中藥有效成分提取新技術(shù)研究進(jìn)展

孫健，吳紅軍，鄒原東

（1.北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院，北京市房山區(qū)長(zhǎng)陽(yáng)鎮(zhèn)102442；2.黑龍江省二九零農(nóng)場(chǎng)，156202）

中藥在我國(guó)有著悠久的歷史，是我國(guó)傳統(tǒng)文化的寶貴財(cái)富。中藥因其豐富的資源、獨(dú)特的療效、較低的毒副作用和低廉的價(jià)格，已經(jīng)引起世界各國(guó)的關(guān)注。但是中藥的化學(xué)成分比較復(fù)雜，其中既有有效成分又有無(wú)效成分，為了提高中藥的治療效果，建立中藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，就必須對(duì)中藥的有效化學(xué)成分進(jìn)行分離提取。傳統(tǒng)的提取方法主要是經(jīng)典的溶劑提取法，其次還有水蒸氣蒸餾法、升華法、壓榨法等[1]。但這些方法普遍具有周期長(zhǎng)、溶劑用量大、有效成分損失多、純度低、提取率不高等缺點(diǎn)。近年來(lái)一些新技術(shù)新方法在中藥的提取分離中的應(yīng)用，使其有效成分的收率和純度都大大提高。本文就近年來(lái)這些新技術(shù)在中藥有效成分的提取中的研究及應(yīng)用狀況作一綜述。

1 超臨界流體萃取技術(shù)

超臨界流體萃?。╯upercritical fluid extraction，SFE）技術(shù)是20世紀(jì)60年代興起的一種新型分離技術(shù)[1]。超臨界流體（supercritical fluid SCF）是指處于臨界溫度和臨界壓力以上的流體。由于其同時(shí)具有類似液體的高密度和類似氣體的低黏度，故既具有對(duì)溶質(zhì)溶解度大的特點(diǎn)，又具有氣體易于擴(kuò)散和運(yùn)動(dòng)的特性。利用此特點(diǎn)，可以用超臨界液體代替?zhèn)鹘y(tǒng)的有機(jī)溶劑對(duì)許多中藥的有效成分進(jìn)行萃取[2]。目前常用的SCF是CO2，超臨界CO2萃取法與傳統(tǒng)提取方法相比最大的優(yōu)點(diǎn)是可以在近常溫的條件下提取分離，幾乎保留產(chǎn)品中全部有效成分，無(wú)有機(jī)溶劑殘留，產(chǎn)品純度高，操作簡(jiǎn)單，節(jié)能等[3]。

王海波等用超臨界CO2萃取技術(shù)從蛇床子中萃取揮發(fā)性成分，壓力26kPa，溫度45℃，時(shí)間為30h，得率10%。經(jīng)分析鑒定出34個(gè)成分，其中十一烷、順香芹醇等17個(gè)成分為首次從該植物得到[4]。Lemberkovics等采用CO2-SFE技術(shù)研究了多種藥用植物中精油的分離，和傳統(tǒng)的水蒸氣蒸餾法比較，有的質(zhì)量比同級(jí)油高，萃取率也提高了[5]。葛發(fā)歡等應(yīng)用CO2-SFE技術(shù)對(duì)穿心蓮有效成分提取工藝進(jìn)行研究，所得萃取物有效成分富集，穩(wěn)定性好，指標(biāo)成分穿心蓮內(nèi)酯及脫水穿心蓮內(nèi)酯含量較高，該法流程短、省溶劑，適于工業(yè)生產(chǎn)[6]。鄧亦峰等利用超臨界CO2流體萃取技術(shù)對(duì)半邊旗中的二帖類活性成分進(jìn)行萃取和分離，與傳統(tǒng)溶劑萃取工藝相比較，收率能提高到97.2%[7]。

超臨界流體萃取技術(shù)雖具有提取率高，無(wú)污染，設(shè)備一旦建成，不僅產(chǎn)率高，而且操作方便。但超臨界流體萃取技術(shù)的設(shè)備屬高壓設(shè)備，價(jià)格昂貴維護(hù)費(fèi)用較高，產(chǎn)量雖大，但純度并不高，這給后續(xù)工作增加了一定難度。有關(guān)超臨界流體的基礎(chǔ)研究還比較薄弱，要進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)，還需要大量的基礎(chǔ)研究和化學(xué)工程方面的工作需要解決[8]。利用SFE提取和分離中草藥成分，已被國(guó)家中醫(yī)藥管理局作為“十五”新藥研究開(kāi)發(fā)技術(shù)項(xiàng)目，該技術(shù)將逐步普及規(guī)模生產(chǎn)[9]。

2 超聲波提取技術(shù)

超聲波提取技術(shù)是利用超聲波具有的機(jī)械效應(yīng)、空化效應(yīng)、熱效應(yīng)，通過(guò)增大介質(zhì)分子的運(yùn)動(dòng)速度，增強(qiáng)介質(zhì)的穿透力以提取中藥有效成分的方法[10]。與常規(guī)的提取方法相比具有耗時(shí)短、不需加熱、產(chǎn)率高、溶劑用量少、節(jié)約能源等優(yōu)點(diǎn)。

王延峰等用超聲進(jìn)行銀杏葉黃酮的提取，最高提取率為86.7%，比熱回流高。熱回流提取時(shí)間比超聲處理的時(shí)間大4-12倍，用超聲波法較熱回流法節(jié)約能源和節(jié)省成本[11]。歐少英等為優(yōu)化淫羊藿有效成分的超聲法提取工藝，以淫羊藿苷含量為指標(biāo)，對(duì)乙醇濃度、溶媒用量、提取時(shí)間、提取次數(shù)4個(gè)因素進(jìn)行了考察，結(jié)果表明最佳提取工藝條件為藥材用8倍量的80%乙醇，超聲提取2次，每次90min，效果最佳[12]。劉朝焱等采用超聲波提取條件進(jìn)行了研究，結(jié)果表明以總黃酮和金絲桃素類化合物為指標(biāo)，用65%～80%的乙醇水溶液超聲提取30min，提取效率較高；以貫葉金絲桃素為指標(biāo)，則以用75%-90%的甲醇提取30min效果較好[13]。

超聲提取技術(shù)可以避免高溫高壓對(duì)有效成分的破壞，但對(duì)容器壁的厚薄及放置位置要求較高，目前實(shí)驗(yàn)室規(guī)模比較小，要用于大規(guī)模生產(chǎn)，還有待解決工程設(shè)備放大的問(wèn)題[14]。

3 生物酶解提取技術(shù)

酶在中藥提取中的應(yīng)用，都是利用其高效率的催化作用來(lái)達(dá)到目的的，主要有以下兩個(gè)方面：一是作為浸提輔助劑，破壞植物細(xì)胞壁，提高提取效率；二是酶作為動(dòng)物提取過(guò)程中的激活劑。

邢秀芳等在葛根總黃酮的提取中考察了纖維素酶的作用，在葛根中加0.5%的纖維酶進(jìn)行提取，結(jié)果總黃酮的量比對(duì)照組相對(duì)升高13%[15]。劉佳佳等在金銀花乙醇回流前，用纖維素酶和果膠酶分別或聯(lián)合處理，探討酶的用量、處理時(shí)間、處理溫度及酶的聯(lián)合作用對(duì)金銀花提取物得率和綠原酸得率的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)纖維素酶處理能顯著提高金銀花提取得率和綠原酸得率，最適溫度為40℃～50℃。采用該工藝綠原酸得率最高可達(dá)8.32%[16]。

中藥用酶法提取時(shí)收率明顯提高，具有較大的應(yīng)用潛力。但酶法提取對(duì)實(shí)驗(yàn)條件要求較高，為使酶發(fā)揮最大作用，需先通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定最佳溫度、PH值及最佳提取時(shí)間等，還需要考慮酶的濃度、底物的濃度、抑制劑、激動(dòng)劑等對(duì)提取物的影響，以及酶對(duì)藥材中其它成分、藥效的毒性的影響[17]?？梢灶A(yù)見(jiàn)，隨著酶反應(yīng)技術(shù)在中藥中應(yīng)用的進(jìn)一步深化，必將為提高中藥提取率提供新的手段，為中藥制劑現(xiàn)代化注入新的內(nèi)容和活力。

4 半仿生提取技術(shù)

半仿生提取技術(shù)是張兆旺最早提出的。是將整體藥物研究法與分子藥物研究法相結(jié)合，從生物藥劑學(xué)的角度，模擬口服給藥及藥物經(jīng)胃腸道轉(zhuǎn)運(yùn)的原理，為經(jīng)消化道給藥的中藥制劑設(shè)計(jì)的一種新的提取工藝[18]。

孫秀梅等比較了四種提取方法所得芍甘止痛顆粒中芍藥苷、甘草次酸的含量，結(jié)果表明，其含量高低順序依次為半仿生提取法、半仿生提取醇沉法、水提取法、水提醇沉法[19]。沈紅等以鹽酸麻黃堿為化學(xué)成分指標(biāo)，采用半仿生提取法與4種常規(guī)的提取方法對(duì)麻黃進(jìn)行提取比較研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)麻黃堿的提取得率：半仿生法＞水煎煮法＞酸性乙醇回流提取法＞溫浸法＞水蒸氣蒸餾法[20]。

“半仿生提取法”體現(xiàn)了中醫(yī)臨床用藥的綜合作用特點(diǎn)，又符合口服藥物經(jīng)胃腸道轉(zhuǎn)運(yùn)吸收原理。同時(shí)不經(jīng)乙醇處理?？梢蕴崛『捅Ａ舾嗟挠行С煞?，縮短生產(chǎn)周期，降低成本[21]。但目前此方法仍沿襲高溫煎煮法，長(zhǎng)時(shí)間高溫煎煮會(huì)影響有效活性成分，因此有人建議引進(jìn)酶催化技術(shù)。

5 高速逆流色譜提取技術(shù)

高速逆流色譜（high-speed counter-current chromatography，HSCCC）是20世紀(jì)80年代初美國(guó)YiochiroIto博士發(fā)明的一種新的逆流色譜技術(shù)[22]。高速逆流色譜提取技術(shù)是一種不用任何固態(tài)載體或支撐體的液分配色譜技術(shù)，具有分離效率高、產(chǎn)品純度高、不存在載體對(duì)樣品的吸咐和污染、制備量大且溶劑消耗量少等特點(diǎn)尤其適用于制備性提取[23]。

王新宏等應(yīng)用HSCCC對(duì)苦參生物堿類成分的制備分離進(jìn)行了研究將苦參粗粉提物分離得到6個(gè)固態(tài)收集物，經(jīng)TLC4種不同展開(kāi)系統(tǒng)證實(shí)其中有一個(gè)為單一組分，實(shí)驗(yàn)表明，HSCCC法是一種高效、簡(jiǎn)便的分離制備中草藥有效成分純品的新方法[24]。袁黎明等還以茜草、虎杖及決明子3種傳統(tǒng)中藥材為原料，對(duì)其蒽醌類活性成分進(jìn)行制備性分離研究，結(jié)果表明，以氯仿一甲醇一水作為溶劑系統(tǒng)可以對(duì)含蒽醌類中草藥的乙醇粗提物進(jìn)行分離，可將其作為蒽醌類植物活性成分的通用溶劑系統(tǒng)，對(duì)該類物質(zhì)進(jìn)行初步分離[25]。Lu等從紫草中得到紫草寧。溶劑系統(tǒng)為正已烷一乙酸乙醋一乙醇一水[26]。

HSCCC自從問(wèn)世以來(lái)，在中藥的提取分離中發(fā)揮了不可比擬的優(yōu)勢(shì)，應(yīng)用前景十分廣闊。它的任何關(guān)鍵性的進(jìn)展都有可能對(duì)中藥有效成分的研究產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響。不可否認(rèn)，HSCCC也有其不足之處，如消耗溶劑多、檢測(cè)限較低、靈敏度較差等，但是隨著液相色譜技術(shù)的發(fā)展，相信HSCCC將會(huì)日臻完善。

6 小結(jié)

除上上述技術(shù)外，中藥提取新技術(shù)還有動(dòng)態(tài)循環(huán)逆流提取技術(shù)、微波輔助提取技術(shù)、超微粉碎技術(shù)等。所用的這些技術(shù)都在中藥有效成分的提取分離方面具有廣泛的應(yīng)用前景。但目前研究來(lái)看，這些技術(shù)多為實(shí)驗(yàn)室研究階段，如何應(yīng)用到中藥制劑的工業(yè)化生產(chǎn)當(dāng)中，需要解決的技術(shù)問(wèn)題還很多。這就需要科研單位和企業(yè)聯(lián)手，解決生產(chǎn)當(dāng)中遇到的問(wèn)題，以真正讓這些技術(shù)體現(xiàn)出社會(huì)價(jià)值經(jīng)濟(jì)價(jià)值，為提高中藥制劑的內(nèi)在質(zhì)量和臨床療效，為中藥現(xiàn)代化的發(fā)展提供平臺(tái)。

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