青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院 祁 茹 肖 宇 林英庭* 程 明 汪文鑫
微生物制劑具有獨特的作用機理和無毒副作用、無殘留、無抗藥性、成本低、效果顯著等優(yōu)點,越來越受到世人的關(guān)注。目前,微生態(tài)制劑在養(yǎng)豬業(yè)和家禽中的應(yīng)用比較廣泛,飼用效果也得到肯定,而在奶牛生產(chǎn)中的應(yīng)用存在爭議,奶牛瘤胃內(nèi)含有龐大的微生物區(qū)系,是否需要添加外源微生物。一種觀點認(rèn)為,奶牛瘤胃內(nèi)環(huán)境生態(tài)平衡,微生物種類和數(shù)量充足,無需額外添加微生態(tài)制劑;另一種觀點認(rèn)為,盡管奶牛瘤胃具有龐大的微生物區(qū)系,但通過添加微生態(tài)制劑能夠優(yōu)化優(yōu)勢菌群,對瘤胃內(nèi)環(huán)境起到積極的作用。
1.1 根據(jù)微生態(tài)制劑的物質(zhì)組成劃分 (1)益生菌又稱促生素,是一種含有大量有益菌及其代謝產(chǎn)物和生長促進(jìn)因子的物質(zhì),具有維持腸道微生物平衡、提高機體健康水平的活菌制劑。益生素可以是單一菌種制劑,也可以是復(fù)合菌種制劑。(2)益生元是一種不被宿主消化的食物成分,它能選擇性地刺激腸道內(nèi)一種或多種有益菌的生長繁殖,抑制某些有害細(xì)菌生長,從而維持機體處于健康狀態(tài)。益生元通常是糖類,如乳果糖、果寡糖、葡萄糖、乳糖及大豆糖等。大量的研究結(jié)果認(rèn)為,4~15個碳原子的寡聚糖、肽類蛋白質(zhì)、類脂、水溶性維生素及環(huán)化淀粉都可作為益生元。(3)合生元又稱全生素,是指生理性細(xì)菌(即益生劑)加促進(jìn)物質(zhì)(即益生元)的合劑,其既可發(fā)揮益生菌的生理活性,又可選擇性地增加益生菌的數(shù)量。在合生元中,益生劑與益生元不是簡單的混合,添加的益生元必須能促進(jìn)制劑中生理性細(xì)菌的增殖,還可促進(jìn)腸道中生理性細(xì)菌的定植和增殖,當(dāng)然這種作用具有種的特異性,這樣的制劑才可以稱之為合生元制劑。
1.2 按微生物種類劃分 (1)乳酸菌類微生態(tài)制劑:此菌屬腸道中正常菌群,厭氧或兼性厭氧,不耐高溫,經(jīng)80℃處理5 min損失70%~80%,但較耐酸,在pH值為3.0~4.5時仍可生長,對胃中的酸性環(huán)境有一定耐受性。乳酸菌能分解飼料中的蛋白質(zhì)、糖類、合成維生素,對脂肪也有微弱的分解能力,能顯著提高飼料的消化率和生物學(xué)效價,促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。目前應(yīng)用的主要有嗜酸乳桿菌、糞鏈球菌、雙歧乳桿菌等(李宗波,2005)。(2)芽孢桿菌類微生態(tài)制劑:此菌屬在動物腸道微生物群落中僅零星存在。芽孢桿菌是好氧菌,可形成內(nèi)生孢子,具有較強的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性,對植物性碳水化合物具有較強的降解能力。芽孢桿菌進(jìn)入動物腸道后能迅速消耗腸道內(nèi)的氧,抑制致病菌的生長,維持腸道正常生態(tài)平衡。芽孢桿菌對干燥、高溫、高壓、氧化等不良環(huán)境的抵抗力很強,產(chǎn)品穩(wěn)定性高,在腸道發(fā)芽生長具有多種有效的酶促效應(yīng)。目前,應(yīng)用的菌種主要有短小芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌等。(3)酵母微生態(tài)制劑:零星存在于動物腸道微生物群落中。酵母菌屬于真菌類,需氧,不耐熱,菌體富含多種蛋白質(zhì)及維生素?;罱湍妇谖改c道內(nèi)繁殖,可改善胃腸道生態(tài)結(jié)構(gòu),維持pH值的穩(wěn)定,抑制腸道內(nèi)的有害菌。酵母菌細(xì)胞壁含有多種低聚糖,可提高動物對纖維素和礦物質(zhì)的消化、吸收和利用;增強動物機體免疫,提高抗病力,對防治畜禽消化系統(tǒng)疾病起著有益作用。目前,應(yīng)用的菌種主要有釀酒酵母和石油酵母等。(4)復(fù)合微生態(tài)制劑:由多種菌復(fù)合配制而成,能適應(yīng)多種條件和宿主,具有促進(jìn)生長、提高飼料轉(zhuǎn)化率等多種功能。
1.3 微生態(tài)制劑的用途和作用機制劃分 (1)微生態(tài)飼料添加劑:可直接提高飼料轉(zhuǎn)化率,促進(jìn)畜禽生長。(2)微生態(tài)藥物:可直接防治疾病從而間接提高飼料轉(zhuǎn)化率,促進(jìn)畜禽生長。
微生態(tài)制劑進(jìn)入畜禽腸道后,與其中正常菌群會合,顯現(xiàn)出共生、棲生、競爭和吞噬等復(fù)雜的作用機制。微生態(tài)制劑主要通過調(diào)控微生物區(qū)系、參與機體新陳代謝發(fā)揮作用,其作用機理并不十分明確,以下是目前比較認(rèn)可的幾種假說和理論。
2.1 微生物優(yōu)勢種群理論 健康動物機體腸道內(nèi)的微生態(tài)保持平衡,有益微生物占絕對優(yōu)勢,對整個種群起控制作用。一旦該優(yōu)勢種群受到破壞,失去這種優(yōu)勢,就會導(dǎo)致動物微生態(tài)失衡,致使動物發(fā)病。微生態(tài)制劑的使用可以補充或恢復(fù)優(yōu)勢種群,使失調(diào)的腸道微生態(tài)重新達(dá)到平衡,從而使動物健康得到恢復(fù)(程林春,2003)。
2.2 生物化學(xué)屏障 益生菌具有定植性、排他性及繁殖性,通過磷壁酸與腸黏膜上皮細(xì)胞相互作用而密切結(jié)合形成一道生物學(xué)屏障,阻止外源致病菌和條件致病菌與腸黏膜上皮接觸、黏附或定植,提高上皮細(xì)胞的防御能力。此外,其代謝產(chǎn)物如有機酸、細(xì)菌素、呲啶二羧酸等影響腸道細(xì)菌區(qū)系,形成一個化學(xué)屏障(董改香等,2010)。
2.3 免疫調(diào)節(jié)作用 微生態(tài)制劑可作為非特異免疫調(diào)節(jié)因子,通過細(xì)菌本身或細(xì)胞壁成分刺激宿主免疫應(yīng)答,誘導(dǎo)機體特異性免疫和非特異性免疫,有效提高機體免疫力和巨噬細(xì)胞的活性,激發(fā)機體體液免疫和細(xì)胞免疫,增強機體免疫力和抗病力。
2.4 營養(yǎng)作用 益生菌在動物消化道內(nèi)生長、繁殖和活動,能產(chǎn)生多種營養(yǎng)物質(zhì)如維生素、氨基酸、短鏈脂肪酸、促生長因子等,參與動物機體的新陳代謝。有的微生物在動物體內(nèi)生長繁殖時能合成核黃素、泛酸、葉酸、煙酸等B族維生素及維生素K2,參與機體某些重要的代謝反應(yīng)(劉艷等,2007)。微生態(tài)制劑中的多種微生物也能產(chǎn)生消化酶,如蛋白酶、淀粉酶、脂肪分解酶等水解酶類,從而促進(jìn)蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物等營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收,提高飼料利用率(夏昕等,2009)。
2.5 減少腸源性內(nèi)毒素吸收 內(nèi)毒素是細(xì)菌感染性疾病呈現(xiàn)病理反應(yīng)的主要因素。微生態(tài)調(diào)節(jié)劑通過補充正常有益的生理寄生菌,使病理性微生物群逆轉(zhuǎn)成生理性組合,使革蘭氏陰性(G-)桿菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素減少,從而減少或避免內(nèi)毒素產(chǎn)生的一系列病理反應(yīng)。益生菌也可以通過產(chǎn)生某些酶來修飾毒素受體,阻斷或減少毒素與腸黏膜受體的結(jié)合。飼喂微生態(tài)制劑可降低腸道、糞便及門靜脈血液中的氨量,產(chǎn)生中和大腸桿菌毒素的物質(zhì)和分解吲哚類和硫化氫的酶類,阻止腸道內(nèi)細(xì)菌產(chǎn)生胺及中和腸內(nèi)毒素等。
2.6 生物奪氧理論 微生態(tài)制劑中有益的耗氧微生物在生物體內(nèi)定植,消耗環(huán)境中的氧氣,可降低局部氧分子的濃度,有利于專性厭氧菌的定植和生長繁殖,而需氧與兼性厭氧菌下降,使腸道微生態(tài)平衡恢復(fù)正常,以達(dá)到治病的目的。有些微生態(tài)制劑含有蠟樣芽孢桿菌和枯草桿菌等需氧芽孢桿菌(周慶安等,2003),這些菌不是正常菌群的主要成員,在腸道不能長期定植,但能迅速消耗氧,使pH迅速降低,從而有利于雙歧桿菌與乳酸桿菌等有益微生物的生長。
2.7 抗應(yīng)激作用 給奶牛飼喂微生態(tài)制劑,可刺激奶牛瘤胃中微生物的生長、穩(wěn)定瘤胃pH、改變瘤胃發(fā)酵模式和終產(chǎn)物的產(chǎn)量、增加瘤胃后營養(yǎng)素的流量、提高養(yǎng)分的消化率、增強免疫反應(yīng)以緩解應(yīng)激。岳壽松等(2002)報道,微生態(tài)制劑能減少奶牛夏季產(chǎn)奶量的下滑,改善奶牛的泌乳性能,提高奶??篃釕?yīng)激能力。
3.1 提高產(chǎn)奶量 微生態(tài)制劑對產(chǎn)奶量的提高主要表現(xiàn)在其能促進(jìn)機體對氨和乳酸的利用,改善瘤胃pH環(huán)境,以刺激瘤胃微生物的生長和活性,增強有益菌的繁殖速度,從而調(diào)節(jié)瘤胃內(nèi)的微生態(tài)平衡;同時加快飼料蛋白質(zhì)的水解,提高乳脂率和奶比重,促進(jìn)鈣、鐵、鎂和瘤胃肽的吸收,增加菌體蛋白的產(chǎn)量,增強動物免疫力,提高飼料利用率,最終提高奶牛的產(chǎn)奶量(邱凌等,2011)。邵偉等(2010)研究“益康 XP”和“PM 發(fā)酵粉”兩種微生態(tài)制劑對中國荷斯坦良種母牛生產(chǎn)性能的影響,結(jié)果表明,與對照組相比,XP組與PM組顯著提高奶牛產(chǎn)奶量和乳脂率,降低乳體細(xì)胞數(shù) (P>0.05),對乳糖、乳非脂固形物含量和pH值無顯著影響(P>0.05),但均有提高奶牛乳品質(zhì)的趨勢。蔣小藝等(2008)報道,乳酸菌對奶牛生產(chǎn)性能有一定的影響,并且不同型號的乳酸菌制劑對奶牛的產(chǎn)奶量及乳成分影響不同。Stein等 (2006)報道,給奶牛飼喂米曲霉培養(yǎng)物,平均產(chǎn)奶量由34.8 kg/d提高到35.1 kg/d,乳蛋白含量由2.94%提高到2.96%,乳脂率顯著高于對照組(P<0.05)。
3.2 改善乳品質(zhì) 飼料中添加微生態(tài)制劑可以增加瘤胃中總厭氧菌的數(shù)量,主要是纖維消化菌和乳酸利用菌增加,在瘤胃發(fā)酵過程中,刺激瘤胃內(nèi)碳水化合物發(fā)酵,產(chǎn)生大量的揮發(fā)性脂肪酸和氨,其中乙酸含量最多。乙酸能提高奶牛的泌乳量,特別是能明顯提高乳脂率,同時氮的吸收利用率增加,加速了瘤胃微生物蛋白質(zhì)合成,進(jìn)而提高了乳蛋白率。鄧露芳(2009)報道,納豆芽孢桿菌具有促進(jìn)奶牛產(chǎn)奶量,提高飼料轉(zhuǎn)化效率,促進(jìn)牛奶中乳蛋白和乳糖產(chǎn)量,降低體細(xì)胞數(shù),改善牛奶品質(zhì)的作用。王振華(2008)在奶牛飼料中添加高產(chǎn)酶活枯草芽孢桿菌微生態(tài)制劑,提高了泌乳牛的產(chǎn)奶量,并且不同的添加劑量對泌乳量的提高數(shù)量不同。杜芳和張清(2007)報道,添加芽孢桿菌、乳酸菌復(fù)合菌制劑1%,乳蛋白率增加;乳中體細(xì)胞數(shù)的減少有明顯的效果,最高下降比率達(dá)41.3%。欒廣春(2008)用納豆芽孢桿菌飼喂泌乳期的奶牛,結(jié)果表明,納豆芽孢桿菌可提高牛奶中乳脂產(chǎn)量,并顯著提高牛奶中的乳蛋白率、乳蛋白產(chǎn)量、干物質(zhì)含量(P <0.05)。 周聯(lián)高等(2008)用1.38%酵母培養(yǎng)物替代奶牛日糧中等量精料,結(jié)果試驗組30 d后采食量、乳脂率、乳蛋白率、乳糖率和非脂固形物含量分別提高了2.90%、0.61%、0.66%、1.25%和 0.80%。 劉強等(2007)報道,試驗組精料中添加0.2%微生態(tài)制劑,乳脂率提高了9.68%,差異顯著(P<0.05)。左曉磊等(2004)報道,在奶牛精料中添加0.2%微生態(tài)制劑,試驗結(jié)束后,乳脂率、乳蛋白率、乳糖率和干物質(zhì)含量均顯著增加。
3.3 提高生長性能 日糧中添加微生態(tài)制劑能增強機體的抵抗力,調(diào)控的一些微生物在發(fā)酵或代謝過程中產(chǎn)生促生長素之類的生理活性物質(zhì)和各種酶類,提高動物的消化酶活性,有助于養(yǎng)分的消化吸收,促進(jìn)生長發(fā)育,從而提高動物生長性能。張海濤等(2009)研究日糧中添加納豆枯草芽孢桿菌對斷奶前犢牛生長性能的影響,結(jié)果表明,斷奶前犢牛日增重較對照組提高26.5%(P<0.01);開食料的日采食量下降11.9%;與對照組(57 d)相比,飼喂納豆枯草芽孢桿菌處理組(49.7 d)顯著提前了犢牛的斷奶日齡。犢牛飼喂納豆枯草芽孢桿菌可以縮短斷奶日齡,提高采食量,降低料重比。帥麗芳等(2002)報道,犢牛、羔羊開食料中添加酵母培養(yǎng)物,可提高生產(chǎn)性能和采食量。單達(dá)聰和王雅民(2008)報道,以酵母菌和枯草芽孢桿菌作為益生菌添加于飼料中,育肥前期日增重提高14.9%。
3.4 提高營養(yǎng)物質(zhì)消化率 研究表明,奶牛日糧中增加有益優(yōu)勢菌群的數(shù)量,能和有害菌競爭養(yǎng)分或吸附位點,并通過消耗氧氣、產(chǎn)生抑菌物質(zhì)等途徑抑制致病菌等有害微生物的增殖和生長;同時它們可以成為非特異性免疫因子,通過細(xì)菌本身或細(xì)胞壁成分刺激宿主細(xì)胞的體液免疫和細(xì)胞免疫水平,提高機體抵抗力;也可以為機體提供多種利于其生長發(fā)育的物質(zhì),產(chǎn)生有機酸,利用其酸化作用并刺激增強腸蠕動,從而增強機體對養(yǎng)分的消化吸收 (鐘日聰和徐春厚,2007)。王建國等(2009)研究微生態(tài)制劑對奶牛日糧營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響,結(jié)果表明,試驗組奶牛對CP、DM消化率極顯著高于對照組(P<0.01),對NDF消化率也有升高趨勢(P=0.051)。
3.5 增強機體抵抗力 微生態(tài)制劑通過生物拮抗和免疫作用使病原菌難以在動物腸道內(nèi)定植和繁殖,從而對機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生積極影響。微生態(tài)制劑除通過細(xì)菌本身或細(xì)胞壁成分刺激宿主免疫細(xì)胞,使其激活,促進(jìn)吞噬細(xì)胞活性,發(fā)揮非特異免疫調(diào)節(jié)因子作用外,還可增強T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞對抗原刺激的反應(yīng),提高機體的細(xì)胞免疫和體液免疫功能。朱曲波等(2004)在奶牛日糧中添加微生物活性制劑,試驗組混合奶樣中體細(xì)胞比對照組降低41.34%~89.59%(P<0.01)。
3.6 防治疾病 微生態(tài)制劑通過清除氧自由基、修復(fù)被損傷的乳腺細(xì)胞加強機體防御能力,從而起到防治疾病的作用。劉琪等(2004)采用一種活性生態(tài)菌進(jìn)行試驗,結(jié)果表明,微生態(tài)制劑對奶牛乳中體細(xì)胞數(shù)降低具有一定的作用,對奶牛隱性乳房炎具有一定的防治作用。EM也是常見的一種微生態(tài)制劑,由光合細(xì)菌、乳酸菌、醋酵母菌、放線菌等10個屬80多種微生物復(fù)合培養(yǎng)而成。黃慶飛等(2004)報道,用EM菌技術(shù)飼養(yǎng)奶牛能提高奶牛的泌乳能力,降低乳房炎和蹄病發(fā)生率,還能提高奶??篃釕?yīng)激能力,保證奶牛在炎熱環(huán)境中食欲不減,同時明顯改善場地衛(wèi)生。
3.7 調(diào)控消化道微生物 在飼料中添加適宜劑量、適宜菌種的微生態(tài)制劑會對瘤胃微生物的數(shù)量和種類產(chǎn)生影響。Edwards等(1991)報道,給飼喂高能量的育肥肉牛補飼酵母培養(yǎng)物能增加乳酸菌的濃度。Williams等(1991)報道,給飼喂大麥的奶牛補飼酵母培養(yǎng)物后,4 h時瘤胃pH值有所增加,表明酵母能促進(jìn)乳酸利用菌利用乳酸,從而使pH值提高。Dawson等(1990)在體外試驗中發(fā)現(xiàn),添加酵母菌制劑于奶牛日糧中,纖維素分解菌的數(shù)量比對照組提高了5~40倍。
3.8 應(yīng)用于青貯飼料 微生態(tài)制劑可調(diào)節(jié)青貯料內(nèi)微生物區(qū)系,調(diào)控青貯發(fā)酵過程,促進(jìn)乳酸菌大量繁殖,更快地產(chǎn)生乳酸,促進(jìn)多糖與粗纖維的轉(zhuǎn)化,提高干物質(zhì)回收率,從而有效提高青貯飼料的質(zhì)量。用于青貯飼料的益生菌主要是乳酸菌屬。青貯飼料通過乳酸菌發(fā)酵,使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)得以大量保存。侯新強等(2009)報道,青貯微生物添加劑能有效提高奶牛產(chǎn)奶量18.2%。齊安鑫等(2009)報道,當(dāng)瘤胃內(nèi)環(huán)境因粗飼料變化受到?jīng)_擊,導(dǎo)致pH值下降時,復(fù)合微生物制劑能起緩沖作用,使瘤胃原發(fā)酵模式向新模式緩慢過渡,促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的分解吸收,維持牛奶成分恒定。
4.1 菌種選擇 選擇微生態(tài)制劑時應(yīng)充分考慮其菌種類型和飼喂對象。因為動物消化道微生物具有多樣性和特異性,不同動物品種對菌種的要求不同,同一菌株用于不同動物,飼喂的效果差異也較大。微生態(tài)制劑的使用不僅要針對動物不同飼養(yǎng)環(huán)境、不同種類、不同生理狀態(tài),也要充分了解動物健康狀況、微生態(tài)生理結(jié)構(gòu)。
4.2 劑量與濃度 微生態(tài)制劑中必須含有相當(dāng)數(shù)量的活菌才能達(dá)到效果,我國正式批準(zhǔn)生產(chǎn)的微生態(tài)制劑中規(guī)定每克芽孢桿菌含量要多于5億個。實踐生產(chǎn)中考慮微生態(tài)制劑的有效活菌數(shù)至關(guān)重要。
4.3 添加方式 宜用低于40℃的溫開水送服,以免制劑中有效成分受破壞,同時有利于乳酸菌優(yōu)先黏附于腸壁。
4.4 應(yīng)用時間 微生態(tài)制劑要從仔畜開始使用,以保證有益菌優(yōu)先定植。因為制劑進(jìn)入機體后要有一定時間進(jìn)行微生物菌群調(diào)整,才能定植下來。
4.5 儲存 微生態(tài)制劑均為活菌制劑,由于大多數(shù)菌種在飼料加工、運輸中容易失活,應(yīng)用中要注意保存期限。其活菌數(shù)與儲存條件(如:環(huán)境中溫度、濕度、光照等)密切相關(guān),一般保存于陰涼避光處,儲存時間不宜過長,有效期一般為1年左右,隨著保存時間的延長,活菌數(shù)量不斷減少。厭氧菌類暴露在空氣中容易死亡,有的產(chǎn)品對其進(jìn)行了包被或真空包裝處理,應(yīng)在打開包裝后規(guī)定的時間內(nèi)用完。酵母類屬于兼性厭氧菌,可以保存較長時間。芽孢桿菌類有效期比其他類型長,可達(dá)2年左右。
4.6 配伍禁忌 細(xì)菌類的微生態(tài)制劑對抗生素敏感,不宜與抗生素同時使用,但酵母類屬于真核生物,生物學(xué)活性與細(xì)菌完全不同,對抗生素、磺胺類藥物和一些抗菌劑有天然抗性,可與抗生素同時使用?;罹苿┎灰伺c具收斂作用的制劑合用,如鞣酸、鉍劑、活性炭、氫氧化鋁及堿性藥物,以免其吸附或殺滅活菌。
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