Harris蘇木素與Gill蘇木素染液的應(yīng)用體會

常 峰

HE染色是最基本的病理組織學(xué)染色，染細(xì)胞核的蘇木素是HE染色過程中的關(guān)鍵，蘇木素染色的好壞決定著細(xì)胞核的著色深淺，也決定了一張切片的質(zhì)量[1]。蘇木素染液的配制方法有很多，目前最常用的為Harris蘇木素與Gi11蘇木素，這兩種染液的染色原理雖然相同，但在實(shí)際配制與染色過程中又有一些不同，現(xiàn)做以下探討。

1 材料和方法

1.1 Harris蘇木素液（1000ml）

1.1.1 材料：甲液：蘇木素5g，無水乙醇50m1；

乙液：硫酸鋁鉀100g，蒸餾水 950m1；

丙液：一氧化汞2.5g。

1.1.2 方法：經(jīng)典的配制方法是，先將甲液加熱溶解后，密封待用，再將乙液加熱溶解至沸，去火，待溶液仍處于小沸騰狀態(tài)時再將甲液徐徐傾入其中，全部混合后，再使溶液在短時間內(nèi)加熱至沸騰，去火，最后將氧化汞緩慢傾入溶液中（氧化汞一定要慢慢少量分次加入，切忌急躁。因氧化汞倒入后，溶液會迅速膨脹易沸出容器外而發(fā)生危險(xiǎn)。）此時液體變?yōu)樯钭仙?，待氧化汞全部放入后，再將溶液加溫至沸騰片刻，立即將溶液放入流動的冷水中，并緩緩地連續(xù)搖晃至溶液完全冷卻為止。隔夜后過濾，加入冰醋酸（按5%比例）混勻，再過濾后保存于冰箱內(nèi)備用。

1.2 Gill蘇木素液（1000ml）

1.2.1 材料：蘇木素2g，無水乙醇250m1；

硫酸鋁17.6g，蒸餾水750m1；

碘酸鈉0.2g，冰醋酸20m1。

1.2.2 方法：先將蘇木素溶于無水酒精，硫酸鋁溶于蒸餾水，然后兩液混合后加入碘酸鈉，最后加入冰醋酸。

2 結(jié)果

兩種蘇木素液對常規(guī)石蠟切片和冰凍切片進(jìn)行染色，均得到滿意的結(jié)果。

3 討論

3.1 Harris蘇木素液是全氧化蘇木素，蘇木素用量大，被氧化成有染色能力的蘇木紅多，因此染色后需要鹽酸乙醇分化，以退掉過染和不應(yīng)著色的部分，屬于退行性染色。Gi11蘇木素是半氧化蘇木素，蘇木素用量小，被氧化成的蘇木紅少，因此在較短時間內(nèi)不會產(chǎn)生過染色，自然也就不需要鹽酸乙醇分化了[2]。

3.2 Harris蘇木素和Gi11蘇木素配制過程中使用的媒染劑分別是硫酸鋁鉀和硫酸鋁，其中起作用的都是鋁離子。Harris蘇木素中的媒染劑已過量，因染液冷卻后常有硫酸鋁鉀結(jié)晶析出。過多的媒染劑不但不能增強(qiáng)染色能力和延長染色劑的使用時間，反而使溶液呈膠狀并很快失效[3]。

3.3 Gi11蘇木素配制過程中使用的氧化劑為碘酸鈉，Harris蘇木素使用的氧化劑是氧化汞。蘇木素只有變成蘇木紅才能發(fā)揮染料的作用，在這個過程中氧化是關(guān)鍵，氧化不充分其染色能力差，過度氧化則染液表面會出現(xiàn)一層氧化膜，引起切片污染。Harris蘇木素通過加溫氧化，雖然可以加速蘇木紅的形成，但易出現(xiàn)金屬樣氧化膜浮在液面和容器壁上[3]。碘酸鈉氧化劑是水溶性氧化劑，在與蘇木素氧化過程中呈均勻反應(yīng)，氧化還原作用是持續(xù)增強(qiáng)的，無氧化膜形成，所以也減少了對切片的污染，且費(fèi)用比使用氧化汞低廉，無毒性，還能減少環(huán)境污染[1]。

3.4 Harris蘇木素是一種漸退性染液，配制后使用就呈現(xiàn)較強(qiáng)的著色力。Gi11蘇木素的最佳染色力是在染色中期，因此在掌握染色時間上，二者有所不同[4]。

[1]李紀(jì)理.改良Harris蘇木素液染色效果的觀察[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2008,7(9):151.

[2]楊楓，魏艷華.介紹一種改良的Gi11蘇木素液[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2009,15(3):274.

[3]陳夢紅，廖云萍，石琳俐，等.一種迅速混合配制蘇木素的方法[J].河南腫瘤學(xué)雜志，2009,15(4):292.

[4]趙紅艷.改良的蘇木素-伊紅染液配制法及應(yīng)用[J].西北國防醫(yī)學(xué)雜志，2010,24(1):24.