甘草酸二銨腸溶膠囊的制備與質(zhì)量控制

吳云珍，宋旭瑩，陸紀(jì)宏

(浙江金華康恩貝生物制藥有限公司，321016)

甘草酸二銨是從甘草中提取的α體甘草次酸衍生物，具有抗炎、抗變態(tài)反應(yīng)、抗病毒、保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)、調(diào)節(jié)免疫、改善肝功能等多種作用。甘草酸二銨屬于弱酸性化合物，微溶于水，且水溶液不穩(wěn)定，在酸性水溶液中很快分解［1］。目前上市的甘草酸二銨腸溶膠囊采用腸溶膠囊殼達(dá)到腸道釋放的目的。有學(xué)者指出，腸溶膠囊均為明膠膠囊外包腸溶衣制成，由于明膠的特殊性質(zhì)，這種傳統(tǒng)的包衣方式很難達(dá)到理想的效果，或是影響藥物性質(zhì)，或是影響整體膠囊的穩(wěn)定性。本實(shí)驗(yàn)中，筆者在考察藥物穩(wěn)定性及篩選輔料的基礎(chǔ)上，采用擠出滾圓工藝及流化床包衣法制備甘草酸二銨腸溶微丸，更好地控制了藥物釋放，以體外溶出度為評價(jià)指標(biāo)，并依據(jù)正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對處方進(jìn)行了優(yōu)化。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 E-50軸向單螺桿擠出機(jī)(重慶英格)，S-250滾圓機(jī)(重慶英格)，WBF-2G型包衣造粒機(jī)(重慶英格)，ZRS-8G型溶出儀(天津大學(xué)無線電廠)，Agilent1100高效液相色譜儀(美國安捷倫公司)，AG135型電子分析天平(梅特勒-托利多儀器有限公司)，TU-1800S型紫外-可見分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限公司)。

1.2 試藥 甘草酸二銨(西安富捷藥業(yè)有限公司，批號:100904，純度:99.2%)，煙酰胺對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號:100115-200703)，羥丙基甲基纖維素E5(上?？房倒?，微晶纖維素(湖州展望天明藥業(yè)有限公司)，磷酸氫二鈉(上海展云化工有限公司)，磷脂酰膽堿(上海太偉藥業(yè)有限公司 )，鄰苯二甲酸二乙酯(中國醫(yī)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)，Eudragit L30D-55(德固賽公司)，滑石粉(萊州市風(fēng)羽滑石粉有限公司)。

2 方法

2.1 載藥微丸的制備 采用擠出滾圓造粒機(jī)制備微丸。稱取處方量藥物及輔料，過篩混合均勻，加2%羥丙甲基纖維素(hydroxy propyl methyl cellulose，HPMC)適量制成軟材，經(jīng)擠出篩板(孔徑0.8 mm)擠成直徑相當(dāng)?shù)臈l狀，進(jìn)滾圓機(jī)使顆粒完全滾圓，于50℃烘干，取0.80～1.18 mm(18～24目)微丸包衣。

2.2 隔離微丸的制備 按處方量將HPMC用適量純化水預(yù)先溶解，加入磷酸氫二鈉，攪拌30 min，過內(nèi)徑0.180 mm(80目)篩，即得HPMC包衣液，備用。開啟流化床設(shè)備并選擇適當(dāng)程序，設(shè)備加熱至顯示溫度(45±2)℃。加入藥丸，加熱，至顯示溫度(40±2)℃。開始噴HPMC溶液［設(shè)備參數(shù):進(jìn)風(fēng)溫度38～50℃，氣壓:0.2 ～0.4 MPa，霧化壓力0.2 ～0.5 MPa，引風(fēng)機(jī)頻率26～43 Hz，溫度設(shè)定35～50℃，蠕動(dòng)泵流量10～60 r·min-1，產(chǎn)品溫度(35±5)℃］，質(zhì)量增加約 5%。噴涂完畢，隔離丸于流化床設(shè)備內(nèi)沸騰20～25 min出料，過內(nèi)徑0.710～1.180 mm(16～24目)篩。

2.3 腸溶顆粒的制備 將鄰苯二甲酸二乙酯、滑石粉、磷酸氫二鈉加入適量水中，攪拌均勻，然后按比例加入Eudragit L30D-55分散體，攪拌60 min，過內(nèi)徑0.180 mm(80目)篩，即得緩釋層水分散體包衣液，備用。取隔離微丸，置包衣造粒機(jī)中，用已配制好的丙烯酸樹脂包衣溶液進(jìn)行包衣［設(shè)備參數(shù):進(jìn)風(fēng)溫度設(shè)定38 ～50 ℃，氣壓壓強(qiáng):0.2 ～0.4 MPa，霧化壓強(qiáng):0.2 ～0.5 MPa，引風(fēng)機(jī)頻率25 ～50 Hz，溫度設(shè)定35～50 ℃，蠕動(dòng)泵流量10～30 r·min-1，產(chǎn)品溫度(40±2)℃，增質(zhì)量約12%］。包完衣后置于50℃烘箱內(nèi)干燥老化24 h，取出得腸溶微丸。

2.4 耐酸力與釋放度測定

2.4.1 液相色譜條件［3］色譜柱為十八烷基鍵合填充柱(100 mm×4.6 mm，5μm);流動(dòng)相:甲醇-水-四氫呋喃-5% 醋酸銨(5∶9∶3∶4);流速:1.0 mL·min-1;檢測波長:252 nm;柱溫:室溫;進(jìn)樣體積:10 μL。

2.4.2 耐酸力測定 取本品6粒，照《中華人民共和國藥典》2010年版二部附錄X C第一法溶出度測定法，以鹽酸溶液(9→1 000)500 mL為溶劑，100 r·min-1，經(jīng)2 h，取下轉(zhuǎn)籃，以水沖洗除去轉(zhuǎn)籃內(nèi)顆粒表面的酸液至中性，將轉(zhuǎn)籃內(nèi)顆粒移置100 mL量瓶，加磷酸鹽緩沖液(pH11.0)(取 0.25 mol·L-1磷酸鈉溶液 110 mL，加 0.5 mol·L-1磷酸氫二鈉溶液220 mL，用水稀釋至1 000 mL，混勻)約60 mL，超聲處理使甘草酸二銨溶解，加上述緩沖液稀釋至刻度，精密量取5 mL，置50 mL棕色量瓶，用水稀釋至刻度，搖勻，精密量取20 μL 注入液相色譜儀，照“2.4.1”項(xiàng)方法測定。另取煙酰胺對照品10 mg，精密稱定，以磷酸鹽緩沖液(pH=11.0)溶解并稀釋成約 1 μg·mL-1溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，結(jié)果乘以1.898，耐酸力不得小于90%。

2.4.3 釋放度的測定［4］照《中華人民共和國藥典》2010年版二部附錄X D釋放度測定法第二法。取6片，以人工胃液500 mL為溶劑，轉(zhuǎn)速100 r·min-1，2 h后，在容器中加入預(yù)熱至37℃的0.235 mol·L-1磷酸氫二鈉溶液400 mL，繼續(xù)依法操作，經(jīng)45 min時(shí)，精密量取續(xù)濾液5 mL置于具塞試管中，加0.25 mol·L-1氫氧化鈉溶液1.0 mL，搖勻，作為供試品溶液。另取煙酰胺對照品10 mg，精密稱定，以磷酸鹽緩沖液(pH=11.0)溶解并稀釋成約 1 μg·mL-1溶液，作為對照品溶液。取供試品溶液和對照品溶液，照“2.4.1”項(xiàng)方法測定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，結(jié)果乘以1.898，每粒的釋放量不得小于75%。

2.4.4 線性關(guān)系考察 取甘草酸二銨適量，用磷酸鹽緩沖液(pH=11.0)配制成1 mg·mL-1儲(chǔ)備液，分別吸取1，2，5 mL 置于 100 mL 量瓶，吸取 1，2，5 mL 置于10 mL量瓶，加入磷酸鹽緩沖液(pH=11.0)稀釋至刻度，成濃度為 10，20，50，100，200，500 μg·mL-1系列溶液，依法測定，以甘草酸二銨濃度與相應(yīng)的峰面積進(jìn)行線性擬合，得方程:Y=0.305X+170.69，R2=0.999 4。結(jié)果表明，在10～500 μg·mL-1濃度范圍內(nèi)，甘草酸二銨的量與相應(yīng)的峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.4.5 耐酸力和緩沖液中釋放度測定 將3批甘草酸二銨腸溶微丸按“2.4.2”和“2.4.3”項(xiàng)檢測，結(jié)果批號為010215，010216，010217的樣品，耐酸力分別為93.7%，95.1%，96.5%;釋放度分別為 86.6%，91.8%，88.7%。由此可知，3批甘草酸二銨腸溶微丸均符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。

2.5 腸溶微丸處方優(yōu)化 選取微晶纖維素含量(A，%)、HPMC 增質(zhì)量(B，%)和 Eudragit增質(zhì)量(C，%)為因素，以45 min藥物溶出度為指標(biāo)，采用L9(34)正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化處方(表1)，篩選出符合要求的最優(yōu)處方。

表1 正交實(shí)驗(yàn)因素與水平%

3 結(jié)果

3.1 腸溶微丸處方優(yōu)化結(jié)果 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2，由表2可知，最優(yōu)處方為 A2B2C1，即微晶纖維素為15%，HPMC增質(zhì)量為4%，Eudragit L30-D55增質(zhì)量為18%。

3.2 腸溶微丸溶出度測定結(jié)果 按最優(yōu)化處方，制備3批腸溶微丸并測定在人工胃液中溶出2 h后，人工腸液45 min中的溶出度。腸溶微丸在人工腸液中釋放迅速，達(dá)到了速釋的目的。

3.3 腸溶微丸含量及耐酸力考察結(jié)果 腸溶微丸3批，含量及耐酸力測定結(jié)果3批樣品耐酸力良好，批次間差異較小。

表2 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)表

4 討論

甘草酸二銨腸溶膠囊是中藥甘草有效成分的第3代提取物及磷脂酰膽堿的混合物。具有較強(qiáng)的抗炎、保護(hù)肝細(xì)胞膜及改善肝功能的作用。該產(chǎn)品使用擠出滾圓-微型流化床包衣法制備甘草酸二銨微丸，以正交實(shí)驗(yàn)法對處方進(jìn)行了優(yōu)化，腸溶微丸耐酸性好，在人工腸液中釋放迅速、完全，批次間差異較小。本實(shí)驗(yàn)制備工藝簡單、易操作、重復(fù)性好，適宜工業(yè)化生產(chǎn)。

［1］SHIOTA G，HARADA K，LSHIDA M，et al.Inhibition of hepatoceular carcinomaby glycyrrhizin in diethylnitrosamine-treated mice［J］.Carcinogenesis，1999，20(1):59.

［2］王中彥，唐星，張向榮，等.硝苯地平阿替洛爾緩釋膠囊的制備與體外釋放［J］.沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，19(2):90－91.

［3］甘草酸二銨膠囊［S］.WS12(X2416)22003Z.

［4］國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(二部)［M］.北京:中國醫(yī)藥科學(xué)技術(shù)出版社，2010:附錄X85，87.