丹墨膠囊的薄層色譜鑒別

李瑞明 ，陳 孝 ，林生文 ， 隆 穎 ，曹 媛 ，吳敏江

1.中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院，廣東廣州 510080；2.廣東省藥品檢驗(yàn)所，廣東廣州 510180

丹墨膠囊由墨旱蓮、女貞子和丹參等藥材組成，具有滋陰補(bǔ)腎、活血祛瘀的功效，主要用于治療以腎虛為主的慢性腎炎，治療效果顯著[1]。為了更好地控制藥品質(zhì)量，保證產(chǎn)品療效，參照文獻(xiàn)[2-7]，筆者對(duì)處方中的主要藥材墨旱蓮、女貞子和丹參進(jìn)行了薄層色譜鑒別，結(jié)果重現(xiàn)性好，專屬性強(qiáng)，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 儀器與試藥

硅膠G薄層板（Merck板）；墨旱蓮對(duì)照藥材（批號(hào)：958-9302），女貞子對(duì)照藥材（批號(hào)：1041-9701），丹參對(duì)照藥材（批號(hào)：120923-200610）， 丹酚酸B對(duì)照品（批號(hào)：110562-200807）均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；供試品（批號(hào)：101001、101002、101003）由中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院提供；所用試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 墨旱蓮的薄層色譜鑒別

2.1.1 供試品溶液的制備 取本品10粒（5 g），研細(xì)，加70%甲醇25 ml，超聲處理30 min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状? ml使溶解，作為供試品溶液。

2.1.2 對(duì)照藥材溶液的制備 取墨旱蓮對(duì)照藥材0.1 g，同“2.1.1”項(xiàng)方法制成對(duì)照藥材溶液。

2.1.3 陰性對(duì)照溶液制備 按處方中藥味比例，同丹墨膠囊制造方法制成墨旱蓮陰性對(duì)照樣品，取相當(dāng)于供試品的量，再按“2.1.1”項(xiàng)方法制成墨旱蓮陰性對(duì)照溶液。

2.1.4 方法 照薄層色譜法試驗(yàn),吸取上述供試品溶液10 μl、對(duì)照品溶液1 μl，陰性對(duì)照溶液10 μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯（10∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)（圖1，見封三）。

2.2 女貞子的薄層色譜鑒別

2.2.1 供試品溶液的制備 取本品10粒（5 g），研細(xì)，加乙醚30 ml，加熱回流1 h，放冷，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)右掖? ml使溶解，作為供試品溶液。

2.2.2 對(duì)照藥材溶液的制備 取女貞子對(duì)照藥材0.5 g，同“2.2.1”項(xiàng)方法制成對(duì)照藥材溶液。

2.2.3 陰性對(duì)照溶液制備 按處方中藥味比例，同丹墨膠囊制造方法制成女貞子陰性對(duì)照樣品，取相當(dāng)于供試品的量，再按“2.2.1”項(xiàng)方法制成女貞子陰性對(duì)照溶液。

2.2.4 方法 照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液20 μl、對(duì)照藥材溶液5 μl、陰性對(duì)照溶液20 μl分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以三氯甲烷-甲醇（40∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置日光下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)（圖2，見封三）。

2.3 丹參的薄層色譜鑒別

2.3.1 供試品溶液的制備 取本品5粒（2.5 g），研細(xì)，加70%甲醇30 ml，加熱回流1 h，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状? ml使溶解，作為供試品溶液。

2.3.2 對(duì)照藥材溶液的制備 取丹參對(duì)照藥材0.5 g，同“2.3.1”項(xiàng)方法制成對(duì)照藥材溶液。

2.3.3 對(duì)照品溶液 取丹酚酸B對(duì)照品，加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.3.4 陰性對(duì)照溶液制備 按處方中藥味比例，按丹墨膠囊制造方法制成丹參陰性對(duì)照樣品，取相當(dāng)于供試品的量，再按“2.3.1”項(xiàng)方法制成丹參陰性對(duì)照溶液。

2.3.5 方法 照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取供試品溶液1 μl、對(duì)照藥材溶液 1 μl、陰性對(duì)照溶液 1 μl、對(duì)照品溶液 2 μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（2∶3∶4∶1∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（254 nm）或紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)（圖3，見封三）。

3 討論

墨旱蓮、女貞子和丹參為丹墨膠囊中的主要成分，在成品中對(duì)其進(jìn)行鑒別可控制藥品質(zhì)量。丹墨膠囊中墨旱蓮藥材鑒別時(shí)，以墨旱蓮對(duì)照藥材為對(duì)照，以正己烷-乙酸乙酯（10∶1）為展開劑，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；丹墨膠囊中女貞子藥材鑒別時(shí)，以女貞子對(duì)照藥材為對(duì)照，齊墩果酸對(duì)照品確認(rèn)對(duì)應(yīng)斑點(diǎn)，以三氯甲烷-甲醇（40∶1）為展開劑，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，但齊墩果酸對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上樣品斑點(diǎn)太弱，故未將齊墩果酸對(duì)照品納入標(biāo)準(zhǔn)中，而直接采用女貞子對(duì)照藥材鑒別；丹墨膠囊中丹參藥材鑒別時(shí)，以丹參對(duì)照藥材為對(duì)照，丹酚酸B對(duì)照品確認(rèn)對(duì)應(yīng)斑點(diǎn)，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（2∶3∶4∶1∶1）為展開劑，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜及對(duì)照品斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。三種藥材鑒別結(jié)果色譜斑點(diǎn)清晰，分離理想，重復(fù)性好，且陰性對(duì)照無(wú)干擾。在4℃、18℃、25℃三種溫度和32%、68%、72%三種相對(duì)濕度下進(jìn)行溫度及濕度影響因素考查，結(jié)果顯示溫度和濕度的變化對(duì)于墨旱蓮、丹參和女貞子的薄層色譜分析無(wú)影響，在不同的溫度和濕度下均取得了較好的分離效果。綜合分析，本試驗(yàn)方法靈敏，專屬性強(qiáng)，結(jié)果準(zhǔn)確，操作簡(jiǎn)便，可作為丹墨膠囊的質(zhì)量控制方法。

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