反相高效液相色譜法測定奧沙普嗪分散片中奧沙普嗪含量

吳飛躍，劉 健

(1.浙江省舟山醫(yī)院，浙江 舟山 316000; 2.浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院，浙江 杭州 310003)

反相高效液相色譜法測定奧沙普嗪分散片中奧沙普嗪含量

吳飛躍1，劉 健2

(1.浙江省舟山醫(yī)院，浙江 舟山 316000; 2.浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院，浙江 杭州 310003)

目的建立測定奧沙普嗪分散片中奧沙普嗪含量的高效液相色譜法。方法采用反相高效液相色譜法，以Hypersil C18柱(200 mm×4.6 mm，5μm)為色譜柱，以0.01mol/L磷酸二氫鉀溶液(磷酸調(diào)pH至2.5)－乙腈 (40∶60)為流動相，檢測波長為286nm，流速為1.0mL/min，柱溫30℃。結(jié)果奧沙普嗪質(zhì)量濃度在4.0～24.0 μg/mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好，高中低3種質(zhì)量濃度的回收率為97.6% ～101.3%，RSD為1.1% ～1.8%。結(jié)論所建立的方法快速、準(zhǔn)確、簡便，適用于奧沙普嗪分散片的質(zhì)量控制。

奧沙普嗪;高效液相色譜法;含量測定

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀(日本島津)，包括LC－10ATvp泵，SPD－10Avp型紫外檢測器;BP 221S電子分析天平(德國賽多利斯);KQ－250B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。奧沙普嗪化學(xué)對照品(含量為99.9%，天津金世制藥有限公司);奧沙普嗪分散片(沈陽富東制藥有限公司，規(guī)格為0.2 g/片);乙腈為色譜純(美國Fisher公司)，水為重蒸餾水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱:Hypersil C18柱(200 mm ×4.6 mm，5 μm，大連依利特);流動相:0.01 mol/L磷酸二氫鉀溶液(磷酸調(diào)pH至2.5)－乙腈(40 ∶60);檢測波長:286 nm;流速:1.0 mL/min;柱溫:30 ℃;進(jìn)樣量:20 μL。理論板數(shù)按奧沙普嗪峰計(jì)算應(yīng)不低于2 000。

2.2 測定方法

取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于奧沙普嗪60 mg)，置100 mL量瓶中，加流動相適量，超聲處理30 min，放冷，加流動相定容，搖勻，濾過，取續(xù)濾液1 mL，置50 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，作為供試品溶液，精密量取20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取奧沙普嗪對照品適量，精密稱定，加流動相溶解，制成每1 mL含奧沙普嗪12 μg的溶液，作為對照品溶液，同法測定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

2.3 方法學(xué)考察

專屬性考察:照2.2項(xiàng)下方法操作，供試品溶液、對照品溶液和空白輔料溶液的色譜圖見圖1?？梢?，流動相、輔料在奧沙普嗪峰處無干擾，奧沙普嗪峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度符合要求。

圖1 高效液相色譜圖

線性關(guān)系考察:取奧沙普嗪對照品適量，精密稱定，用流動相制成質(zhì)量濃度為 4.0，8.0，12.0，16.0，24.0 μg/mL 的系列溶液，照2.2項(xiàng)下方法測定，記錄色譜圖。以峰面積(Y)對質(zhì)量濃度(X)進(jìn)行線性回歸，回歸方程為 Y=25 837 X －426.1，r=0.999 9(n=5)。結(jié)果表明，奧沙普嗪質(zhì)量濃度在4.0～24.0 μg/mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

精密度試驗(yàn):取奧沙普嗪對照品適量，精密稱定，用流動相制成含奧沙普嗪 8.0，12.0，16.0 μg/mL 的溶液，分別精密吸取 20 μL 注入液相色譜儀，重復(fù)進(jìn)樣5次。結(jié)果低、中、高質(zhì)量濃度溶液峰面積的 RSD 分別為 1.11% ，1.64% ，0.98%(n=5)，表明儀器精密度(進(jìn)樣與峰面積檢測精密度)良好。

重復(fù)性試驗(yàn):取同一樣品，照2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液6份，按外標(biāo)法測定。結(jié)果奧沙普嗪的平均標(biāo)示百分含量為99.17%，RSD為0.31%(n=6)，表明方法重現(xiàn)性良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn):照2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，在室溫下于不同時(shí)間(1，2，3，4，6，8 h)分別進(jìn)樣 20 μL。結(jié)果峰面積的 RSD=1.98%(n=6)，表明供試品溶液在室溫下8 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

回收率試驗(yàn):于空白輔料中，按處方量加入奧沙普嗪對照品適量，照2.2項(xiàng)下供試品溶液制備方法制備低、中、高3種質(zhì)量濃度的溶液各3份，按外標(biāo)法分別測定并計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。

2.4 樣品含量測定

取3批樣品，照2.2項(xiàng)下方法測定。結(jié)果3批樣品中奧沙普嗪的標(biāo)示百分含量分別為 99.4% ，100.5%，100.1% 。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

目前2010年版《中國藥典(二部)》收錄了奧沙普嗪、奧沙普嗪腸溶膠囊，均采用紫外分光光度法測定奧沙普嗪的含量。高金波等[2]采用比色法測定了奧沙普嗪的含量。由于奧沙普嗪在合成中易帶入一些有機(jī)雜質(zhì)，可能對紫外法測定結(jié)果有影響。本試驗(yàn)采用了反相高效液相色譜法，比紫外分光光度法更準(zhǔn)確、專屬性更強(qiáng)。3批樣品含奧沙普嗪均在標(biāo)示量的99.4% ～100.5%范圍內(nèi)，供試品溶液主峰的保留時(shí)間與對照品溶液主峰的保留時(shí)間一致，而空白輔料溶液無此吸收峰，說明該法適合用于奧沙普嗪分散片的質(zhì)量控制。

[1]李楊華.奧沙普嗪治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎53例[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2002，21(11):727.

[2]高金波，李國清，張楠楠，等.用比色法測定奧沙普嗪的含量[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2002，25(6):28 －29.

Determination of Oxaprozin Content in Oxaprozin Dispersible Tablets by RP－HPLC

Wu Feiyue1，Liu Jian2
(1.Zhoushan Hospital，Zhoushan，Zhejiang，China 316000; 2.The first affiliated hospital of Zhejiang Uviversity， Hangzhou，Zhejiang，China 310003)

ObjectiveTo establish a RP － HPLC method for the determination of Oxaprozin content in Oxaprozin Dispersible Tablets.Methods The RP －HPLC method was adopted on the Hypersil C18column(200 mm ×4.6 mm，5 μm)with UV detection wavelength at 286 nm，and the mobile phase consisted of acetonitrile－0.01 mol/L potassium dihydrogen phosphate solution adjusted to pH=2.5 with phosphoric acid(60 ∶40).The flow rate was 1.0 mL/min.The column temperature was 30 ℃.Results The calibration curve was linear within the range of 4.0 －24.0 μg/mL for oxaprozin，the average recovery rate was 97.6% －101.3% for three different concentrations of oxaprozin， RSD was 1.1% －1.8%.Conclusion This method is rapid，simple and accurate，which is suitable for the quality control of Oxaprozin Dispersible Tablets.

oxaprozin;HPLC;content determination

R927.2;R971+.1

A

1006－4931(2011)10－0037－02

2010－12－13)