不同炮制方法對菟絲子中多糖含量的影響

肖 嵐，楊梓懿*，陳 曦

（湖南中醫(yī)藥大學藥學院，湖南 長沙 410208）

不同炮制方法對菟絲子中多糖含量的影響

肖 嵐，楊梓懿*，陳 曦

（湖南中醫(yī)藥大學藥學院，湖南 長沙 410208）

目的 考察不同炮制方法對菟絲子中多糖含量的影響。方法 采用硫酸-苯酚比色法測定菟絲子不同炮制品的多糖含量。結果 菟絲子不同炮制品多糖含量有差異，生菟絲子多糖含量為5.34%，經酒炙后是其生品的1.98倍，是清炒品的1.62倍。結論 菟絲子經炮制后能顯著提高多糖的含量。

菟絲子；炮制方法；多糖；苯酚-硫酸法

菟絲子為旋花科植物菟絲子Cuscuta chinensis Lam.的干燥成熟種子，具有補益肝腎、固精縮尿、安胎、明目、止瀉；外用消風祛斑等功效[1]。歷代菟絲子炮制方法多樣，常用的有清炒、鹽制、酒制、制餅等[2]。

多糖是菟絲子補益作用重要的物質基礎，具有調節(jié)免疫、改善內分泌、抗衰老等多種活性[3-4]。近年來，國內對不同菟絲子炮制品有效成分的含量研究多集中在黃酮類成分[5-6]，而對多糖類成分的研究報道較少。本文以多糖含量為考察指標，對菟絲子不同炮制方法進行比較研究，現將結果報告如下。

1 儀器與試藥

Item AR1140分析天平和Item AR5120電子天平 （Ohaus Corp.Pine Brook.NJ.USA）；UV-1600 紫外-可見分光光度計（鄭州長城科工貿有限公司）；RE-5299旋轉蒸發(fā)器 (鞏義市予華儀器有限責任公司)；DK-S22電熱恒溫水浴鍋 (上海精密實驗設備有限公司)；FZ102微型植物粉碎機(天津市泰斯特儀器有限公司)；電子萬用爐(天津市泰斯特儀器有限公司)；SHZ-D(Ⅲ)循環(huán)水式真空泵(鞏義市予華儀器有限責任公司)。

葡萄糖對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號100080—200606)；黃酒(湖南湘窖酒業(yè)有限公司，批號：XK16-0300934)；加碘精制鹽(市售)；試劑均為分析純。菟絲子（湖南海川醫(yī)藥有限公司）經湖南中醫(yī)藥大學鑒定教研室周日寶教授鑒定為旋花科植物菟絲子Cuscuta chinensis Lam.的干燥成熟種子。

6%苯酚溶液：苯酚100 g，加鋁片0.1 g和碳酸氫鈉0.105 g，蒸餾，收集182℃餾分。取次餾分6 mL，加95 mL水，置棕色瓶中，即得。

2 方法與結果

2.1 菟絲子炮制品的制備

2.1.1 生菟絲子 取原藥材，除去雜質，淘洗干凈，干燥，密閉保存，備用。

2.1.2 清炒菟絲子 取凈菟絲子，置炒制容器內，用文火加熱，炒至微黃色，有爆裂聲，取出放涼，密閉備用。

2.1.3 鹽制菟絲子 取凈菟絲子，加鹽水拌勻，悶潤，待鹽水被吸盡后，置炒制容器內，用文火加熱，炒至略鼓起，微有爆裂聲，并有香氣溢出時，取出放涼，密閉備用。每100 g菟絲子用食鹽2 g。

2.1.4 酒菟絲子餅 取凈菟絲子，加適量水煮至開裂，不斷攪拌，待水被吸盡后，全部呈黏絲稠粥狀時，加入黃酒和白面拌勻，取出，壓成餅，切成小方塊，干燥，密閉備用。每100 g菟絲子加黃酒15 g，白面粉15 g。

2.2 供試品溶液制備

稱取上述菟絲子不同炮制品適量，用粉碎機粉碎，精密稱定不同炮制品粉末各5 g，分別加10倍量80%乙醇回流2 h，趁熱濾過，棄去濾液。藥渣加10倍量水于80℃水浴中回流提取2次，每次2 h，趁熱過濾，合并2次提取的濾液，減壓濃縮至約20 mL，加4倍量無水乙醇沉淀，離心（4 000 r/min，10 min），沉淀物以無水乙醇、丙酮依次洗滌3次,每次5 mL，合并濾液，得到粗制的菟絲子總多糖組分，于60℃烘干稱重。加水配制濃度為10 mg/mL的供試品溶液，備用。

2.3 對照品溶液制備

精密稱取105℃干燥至恒質量的無水葡萄糖20.0 mg，加水溶解，并定容于100 mL容量瓶，搖勻，即得濃度為0.200 mg/mL的葡萄糖對照品溶液。

2.4 方法學考察

2.4.1 波長選擇 精密吸取對照品溶液、供試品溶液、水各2 mL置10 mL具塞試管，分別加入6%苯酚溶液1 mL，再垂直快速加入濃硫酸5 mL，振搖。100℃水浴20 min，然后放入冰水中冷卻至室溫。在400～800 nm進行全波長掃描，結果表明，對照品溶液和供試品溶液均在490 nm處有最大吸收，且二者光譜形狀相似，因此確定檢測波長為490 nm。

2.4.2 標準曲線的繪制 精密吸取對照品溶液1、2、3、4、5、6 mL，分別置于 10 mL 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。分別吸取上述不同濃度的對照品溶液，以試劑做空白，在490 nm處測定吸光度。以葡萄糖濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線，回歸方程為：

結果表明葡萄糖濃度在20～120μg/mL范圍內線性關系良好。

2.4.3 穩(wěn)定性試驗 吸取同一菟絲子供試品 (鹽炙品) 溶液 2 mL，在 490 nm 處，分別在 0、10、20、30、60、90、120 min 測定吸光度，結果 RSD=2.12%，可見樣品溶液在2 h內穩(wěn)定，表明在本實驗條件下顯色穩(wěn)定性較好。

2.4.4 精密度試驗 取同一菟絲子供試品 (鹽炙品)溶液，在490 nm處連續(xù)6次測定吸光度，結果RSD=0.24%，說明該儀器精密度良好。

2.4.5 重現性試驗 取同一菟絲子供試品 (鹽炙品)6份，按“2.2”項下方法操作，制備供試品溶液6份，每份2 mL，在490 nm處測定吸光度，計算多糖含量，平均含量為7.99%，RSD=1.4%，可見本方法重復性良好。

2.4.6 加樣回收率試驗 稱取同一菟絲子供試品(鹽炙品)粉末 0.25 g 6 份，精密稱定，按“2.2”項下方法操作，制備成供試品溶液，每份吸取2 mL，分別加入葡萄糖對照品適量，在490 nm處測定吸光度，計算回收率。結果見表1。

表1 加樣回收率實驗結果

2.4.7 稱取各炮制品約0.25 g，按“2.2”項下方法操作制成供試品溶液，于490 nm 處測定吸光度，實驗結果見表2。

表2 菟絲子不同炮制品中多糖含量測定結果（，n=3）

表2 菟絲子不同炮制品中多糖含量測定結果（，n=3）

炮制品名生品清炒品鹽炙品酒制餅品多糖含量（%）5.34±0.06 6.53±0.04 7.96±0.07 10.58±0.09

3 討論

苯酚-硫酸比色法測定多糖含量，操作簡單且穩(wěn)定性良好。從表2中可以看出生菟絲子多糖含量為5.34%，經酒制后多糖含量為生品的1.98倍，是清炒品的1.62倍。其含量高低依次為酒制餅品＞鹽制品＞清炒品＞生品。

菟絲子多糖可以清除氧自由基及抗脂質過氧化，具有抗衰老和補陽作用。歷代菟絲子炮制方法多樣，不同的炮制方法對多糖溶出含量有影響。菟絲子經炮制后易于粉碎，有效成分在提取過程中相對生品易于溶出。在用酒或鹽作為輔料浸悶藥物的過程中，輔料滲透到藥物內部可能對菟絲子中所含的親脂或親水性成分有助溶作用，能提高菟絲子所含有效成分的溶出率，但酒制品多糖含量高于鹽制品還有待進一步研究。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典,[S]北京:中國醫(yī)藥科技出版社.2010:290-291.

[2]丁安偉.菟絲子炮制歷史沿革,中藥炮制學[M]北京:高等教育出版社.2007年12月:264-265.

[3]馬鵬生，朱溶月.菟絲子多糖藥理作用的實驗研究[J],內蒙古中醫(yī)藥,2009,28(15):66-67.

[4]張麗娟,張宜欣.菟絲子多糖提取工藝優(yōu)化及其對脂質過氧化的影響[J],時珍國醫(yī)國藥，2008,19(3）:691-692.

[5]郭澄,王雅君,張劍萍.菟絲子的化學成分和藥理活性研究[J],時珍國醫(yī)國藥,2005,16(10):1 035-1 036.

[6]李繼紅.HPLC法測定菟絲子炮制前后化學成分含量[J],中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志,2009,10(5):37-38.

（本文編輯 楊 瑛）

Effects of different processes on polysaccharide content in Cuscuta chinens

XIAO Lan,YANG Zi-yi,CHEN Xi
(College of Pharmacy,TCM University of Hunan,Changsha,Hunan 410208,China)

Objective To investigate the effects of different processing methods on the polysaccharide content of Cuscuta chinens.Methods The phenol-sulfuric acid method was used to detect the dodder content in different processed products of the polysaccharide.Results Cuscuta chinens polysaccharide in different processed products were different and Cuscuta chinens polysaccharide content of 5.43%in raw Cuscuta chinens,the polysaccharide content by wine was 1.98 times and salt-broiled product was 1.62 times.Conclusion Cuscuta chinens,after processing,can enhance remarkably polysaccharide content.

China dodder;processing methods;polysaccharide;sulfuric acid-phenol method

R283.1

A

10.3969/j.issn.1674－070X.2011.05.014.044.02

2011－01－07

肖 嵐（1983-），女，湖南長沙人，在讀碩士，主要從事中藥炮制理論及飲片質量控制研究。

〔通迅作者〕* 楊梓懿（1954-），男，教授，E-mail:23938867@qq.com。