5-HTTVNTR與自殺未遂精神病核心家系的相關性研究*

甘 窈,高新學,艾 明,陳建梅,黎雪梅,況 利△

(1.重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院心理衛(wèi)生中心 400016;2.山東省濟寧市精神病防治院精神六科 272051）

自殺是一種因社會心理沖突而產(chǎn)生的蓄意終止自己生命,有目的、有計劃的自我毀滅行為。自殺未遂定義為主動結束自己生命,未造成死亡的結局,包括決心自殺但未死亡和自殺意圖不強而蓄意自傷[1]。以往研究表明,5-羥色胺轉運體(5-hyd roxytryp tamine transporter,5-H TT)基因可能影響自殺未遂者體內(nèi)的5-羥色胺(5-hyd roxytryp tam ine,5-H T)的傳遞[2]。目前,罹患精神病已被證明是自殺行為的危險因素[3]。關于精神病自殺未遂核心家系的5-HTT基因研究在國內(nèi)尚少,因此,本課題對5-H TT基因第二內(nèi)含子多態(tài)性(serotonin transporter gene 2 VNTR po lymorphism,5-HTTVNTR)與有精神病的自殺未遂核心家系的相關性進行研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對象來自2007年1月至2008年3月重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院心理衛(wèi)生中心住院部、急診科就診的漢族自殺未遂者及其生物學父母。自殺未遂者納入標準:(1)中國漢族人群;(2)年齡不小于15歲;(3)患有精神疾病(包括精神分裂癥、情感性精神病以及其他精神疾病),并采用DSMIV-TR軸I障礙用臨床定式檢查(structured clinical interview for DSM-IV-TR axis I disorders-patient,SCID-I/P)[4]進行評估及診斷。排除標準:排除蓄意自傷類自殺者。本研究共收集86個核心家系共258人(其中有精神病自殺未遂的核心家系57個)。將所有核心家系成員分成兩組:患者組86例,其中男38例,女48例;年齡16～45歲,平均(32.6±11.8)歲;父母組172例,父、母各 86例。

1.2 測評工具 測評工具為自編家系調查表、分子遺傳學研究家庭問卷(family interview for genetic studies,FIGS)以及肖水源自殺意念調查表[5]。

1.3 研究方法

1.3.1 基因組DNA的制備 采集肘靜脈血5 m L,采用常規(guī)酚-氯仿法抽提全血標本基因組DNA。

1.3.2 引物 5-H TTVN TR多態(tài)性位點引物參考文獻[6]。上游引物:5'-GTC GTT GCC GCT CTG AAT GC-3',下游引物 :5'-GAG GGA CTG AGC TGG ACA ACC AC-3',由上海生物工程技術有限公司合成。聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)擴增試劑盒亦由上海生物工程技術有限公司提供。

1.3.3 PCR反應 PCR反應體系為PCR反應液共50μL,含50～100 ng基因組 DNA、10 pmoL引物、1U TaTaRa Ex Taq酶、10×Ex Taq緩沖液(不含 Mg2+)、2.5 mmol/L dNTPs及1.5 mmol/L MgCl2,用雙蒸水補充至50μL。PCR反應條件為95℃預變性4 m in,94℃變性60 s,61℃退火60 s,72℃延伸1 m in,再72℃延伸10 m in,共35個循環(huán)。將 PCR產(chǎn)物置于2%瓊脂糖凝膠中電泳分離,以溴乙錠染色法檢視各區(qū)帶,與相對分子質量標準物比較各片段的大小。

1.4 統(tǒng)計學處理 一般資料應用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行分析。遺傳學資料采用Spielman RS編寫的傳遞不平衡檢驗(transmission disequilibrium test,TDT)原理,運用 Genehunter 2.1軟件進行分析。用Hardy-W einberg平衡檢驗分析基因型頻率和基因頻率。計數(shù)資料用χ2檢驗,以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 H ardy-Weinberg平衡的吻合度檢驗 5-H TTVNTR多態(tài)性位點:父母組與患者組基因型頻率和等位基因頻率的總體分布比較差異均無統(tǒng)計學意義(χ2=0.939,P=0.33;χ2=4.892,P=0.087),見表 1。

表1 患者組及父母組5-H TTVNTR基因型及等位基因頻率的分布[n(%)]

2.2 自殺未遂精神病患者5-H TT基因的2個多態(tài)性位點TDT分析 在57個有精神病自殺未遂核心家系中有71個雜合子父母納入5-H TTVNTR多態(tài)性位點的分析,其中,有29個10等位基因和42個12等位基因傳給了患病子女(χ2=2.38,P＞0.05)。提示5-H TTVNTR多態(tài)性位點與有精神病自殺未遂者不存在連鎖不平衡。

表2 自殺未遂精神病患者5-HTTVNTR各位點的 TDT分析(個)

3 討 論

5-HTT基因第二內(nèi)含子區(qū)存在17 bp可變數(shù)目串聯(lián)重復多態(tài)性(即5-H TTVNTR)。目前,5-H TTVN TR與精神病及自殺行為的家族遺傳研究甚少,且關聯(lián)性尚不確切。本研究通過PCR技術在5-H TTVN TR位點擴增出兩個等位基因10 repeat(簡稱10)與12 repeat(簡稱12)組成3種基因型10/10、10/12及12/12,267 bp片段為10 repeat,301 bp為12 repeat。研究表明5-H TTVNTR位點與自殺未遂精神病患者間不存在連鎖不平衡。

國內(nèi)外對精神病患者的研究表明5-H TTVNTR基因與精神病自殺行為無關[7-12]。Yen等[13]比較了中國臺灣160例抑郁癥患者及169名正常人,結果也提示5-H TTVNTR與自殺行為無明顯關聯(lián)。Kohlrausch等[14]研究藥物對精神分裂癥患者5-H TTVNTR的影響時,也未得到相關性的結果。上述研究與本研究結果一致。盡管5-H TT與某些精神病間存在關聯(lián),精神病本身是多基因的遺傳疾病,但其中5-H TTVNTR可能與精神疾病并沒有關系。此外,有研究報道顯示自殺性家族史是自殺行為的明顯特征[15]。有研究對有或無自殺行為的精神障礙患者進行比較,發(fā)現(xiàn)其中自殺未遂患者的親屬中有自殺行為現(xiàn)象比較普遍,自殺行為的風險與遺傳因素及家族傾向有關[16]。高樹貴等[17]對5-H TTVN TR基因型與情感性精神障礙的家系研究也說明二者之間不存在連鎖不平衡。因此,目前為數(shù)不多的家系研究提示,5-H TTVN TR與自殺行為的家族遺傳性不一定相關。

由于本研究以家族作為對象,樣本收集相對困難,且主要研究其傳遞是否存在不平衡,故在自殺未遂精神病患者中沒有細分患有何種精神疾病。因此,5-H TTVNTR與有精神病的自殺未遂核心家系的相關性還有待進一步更深入細致的研究與分析。

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