乳酸環(huán)丙沙星注射液細菌內(nèi)毒素檢驗方法分析

陳萬勝

(河南省許昌市食品藥品檢驗所 河南許昌 461000)

乳酸環(huán)丙沙星注射液細菌內(nèi)毒素檢驗方法分析

陳萬勝

(河南省許昌市食品藥品檢驗所 河南許昌 461000)

目的 探討研究乳酸環(huán)丙沙星注射液細菌內(nèi)毒素檢驗方法。方法 采用鱟試劑細菌內(nèi)毒素檢查法進行乳酸環(huán)丙沙星注射液細菌內(nèi)毒素檢驗。結(jié)果 0.1%乳酸環(huán)丙沙星注射液對細菌內(nèi)毒素檢查無干擾;5批樣品家兔熱原檢查結(jié)果均為陰性,與細菌內(nèi)毒素檢查法檢查結(jié)果相同。結(jié)論 乳酸環(huán)丙沙星注射液采用細菌內(nèi)毒素檢查法(BET)進行熱原檢查,該方法簡便快速,可以取代家兔法檢查熱原。鱟試劑檢驗方法更簡便、快速、靈敏、準確。

乳酸環(huán)丙沙星注射液 細菌內(nèi)毒素 檢驗方法 分析

乳酸環(huán)丙沙星注射液是臨床常用的廣譜抗生素,已得到臨床廣泛應(yīng)用。根據(jù)鱟試劑能與細菌內(nèi)毒素發(fā)生非常靈敏的特異性反應(yīng)機理[1],我們對0.1%乳酸環(huán)丙沙星注射液的細菌內(nèi)毒素檢測方法進行了研究。

1 臨床材料

1.1 一般材料

鱟試劑(動態(tài)濁度法專用),福建省福州東方鱟試劑廠生產(chǎn)的批號:990820,靈敏度:0.5EU/mL,裝量:0．5mL/支。細菌內(nèi)毒素檢查用水,批號:000313,裝量:2mL/支,湛江海洋生物制品廠生產(chǎn)。細菌內(nèi)毒素國家標準品,批號:981,裝量:9000EU/支,中檢所制。乳酸環(huán)丙沙星注射液:廣西裕源藥業(yè)有限公司國藥準字H20033501,批號:201012856 201035846 201052321 201003656 201045741,每瓶100mL。

1.2 實驗材料

器皿自動旋渦混合器:天津藥典標準儀器廠;DC-3型干式恒溫器:南京三愛斯技術(shù)有限開發(fā)公司;試管、吸管等所需器皿均經(jīng)250℃lh除去外源性內(nèi)毒素。

2 方法與結(jié)果

2.1 細菌內(nèi)毒素限值的確定

乳酸環(huán)丙沙星注射液熱源檢查劑量按家兔體重每1kg注射3mL。靜脈給藥時無任何不良反應(yīng)的內(nèi)毒素閾劑量K=5Eu/Kg,依據(jù)2000年版藥典規(guī)定本品熱原檢查注射液劑量M=12mL/kg[2],本品細菌內(nèi)毒素理論限值L=0.417Eu/mL。

2.2 最大有效稀釋倍數(shù)

L值確定后,根據(jù)所用鱟試劑的λ b值確定樣品的稀釋倍數(shù)。最大有效稀釋倍數(shù)MVD=L/λ b[3],本實驗采用λ b為0.5Eu/mL的鱟試劑,0.1%乳酸環(huán)丙沙星注射液MVD=1.2。

2.3 抑制增強試驗

我們采用λ=0.5.5Eu/mL的鱟試劑做抑制增強試驗[4]。用細菌內(nèi)毒素檢查用水將乳酸環(huán)丙沙星注射液稀釋3.2倍;將內(nèi)毒素工作標準品用乳酸環(huán)丙沙星注射液稀釋液樣品溶液溶解,在旋渦混合器上進行混合15min,然后制備成合適的稀釋濃度,1.0Eu/mL, 0.5Eu/mL,0.25Eu/mL,0.125Eu/mL;進行抑制增強試驗,乳酸環(huán)丙沙星注射液稀釋液樣品溶液代替水為陰性對照,測的了批樣品的反應(yīng)結(jié)果一致;說明0.1%乳酸環(huán)丙沙星注射液對細菌內(nèi)毒素檢查無干擾,具體見表1。

表1 抑制增強試驗結(jié)果

2.4 樣品的細菌內(nèi)毒素檢測

將5批樣品與0.5Eu/mL鱟試劑混合后,按細菌內(nèi)毒素檢查法檢查,均為陰性。5批樣品家兔熱原檢查結(jié)果(按照中國藥典1995年版操作)均為陰性,與細菌內(nèi)毒素檢查法檢查結(jié)果相同。

3 結(jié)語

中國藥典200年版規(guī)定,乳酸環(huán)丙沙星注射的熱原檢查采用家兔檢查法[5];通過我們對本次實驗結(jié)果表明,0.1%乳酸環(huán)丙沙星注射液采用細菌內(nèi)毒素檢查法(BET)進行熱原檢查,該方法簡便快速,可以取代家兔法檢查熱原。鱟試劑檢驗方法更簡便、快速、靈敏、準確[6]。

[1]曲道杰．20%、25%、50%葡萄糖注射液細菌內(nèi)毒索檢驗方法的試驗研究[J]．藥物分析雜志,2006,15(3):305～308．

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M]．北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:附錄86,204．

[3]中國藥品生物制品檢定所．中國藥品檢驗標準操作規(guī)范[M]．北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2001:389．

[4]黃俊.乳酸環(huán)丙沙星注射液細菌內(nèi)毒素檢查法的建立［J］.廣西醫(yī)學(xué),2009,31(5):875.

[5]陳銘軍.鱟實驗法檢查乳酸環(huán)丙沙星注射液的細菌內(nèi)毒素限量［J］.廣西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2000,17(1):53.

[6]黃清泉,夏振民.藥品細菌內(nèi)毒素檢查的實驗設(shè)計［J］．中國藥學(xué)雜志,2007,32(2):72.

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2010-11-30