禽流感病毒及禽流感的研究進展

王坤珍

（重慶市巴南區(qū)界石鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，重慶 401346）

禽流感是一種非常古老的病毒。1878年意大利首次發(fā)現(xiàn)了高致病性禽流感病毒，稱之為“雞瘟”，48小時內(nèi)引起的死亡率可達100%[1]。在 1900年它被人類發(fā)現(xiàn)時稱其為“真性雞瘟病毒”[2]。直至 1955年，人類才正式把它命名為禽流感病毒[3]。由于其血清型較多，且易發(fā)生變異，被國際獸醫(yī)局列為A類傳染病，并被列入國際生物公約動物類傳染病名單。

禽流感是由正黏病毒科 A型流感病毒引起的一種禽類的急性、烈性傳染病[4]。典型病毒粒子呈球形狀[5]直徑80～120 nm，平均為100 nm。特別是某些毒株初次分離時，常呈絲狀，絲狀體長短不一，長者可達數(shù)微米，但經(jīng)雞胚和細胞培養(yǎng)物連續(xù)傳代后可變?yōu)榍蛐蝃6]。禽流感病毒有囊膜，其基因組為分節(jié)段、單股負鏈RNA。AIV囊膜的表面有兩種主要的放射狀排列的突起，是主要的保護性抗原。血凝素HA是構(gòu)成病毒囊膜纖突的主要成分，屬于I型糖蛋白，以三聚體的形式存在。HA（Hemagglutinin，HA）在病毒吸附及穿膜過程中起關(guān)鍵作用，刺激機體產(chǎn)生的中和抗體可中和病毒的感染，從而可以阻止禽流感的發(fā)生，HA在感染過程中可被水解為兩條肽鏈HA1和HA2，是感染細胞的先決條件。神經(jīng)氨酸酶NA是構(gòu)成病毒囊膜纖突的另一個重要蛋白成分，呈蘑菇狀，屬于Ⅱ型糖蛋白，以四聚體形式存在。NA（Neuramidinase，NA）刺激機體產(chǎn)生的抗體雖然不能中和病毒的感染，但可使病毒的釋放量減少，進而使禽流感發(fā)生的嚴重程度大大降低。一個直徑為100 nm的球型病毒粒子約有500個纖突，HA占90%，NA占10%，這些表面糖蛋白抗原的特異性決定了病毒的亞型。目前已經(jīng)鑒定出的HA有H1～H16[7]，NA有N1～N9亞型，其不同 HA和NA亞型組合的流感病毒的致病性可以是顯著不同的。按照A型流感病毒對雞的致病性，可分為高致病性禽流感病毒（Highly pathogenic avian influenza viruses，HPAIV）和低致病性禽流感病毒（Low pathogenic avian influenza viruses，LPAIV），所有高致病性禽流感均是由H5或 H7亞型禽流感病毒引起的[8]。除了HA和NA外，囊膜內(nèi)表面結(jié)合有基質(zhì)蛋白M1，跨囊膜有基質(zhì)蛋白M2。囊膜下的核蛋白包裹著RNA分子，它們與RNA聚合酶PA，PB1和PB2一起共同組成的核搪核蛋白復(fù)合體，構(gòu)成病毒的螺旋狀核衣殼。

禽流感一年四季均可發(fā)生，但多暴發(fā)于晚秋和冬春寒冷季節(jié)。禽流感的感染途徑主要是呼吸道和消化道[9]。禽流感的傳染源較多，可來自感染或發(fā)病的家禽、野生鳥類、遷徙水禽及哺乳動物。水禽是禽流感病毒的易感宿主，可以自然感染所有亞型的流感病毒，并可經(jīng)糞便排毒污染水系，通過直接傳播或候鳥的南北遷徙將病毒進一步散播，感染其他禽類和哺乳動物，是流感病毒的基因儲存庫和新毒株的重要來源，在流感病毒生態(tài)學分布和演化中具有重要意義[10]。感染禽的蛋黃、蛋清和蛋殼上均可分離到病毒，蛋也是水平傳播媒介之一，還不能證實病毒可以通過蛋垂直傳給后代。在這近幾年時間里，H5N1亞型 AIV不僅屢次造成養(yǎng)禽業(yè)的巨大損失[11-15]，而且自2003年12月～2008年6月19日，阿塞拜疆、孟加拉國、柬埔寨、中國、吉布提、埃及、印尼、伊拉克、老撾、緬甸、尼日利亞、巴基斯坦、泰國、土耳其、越南共發(fā)生H5N1禽流感病例385人，死亡243人，病死率高達63%[16]。以至于世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）不斷發(fā)出警告，將流感大流行的警示級別提高到 3級。

1997年香港發(fā)生的AIV感染人事件，引起了世界的廣泛關(guān)注。人流感病毒 HA與人呼吸道上皮細胞存在的半乳糖α2-6結(jié)合唾液酸具有強親和性，而禽流感病毒HA則與存在于其靶細胞即腸上皮細胞存在的半乳糖α2-3結(jié)合唾液酸具有強親和性[17]。通常認為禽流感病毒必須通過中間宿主豬才能感染人，因為人體內(nèi)的流感病毒受體為α2-6唾液酸，禽體內(nèi)為α2-3唾液酸，而豬體內(nèi)同時具有這2種受體。當AIV感染豬后，在豬體內(nèi)進行復(fù)制，并且同人的流感病毒進行雜交，AIV的受體特異性也發(fā)生變化，或者AIV也可能在豬體復(fù)制，適應(yīng)一段時間后不需要同人流感病毒雜交，就可以在人體中有效的復(fù)制[18-20]。目前有2種假說被學術(shù)界廣泛認可，一種假說認為，AIV直接傳播給人，并在人體內(nèi)同人的流感病毒進行雜交，產(chǎn)生可在人體內(nèi)有效復(fù)制的病毒。而另外一種假說認為，禽流感病毒直接感染人，在人體內(nèi)適應(yīng)一段時間后，受體特異性發(fā)生改變后，符合人流感病毒的受體要求，進而在人體中大量復(fù)制[21、22]。無論以何種方式傳播，禽流感病毒能夠直接感染人已經(jīng)成為不爭的事實，對禽流感的防制不僅僅關(guān)系到我國養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，更關(guān)系到人民的身體健康，其公共衛(wèi)生意義己不容忽視。

禽流感是一種從呼吸系統(tǒng)到嚴重全身性敗血癥等多種癥狀的綜合疾病[23、24]。禽類在感染后，輕度的為上呼吸道癥狀，導致產(chǎn)蛋量和孵化率嚴重下降，急性的為全身性致死性疾病綜合癥。組織病變主要是腦、皮膚及內(nèi)臟組織壞死，消化道整個臟器出血及泌尿生殖道的炎癥[25]。對家養(yǎng)的火雞和雞引起的危害最為嚴重[26]。Acland等[27]1983年對美國流行的H5N2亞型 HPAIV進行雞與火雞的人工發(fā)病，發(fā)現(xiàn)大體剖檢病變主要有嚴重的肺充血、水腫，脾臟腫脹、出血，壞死性胰腺炎，心肌呈白色條索狀壞死，消化道出血等。Kobayashi等[28]的研究也得到類似的結(jié)果。Swayne[29]用14株鴨源、2株火雞源的AIV靜脈感染5周齡SPF雞。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，間質(zhì)性腎炎是最為常見的病變，其損傷能力與病毒的HA、NA密切相關(guān)。在腎中很容易查到AIV的病毒核蛋白抗原（NP）。Shinya[30]用A /whistling Swan/Shimane/499/83（H5N3）感染SPF雞，病毒對雞的損害主要為胰腺，其表現(xiàn)為炎癥和萎縮。1997年Van Capmen[31]曾報道，雞感染AIV A/turkey/ont/7732/66（H5N9）后引起嚴重淋巴細胞損傷。此外，病禽還表現(xiàn)精神不振，食欲較差，逐漸消瘦，產(chǎn)蛋量減少等，該型發(fā)病率高，但死亡率低。剖檢可見，病禽的鼻竇、氣管、氣囊呈現(xiàn)卡他性、纖維素性、漿液纖維素性或黏液膿性炎，并有干酪樣壞死物。有的病例肺臟呈現(xiàn)輕度的間質(zhì)性肺炎，病變部肺組織輕度實變，繼發(fā)細菌感染時可發(fā)展為支氣管性肺炎。卵泡變性變形，輸卵管黏膜水腫并產(chǎn)生滲出性炎，氣管及肺部組織中可見到明顯的淋巴細胞、巨噬細胞浸潤[32]。SPF雞感染H9N2亞型禽流感病毒致病性試驗結(jié)果表明：病毒對雞的損害主要為腦、脊髓、心肌及胰腺，其表現(xiàn)為充血、出血、變性、壞死[33]。2004年馬春全等[34]研究發(fā)現(xiàn)，患H5N1型高致病性禽流感的病鴨的組織器官中病變率最高的為腸道、胰腺、腦、心肌和肺。2006年Muromoto等[35]將反向遺傳重組技術(shù)獲得的一株H5N1HPAIV經(jīng)靜脈注射途徑感染雞，攻毒后12h時外周血以及脾臟中的單核細胞和巨噬細胞均為流感病毒抗原陽性細胞。由此可見，H5N1亞型HPAIV感染后可在短時間內(nèi)復(fù)制并分布到各個組織器官，形成系統(tǒng)性感染。

對于禽流感的防治主要是做好禽的消毒與隔離工作和免疫接種。禽流感病毒對外界理化因素的抵抗力較弱，選用對病毒敏感的消毒藥如醛類、氧化劑類、鹵素類、酸類復(fù)合型消毒劑進行消毒，并及時封鎖，隔離、無害化處理，以免病毒向外擴散蔓延。目前，常使用的禽流感疫苗有H5、H9亞型滅活油乳劑苗。H5亞型滅活油乳劑苗是針對高致病力禽流感毒株而研制的；H9亞型滅活油乳劑苗是針對低致病力禽流感毒株而研制的；我國也有使用雞痘-禽流感二聯(lián)苗，主要采用翅根刺種的方法。接種時要根據(jù)不同地區(qū)、不同禽種、不同疫情來選用不同亞型的疫苗。肉雞可在10～15日齡用滅活油乳劑苗接種免疫，在禽流感危害較大的地區(qū)要適當提前到5～10日齡接種免疫；蛋雞和種雞在整個生產(chǎn)期需進行4次或4次以上免疫，具體為10～15日齡首免，40～45日齡1免，開產(chǎn)前2免，以后每隔3～6個月加強免疫1次。肉鴨可在10～15日齡接種免疫；蛋鴨在10～15日齡首免，開產(chǎn)前1免，以后每隔3～6個月加強免疫1次。

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