生物安全三級(jí)實(shí)驗(yàn)室人員管理相關(guān)問(wèn)題的探討

周志統(tǒng)，瞿滌

1．上海市(復(fù)旦大學(xué)附屬)公共衛(wèi)生臨床中心生物安全三級(jí)實(shí)驗(yàn)室，上海201508；2．復(fù)旦大學(xué)生物安全三級(jí)實(shí)驗(yàn)室，上海 200032

嚴(yán)重急性呼吸綜合征(severe acute respiratory syndrom，SARS)暴發(fā)流行后，2003～2004年國(guó)內(nèi)、外發(fā)生數(shù)起實(shí)驗(yàn)室SARS冠狀病毒感染，引起全球重視。為防止實(shí)驗(yàn)室意外感染，避免所研究的高致病性病原微生物污染環(huán)境，各級(jí)部門均給予了前所未有的關(guān)注。我國(guó)政府和相關(guān)部門頒布了系列生物安全法律、法規(guī)及標(biāo)準(zhǔn)，以規(guī)范從事病原微生物工作的實(shí)驗(yàn)室，尤其對(duì)從事高致病性病原微生物研究的實(shí)驗(yàn)室建設(shè)和運(yùn)行制定了嚴(yán)格的管理政策：明確生物安全三級(jí)實(shí)驗(yàn)室(biosafety level 3 laboratory, BSL-3)、生物安全四級(jí)實(shí)驗(yàn)室必須通過(guò)中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)的認(rèn)可，并獲國(guó)務(wù)院衛(wèi)生主管部門或獸醫(yī)主管部門從事高致病性病原微生物的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)資格認(rèn)證后，方可開展相應(yīng)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)[1-4]。由于BSL-3實(shí)驗(yàn)室是從事高致病性病原微生物基礎(chǔ)研究、病原檢測(cè)和鑒定，以及疫苗和治療藥物研發(fā)、考核等工作的場(chǎng)所，即使實(shí)驗(yàn)室具有較為完善的設(shè)備和操作程序，實(shí)驗(yàn)人員仍存在被所操作的病原微生物感染的可能性[5]。在臺(tái)灣地區(qū)和新加坡發(fā)生的實(shí)驗(yàn)室SARS冠狀病毒感染案例，均為一線研究人員。經(jīng)分析，其共同原因是工作人員主觀上麻痹大意，未能按照實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范和程序操作[6]。實(shí)驗(yàn)室管理的疏漏和意外事故導(dǎo)致工作人員感染，也可能造成環(huán)境污染和其他周圍人群感染。因此，在高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室運(yùn)轉(zhuǎn)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)室主要管理人員對(duì)日常工作的嚴(yán)格管理顯得更為重要[7]。經(jīng)數(shù)年BSL-3實(shí)驗(yàn)室運(yùn)轉(zhuǎn)和管理，我們體會(huì)到實(shí)驗(yàn)室必須按規(guī)范和程序運(yùn)行，實(shí)驗(yàn)室的生物安全與“人”密切相關(guān)，如何管理好實(shí)驗(yàn)人員是保證實(shí)驗(yàn)室生物安全的關(guān)鍵。

1 對(duì)BSL-3實(shí)驗(yàn)室操作人員的要求

BSL-3實(shí)驗(yàn)室是培養(yǎng)高致病性病原微生物學(xué)研究人才的場(chǎng)所。在嚴(yán)格按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB19489-2008)要求建設(shè)BSL-3實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備、設(shè)施(在此稱“硬件”) 后，實(shí)驗(yàn)人員將是決定實(shí)驗(yàn)室安全運(yùn)行的決定性因素。在BSL-3實(shí)驗(yàn)人員管理方面，除需經(jīng)生物安全培訓(xùn)并考核合格、身體健康等必備上崗條件及營(yíng)造內(nèi)部和諧氛圍外，實(shí)驗(yàn)室主要管理者還必須考慮實(shí)驗(yàn)人員是否具有高度責(zé)任心、思想上是否對(duì)生物安全重視、對(duì)所要開展實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的熟悉程度、個(gè)人防護(hù)操作的熟練水平等，而高職稱、高學(xué)歷不一定是進(jìn)入BSL-3實(shí)驗(yàn)室工作的必備條件。

1.1 具備從事病原微生物實(shí)驗(yàn)操作的工作背景

BSL-3實(shí)驗(yàn)室要求操作人員在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中不僅需注意操作過(guò)程，還需注意各操作步驟的生物安全防護(hù)及意外事故的及時(shí)處理。因此，為保證實(shí)驗(yàn)室安全運(yùn)轉(zhuǎn)，對(duì)進(jìn)入BSL-3實(shí)驗(yàn)室操作的實(shí)驗(yàn)人員，最好有2年以上病原微生物學(xué)的工作經(jīng)歷，尤其要求已能熟練進(jìn)行病原微生物實(shí)驗(yàn)操作并掌握實(shí)驗(yàn)原理。具有上述技能的人，經(jīng)過(guò)生物安全培訓(xùn)(含實(shí)際操作中的生物安全注意事項(xiàng)等)，可在BSL-3實(shí)驗(yàn)室中開展工作。本科生或低年級(jí)在讀研究生，鑒于對(duì)病原微生物缺乏充分了解，特別是對(duì)病原微生物實(shí)驗(yàn)操作不夠熟練，不適宜立即進(jìn)入BSL-3實(shí)驗(yàn)室工作。世界衛(wèi)生組織 《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》(2004)中也特別強(qiáng)調(diào)了良好的專業(yè)訓(xùn)練和技能在實(shí)驗(yàn)室生物安全中的重要性[8]。

1.2 具備獨(dú)立工作的能力

具有熟練操作病原微生物實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)，但初次進(jìn)BSL-3實(shí)驗(yàn)室工作的人員必須經(jīng)過(guò)培訓(xùn)、見習(xí)(中央監(jiān)控室觀察)，并在BSL-3實(shí)驗(yàn)室工作人員帶教下實(shí)習(xí)3個(gè)月(可根據(jù)每個(gè)人掌握的程度決定是否延長(zhǎng))。在掌握個(gè)人防護(hù)、進(jìn)出流程、應(yīng)急預(yù)案、廢棄物處置和清場(chǎng)等程序后，該人員才能遵循雙人操作制度在BSL-3實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行獨(dú)立操作。

2 BSL-3實(shí)驗(yàn)室操作人員的培訓(xùn)重點(diǎn)

在進(jìn)入BSL-3實(shí)驗(yàn)室前，實(shí)驗(yàn)人員按規(guī)定進(jìn)行生物安全培訓(xùn)和考核[1]，但目前培訓(xùn)狀況是理論多于實(shí)際。我們體會(huì)到，除了讓培訓(xùn)者了解生物安全相關(guān)的國(guó)家法律、法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)，以及實(shí)驗(yàn)室的規(guī)章、制度外，更應(yīng)注重培訓(xùn)以下幾點(diǎn)：①必須認(rèn)識(shí)到個(gè)人(或?qū)嶒?yàn)工作人員)原因造成生物安全事故需負(fù)相應(yīng)的法律責(zé)任，清楚在BSL-3實(shí)驗(yàn)室哪些事可干、哪些事不可干。②進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室個(gè)人防護(hù)裝備的穿戴、脫卸程序，生物安全事故發(fā)生時(shí)的應(yīng)急處置，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中易出現(xiàn)生物安全風(fēng)險(xiǎn)的操作步驟及防范措施等是培訓(xùn)的重點(diǎn)，而病原微生物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)的學(xué)習(xí)和熟練程度不應(yīng)由BSL-3實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)培訓(xùn)(進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前就應(yīng)具備)。③BSL-3實(shí)驗(yàn)室管理人員不僅要嚴(yán)格按照國(guó)家法律、法規(guī)進(jìn)行BSL-3實(shí)驗(yàn)室的管理，還需經(jīng)常與國(guó)內(nèi)、外相關(guān)單位相互學(xué)習(xí)和交流。在充分考慮我國(guó)生物安全法律、法規(guī)的前提下，學(xué)習(xí)國(guó)內(nèi)、外相關(guān)單位BSL-3實(shí)驗(yàn)室有效的管理制度及操作程序，根據(jù)本單位具體情況，有的放矢地吸收、改良和利用，形成文件并嚴(yán)格執(zhí)行。

3 BSL-3實(shí)驗(yàn)室操作人員的管理重點(diǎn)

在BSL-3實(shí)驗(yàn)室的生物安全管理環(huán)節(jié)中，對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的管理最為困難。對(duì)新進(jìn)的實(shí)驗(yàn)人員與具有BSL-3實(shí)驗(yàn)室工作經(jīng)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)人員，管理的重點(diǎn)有所不同。

對(duì)新進(jìn)的實(shí)驗(yàn)人員，需重點(diǎn)關(guān)注其實(shí)驗(yàn)操作的基本技能及對(duì)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)生物安全操作規(guī)程和進(jìn)出流程的執(zhí)行。一般來(lái)說(shuō)，這些實(shí)驗(yàn)人員初進(jìn)BSL-3實(shí)驗(yàn)室，往往比較謹(jǐn)慎，并能認(rèn)真執(zhí)行生物安全制度和操作程序，在生物安全方面出錯(cuò)的可能性相對(duì)較少；但在實(shí)驗(yàn)中若出現(xiàn)意外事故，則較易緊張和不知所措。因此，需特別關(guān)注其在實(shí)驗(yàn)中的可能出錯(cuò)并及時(shí)處理。對(duì)具有BSL-3實(shí)驗(yàn)室工作經(jīng)驗(yàn)的人員，應(yīng)特別關(guān)注其生物安全操作和進(jìn)出流程的操作。因在實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期工作未發(fā)生問(wèn)題，可能會(huì)放松對(duì)生物安全的要求，無(wú)意中未遵循所制訂的生物安全操作規(guī)程和進(jìn)出流程。因此，對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的管理應(yīng)具有個(gè)性管理、過(guò)程管理等特點(diǎn)。

4 中央監(jiān)控室監(jiān)控的注意要點(diǎn)

4.1 對(duì)監(jiān)控人員的要求

不同實(shí)驗(yàn)室所制訂的中央監(jiān)控室人員的職責(zé)不同，但他們的主要工作是對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、設(shè)施進(jìn)行保養(yǎng)和維護(hù)；在實(shí)驗(yàn)室開展實(shí)驗(yàn)時(shí)，對(duì)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)進(jìn)行監(jiān)控，并解決實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的特殊需要。我們的體會(huì)是，中央監(jiān)控室人員不僅要對(duì)開展的項(xiàng)目相當(dāng)了解，還要清楚實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的具體操作程序。每次實(shí)驗(yàn)均應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)人員全程監(jiān)控，通過(guò)監(jiān)控系統(tǒng)對(duì)人員進(jìn)出、實(shí)驗(yàn)活動(dòng)及實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的清場(chǎng)等過(guò)程進(jìn)行監(jiān)控和影像記錄。因此，BSL-3實(shí)驗(yàn)室中央監(jiān)控室的監(jiān)控人員不僅要對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、設(shè)施有很好的了解，還必須了解實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的操作規(guī)范及生物安全的防范要點(diǎn)。

4.2 監(jiān)控人員對(duì)實(shí)驗(yàn)人員和實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的注意重點(diǎn)

中央監(jiān)控室監(jiān)控人員對(duì)實(shí)驗(yàn)人員和實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的注意重點(diǎn)如下：①實(shí)驗(yàn)室人員的個(gè)人防護(hù)是否到位，是否有漏穿、漏戴和沒有按實(shí)驗(yàn)室規(guī)定穿戴個(gè)人防護(hù)用品。②實(shí)驗(yàn)操作是否規(guī)范，有無(wú)違反生物安全規(guī)定的操作，尤其需注意在無(wú)意識(shí)或工作緊張狀態(tài)下所出現(xiàn)的違反生物安全操作規(guī)范的小動(dòng)作。如在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)人員在生物安全柜內(nèi)操作后，未更換手套就直接接觸個(gè)人防護(hù)用品或生物安全柜外的儀器，造成個(gè)人防護(hù)用品和儀器的污染。③實(shí)驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行的活動(dòng)與其所申請(qǐng)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容是否相符，其更改的實(shí)驗(yàn)方案有無(wú)與BSL-3實(shí)驗(yàn)室管理負(fù)責(zé)人討論、經(jīng)過(guò)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及得到生物安全委員會(huì)的批準(zhǔn)。④在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，是否有生物安全事件的意外發(fā)生。⑤BSL-3實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)的設(shè)備或儀器是否出現(xiàn)不為實(shí)驗(yàn)人員注意到的故障。⑥鑒于BSL-3實(shí)驗(yàn)室監(jiān)控及控制程序的特殊性，中央監(jiān)控室的電腦不得外接網(wǎng)絡(luò)。⑦實(shí)驗(yàn)室24 h連續(xù)運(yùn)行時(shí)，中央監(jiān)控室應(yīng)考慮安排人員值班，以便及時(shí)排除實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、設(shè)施的突發(fā)小故障。當(dāng)出現(xiàn)比較棘手的故障時(shí)，也可及時(shí)通知維修人員趕到現(xiàn)場(chǎng)。

總之，實(shí)驗(yàn)室的生物安全防護(hù)問(wèn)題需長(zhǎng)期受到重視。在實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、設(shè)施等硬件滿足生物安全法律、法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)要求的基礎(chǔ)上，必須通過(guò)嚴(yán)格的管理制度、標(biāo)準(zhǔn)化的操作程序等綜合措施，加強(qiáng)對(duì)BSL-3實(shí)驗(yàn)室人員的管理。在日常管理中，必須不斷提高BSL-3實(shí)驗(yàn)室人員基本素質(zhì)(包括人品素質(zhì)和專業(yè)素質(zhì))，通過(guò)經(jīng)常化的培訓(xùn)，加深其對(duì)實(shí)驗(yàn)室生物安全的認(rèn)知和意識(shí)，提高其實(shí)際操作和應(yīng)急實(shí)戰(zhàn)的能力。只有具有高素質(zhì)的隊(duì)伍，才能保證BSL-3實(shí)驗(yàn)室的生物安全管理到位，掌控生物安全的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，確保實(shí)驗(yàn)室的安全運(yùn)轉(zhuǎn)，防患于未然，確保科研人員的安全，有利于高致病性微生物檢測(cè)和研究的順利進(jìn)行；也有利于確保周圍環(huán)境不受污染，保證人群的安全。

[1] 中華人民共和國(guó)國(guó)務(wù)院.病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例[EB/OL]. 2004.http://www.doc88.com/p-99739771456.html.

[2] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.微生物生物醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則 (中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)WS233-2002) [S].2002.

[3] 中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).實(shí)驗(yàn)室生物安全管理通用要求(GB 19489-2008) [S].2008.

[4] 中華人民共和國(guó)建設(shè)部，中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范(GB 50346-2004) [S].2004.

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[7] 李湘東, 孫理華. 三級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室管理體系的建立[J]. 公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué)，2007，18 (5): 126-128.

[8] WHO Laboratory Biosafety Manual—Third Edition [DB/OL]. http://www.who.int/csr/resources/publications/biosafety/WHO_CDS_CSR_LYO_2004_11/en/.