景天三七醇提物體外抗菌作用的研究

張彥霞，喬海霞，單永強(qiáng)，劉文娟，劉佐霞，康 蒙

（1．河北北方學(xué)院病原生物研究所，河北 張家口075000；2．河北北方學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系2007級(jí)，河北 張家口075000）

景天三七 （Sedum aizoon L．）為景天科景天屬植物，別名土三七、費(fèi)菜、血散、養(yǎng)心草、吐血草，中醫(yī)認(rèn)為景天三七有散瘀止痛、補(bǔ)氣攝血的功效，故常用于治療跌打損傷、創(chuàng)傷出血、吐血、產(chǎn)后血?dú)馔吹龋酒愤€可防治心臟病、高血壓、高血脂、血管硬化，用鮮全草燉豬心可治療神經(jīng)衰弱、失眠、煩躁不安等［1－3］．有報(bào)道顯示景天三七水煎劑對(duì)金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌均有抑制作用［4］，但景天三七醇提物的抑菌作用未見(jiàn)報(bào)道，因此對(duì)景天三七醇提物的抑菌作用進(jìn)行了初步研究．

1 材 料

1．1 藥 材

野生土三七采自河北省張家口市區(qū)，黃連購(gòu)自張家口市中醫(yī)院．

1．2 菌 種

標(biāo)準(zhǔn)菌株：金黃色葡萄球菌，表皮葡萄球菌，微球菌，大腸埃希菌，乙型副傷寒沙門(mén)菌，銅綠假單胞菌，痢疾志賀菌，奇異變形桿菌，產(chǎn)氣桿菌，枯草芽胞桿菌，炭疽桿菌，近平滑念珠菌，熱帶念珠菌，白色念珠菌，均購(gòu)自北京生物制品檢定所．

1．3 培養(yǎng)基

1．3．1 液體培養(yǎng)基：Mueller－Hinton （MH）肉湯

1．3．2 固體培養(yǎng)基：Mueller－Hinton（MH）瓊脂，沙氏培養(yǎng)基

1．4 儀 器

721分光光度計(jì)，37℃培養(yǎng)箱，高壓蒸汽滅菌器，超凈工作臺(tái)．

2 方 法

2．1 景天三七醇提物的制備

參照陳奇的方法［5］進(jìn)行，濃縮成含生藥1 g／m L的藥液，滅菌后備用．

2．2 菌液的制備

2．2．1 0．5麥?zhǔn)媳葷岜葷峁芘渲茫翰僮鲄⒖坚t(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)［6］．

2．2．2 景天三七菌液制備：將實(shí)驗(yàn)所用14種菌的培養(yǎng)物 （菌落）用無(wú)菌生理鹽水制成菌液，濃度相當(dāng)于0．5麥?zhǔn)媳葷幔涑杀葷嵋合喈?dāng)于5×（107～108CFU／m L）．

2．3 實(shí)驗(yàn)方法

稀釋法：取無(wú)菌小試管5支作為一組，第一管加無(wú)菌肉湯0．4 m L其余五管加肉湯0．5 m L，再依次加藥液，第一管和第二管加藥液0．5 m L，從第二管開(kāi)始倍比稀釋?zhuān)缓蟮诙恋谖逯г嚬芨骷尤鉁?．4 m L，同樣方法制備14組試管．每組試管景天三七醇提物的最終稀釋度依次為：0．5 g／m L，0．25 g／m L，0．125 g／m L，0．0625 g／m L，0．03125 g／m L．實(shí)驗(yàn)時(shí)將14種實(shí)驗(yàn)菌液分別加入14組含藥液培養(yǎng)基的試管中，每管0．1 m L菌液，同時(shí)設(shè)培養(yǎng)基、藥液和菌液對(duì)照管．所有試管放置溫箱內(nèi)37℃，培養(yǎng)24 h后觀察結(jié)果，在對(duì)照管符合要求的情況下，將各實(shí)驗(yàn)管的培養(yǎng)物接種至相應(yīng)培養(yǎng)基的瓊脂平板上，確定是否有細(xì)菌生長(zhǎng)．37℃，24 h觀察結(jié)果，以瓊脂平板上完全無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)的藥物最高稀釋度為最低抑菌濃度（MIC）．

3 結(jié) 果

3．1 對(duì)照組黃連的抑菌試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1．

表1 黃連對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸大腸埃希菌的最低抑菌濃度 （MIC）

3．2 景天三七醇提物對(duì)實(shí)驗(yàn)菌的最低抑菌濃度 （MIC）見(jiàn)表2．

表2 景天三七醇提物對(duì)14種菌的最低抑菌濃度 （MIC）

表1結(jié)果顯示：黃連對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌最低抑菌濃度分別為0．125 g／m L、0．5 g／m L，重復(fù)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果一致．

表2結(jié)果顯示：景天三七醇提物對(duì)球菌的抑菌效果強(qiáng)于桿菌．對(duì)無(wú)芽孢細(xì)菌的抑菌作用強(qiáng)于有芽孢細(xì)菌．對(duì)真菌的抑菌作用較弱，對(duì)熱帶念珠菌，白色念珠菌，近平滑念珠菌的MIC均大于0．5 g／m L．

4 討 論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明景天三七醇提物有體外抗菌作用，對(duì)金黃色葡萄球菌，表皮葡萄球菌，微球菌的MIC為0．125 g／m L，與對(duì)照黃連的最低抑菌濃度相同，提示景天三七可能在治療一般化膿性炎癥和腸道傳染病等方面有一定應(yīng)用價(jià)值．

本次實(shí)驗(yàn)預(yù)示了此藥可能具有廣泛的臨床應(yīng)用前景，特別是耐藥患者，在使用大量抗生素后產(chǎn)生耐藥性菌株，是否可以聯(lián)合此藥來(lái)進(jìn)行有效的治療？若配伍使用，利用藥物間的協(xié)同作用，還將增強(qiáng)其抗菌作用，是否可用于臨床抗感染治療有待于進(jìn)一步研究．

本實(shí)驗(yàn)在體外進(jìn)行，在體內(nèi)能否達(dá)到有效抗菌濃度，控制感染，有待繼續(xù)探討．

［1］ 謝宗萬(wàn)．中藥材品種論述 ［M］．第2版 （上冊(cè)）．上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社．1989：79－80

［2］ 林水金．心臟病患者的良藥－費(fèi)菜 ［J］．中國(guó)花卉盆景，1997，（11）：6

［3］ 陳偉超．新鮮景天三七治療中風(fēng) ［J］．中國(guó)民間療法，2000，8（09）：46

［4］ 譚蘋(píng)，姚麗芳，彭承秀．40種秦嶺 “七藥”最低抑菌濃度的測(cè)定 ［J］．時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2001，12（06）：484－485

［5］ 陳奇主編．中藥藥理研究方法學(xué) ［J］．北京：人民衛(wèi)生出版社，1993：67－261

［6］ 張玉妥，季建軍．醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) ［M］．北京：人民衛(wèi)生出版社，2004：42