1, ZHENG Jia-xie2

(1.Zhangzhou Institute of Technology，Zhangzhou，F(xiàn)ujian 363000,China;2.Fujian-Taiwan Horticulture Research Center,Fujian Academy of Agricultural Sciences Zhangzhou，F(xiàn)ujian 363005,China)

The effects of organic additives and active carbon on the growth of the in vitro jewel orchidandin different media were studied．The results showed thatthe media as compared with the control under the treatment with organic additives extremely significantly incrested the single plant fresh weight and content of dry matter ofand,and the media with active carbon extremely significantly incrested the single plant fresh weight ofand.

Jewel orchid；Organic additive；Active carbon；Growth

S567.23＋9

A

1673-1417（2011）04-0030-05

2011－09－20

福建省重點(diǎn)科技項(xiàng)目“金線蓮工廠化育苗與栽培及加工技術(shù)產(chǎn)業(yè)化研究與示范”（2011S0033）

甘勇輝（1967－），男，福建龍海人，副研究員，本科，研究方向：園藝植物組織培養(yǎng)與育種。

通信作者：鄭加協(xié)（1957－），男，福建莆田人，研究員。

（責(zé)任編輯：季平）