德靈BNII全自動蛋白分析儀的性能評價①

張純林 謝松業(yè) 劉慶中

(1.江蘇無錫市職業(yè)病防治醫(yī)院檢驗科 江蘇無錫 214000; 2.上海交通大學附屬第一人民醫(yī)院檢驗科 上海 200080)

德靈BNII全自動蛋白分析儀的性能評價①

張純林1謝松業(yè)2劉慶中2

(1.江蘇無錫市職業(yè)病防治醫(yī)院檢驗科 江蘇無錫 214000; 2.上海交通大學附屬第一人民醫(yī)院檢驗科 上海 200080)

目的 對德靈BNII全自動蛋白分析儀的使用性能進行評價。方法 采用質(zhì)控樣品和人血清樣本,對BNII全自動蛋白分析儀測定免疫球蛋白G、A、M(IgG、IgA、IgM)3個項目的精密度、準確度、線性、參考區(qū)間和攜帶污染進行評價實驗。結(jié)果 各項目批內(nèi)精密度小于CLIA’88的1/4的要求(＜5%),批間精密度＜CLIA’88的1/3的要求(＜7.55%)。IgG、IgA、IgM的準確度分別為91.06%、94.83%和92.31%;線性實驗表明,樣本的稀釋度與測定濃度值線性相關(guān)性良好;參考區(qū)間在允許范圍內(nèi);攜帶污染符合要求。結(jié)論 德靈BNII全自動蛋白分析儀的各項主要評價指標均較好,能夠準確可靠地進行臨床標本分析檢測 。

BNII全自動蛋白分析儀 免疫球蛋白 性能評價

德靈BNII是由西門子公司生產(chǎn)的一種高自動化的蛋白定量分析儀,具有高速、高效、靈活和準確的特點,全面實現(xiàn)了實驗室蛋白定量的自動化和靈活化[1]。BNII檢測蛋白的原理是通過檢測蛋白與其特異性抗體形成的免疫復合物的散射光強度,而散射光的強度與標本中的濃度成正比[2]。為了更深入地了解BNII的性能,我們對該儀器檢測IgG、IgA和IgM的精密度、準確度、線性范圍、參考區(qū)間和樣本攜帶污染進行了評價,現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與標本

德靈BNII全自動蛋白分析儀;德靈配套IgG、IgA和IgM試劑,批號分別為153053、153155、153266;標準品(批號:83687);高值蛋白質(zhì)控品(批號:52383);中值蛋白質(zhì)控品(批號:52381)。血清標本來源于上海市第一人民醫(yī)院正常體檢者和患者。

表1 批內(nèi)精密度測定結(jié)果

表2 批間精密度測定結(jié)果

1.2 方法

(1)精密度評價:檢測德靈公司配套高值和中值蛋白質(zhì)控品,一天內(nèi)重復測定20次,計算均值(x)、標準差(S)和變異系數(shù)(CV),評價批內(nèi)精密度;檢測德靈公司配套高值和中值蛋白質(zhì)控品,每天兩次(上、下午各1次),每次重復測定2次,取均數(shù),10個工作日完成,計算均值()、標準差(S)、變異系數(shù)(CV),評價批間精密度。(2)準確度評價:選取2010年衛(wèi)生部臨床檢驗中心室間質(zhì)控品,與臨床檢驗中心的靶值進行比較,統(tǒng)計其偏倚%。(3)線性評價:線性范圍指分析方法能直接測定的待測物濃度或質(zhì)量的范圍。選取高值血清按一定比例稀釋后檢測,IgG的稀釋倍數(shù):1∶1.2,1∶1.5,1∶2,1∶3,1∶6,1∶12;IgA的稀釋倍數(shù):1∶1.67,1:2,1∶25,1∶3.3,1∶5,1∶10,1∶20,1∶40;IgM的稀釋倍數(shù):1∶3.3,1∶5,1∶10,1∶20,1∶40,1∶60。做回歸方程Y=a+bX統(tǒng)計。(4)參考區(qū)間范圍:選擇20份體檢合格的健康人標本,驗證廠家提供的參考范圍是否適合于本實驗室。如果僅有5%的數(shù)據(jù)超出試劑說明書提供的參考范圍,表示該參考范圍可以用于本實驗室。否者實驗室應(yīng)建立合適的參考范圍。本實驗室引用的參考區(qū)間:IgG7.00～16.00g/L、IgA0.70～4.00g/L、IgM0.40～2.30g/L。(5)攜帶污染分析:準備標本量足夠的極高和極低濃度的樣本各1份,將高濃度樣本均勻分成10份,編號H1、H2、……H10,低濃度樣本均勻分成11份,編號L1、L2……L11,按照一定順序排列。統(tǒng)計H-L順序結(jié)果和L-L順序結(jié)果的均值和標準差;H-L順序結(jié)果均值減去L-L順序結(jié)果均值,即為攜帶污染量;3倍的L-L順序結(jié)果標準差即為允許誤差范圍。

表3 準確度測定結(jié)果

圖1 IgG線性測定結(jié)果

圖2 IgA線性測定結(jié)果

圖3 IgM線性測定結(jié)果

2 結(jié)果

(1)精密度評價:IgG、IgA和IgM的批內(nèi)精密度都＜CLIA’88的1/4(＜5%)要求,批間精密度都＜CLIA’88(＜7.55%)的1/3的要求(表1、2)。(2)準確度:參照CIA88的允許誤差的1/3(10%)作為允許偏倚,如測定偏倚在允許偏倚內(nèi),則認為該項目準確度符合要求。測定結(jié)果與2010年衛(wèi)生部臨床檢驗中心室間質(zhì)控品參考值相比偏倚最小為0%(IgM),最大為-8.94%(IgA（)表3）。(3)線性范圍:圖中Y 值為理論值,X為實測值,做回歸方程Y=a+bX統(tǒng)計,斜率在0.95至1.05之間,且r2≥0.95,說明線性相關(guān)性良好,見圖(1～3)。(4)參考區(qū)間:20份健康人血清標本中無結(jié)果超出所驗證的參考范圍,實際測量健康人參考范圍與我們選用的參考范圍相符合。本次實驗參考區(qū)間在IgG9.39～14.59g/L;IgA0.9～2.9g/L;IgA0.59～1.9g/L。實驗室引用的參考區(qū)間在允許范圍內(nèi)。(5)攜帶污染分析,按照一定順序測定極高和極低濃度的樣本,IgG、IgA、IgM樣本間攜帶污染量分別為0.198、0.07、0.01。允許誤差范圍分別為0.56、0.11、0.15。實驗結(jié)果攜帶污染量非常低,均小于允許誤差范圍,攜帶污染符合要求。

3 討論

精密度是反應(yīng)同一組測量值之間彼此的接近程度,是進行其他方法學驗證的前提,從精密度實驗結(jié)果看,IgG、IgA和IgM的批內(nèi)精密度變異系數(shù)在2.17%～4.68%之間,批間精密度變異系數(shù)在3.51%～5.54%之間,可以看出該機的重復性很好,可滿足臨床要求。準確度表示測量結(jié)果與真值的符合程度,本文選取2010年衛(wèi)生部臨床檢驗中心室間質(zhì)控品靶值相比,因此,可以作為判斷準確度的標準。本次實驗的準確度介于91.06%～94.83%之間,所檢測的結(jié)果與衛(wèi)生部臨床檢驗中心室間質(zhì)控品靶值偏倚較小,樣品的實測濃度和預(yù)期濃度非常符合,因此,可為臨床提供可靠的檢測結(jié)果。線性是保證臨床試驗結(jié)果準確性的重要法碼。線性評估可以檢查方法、儀器和試劑的性能,保證在可報告范圍內(nèi)結(jié)果的準確、可靠。本次實驗線性范圍IgG2.96～35.48g/L、IgA0.23～7.43g/L、IgM0.26～4.20g/L,圖（1～3）結(jié)果表明,BNII檢測免疫球蛋白較為理想,相關(guān)系數(shù)r(IgG、IgA、IgM)分別為:0.9968、0.998、0.9979。說明線性相關(guān)性較好,對于超過線性范圍的樣品,應(yīng)用做適當?shù)南♂尡稊?shù)重新進行分析測定。參考范圍涉及臨床的診斷和治療,因此本實驗室需對廠家提供的參考范圍進行驗證,本實驗室選取的20例正常人的標本進行分析,沒有1例超出試劑說明書提供的參考范圍,證實廠家的參考范圍符合本實驗室。臨床常遇到高濃度樣本對以后樣本產(chǎn)生污染和干繞的問題,因此,評價檢測系統(tǒng)的樣本間攜帶污染非常重要。本實驗通過對高值和低值樣本的測定,其攜帶污染量均小于允許誤差范圍,表示高值標本對低值標本交叉污染小。目前的自動化的分析儀通過大量的沖洗程序可以基本解決攜帶污染問題[3],IgG、IgA和IgM的攜帶污染驗證,說明該儀器具有良好的沖洗功能,交叉污染率低。

BNII支持條形碼功能,采用多點定標建立參考曲線,以克服偏差,多點定標能夠準確反應(yīng)抗原抗體與吸光度間的關(guān)系[4]。如果使用了不同批號的抗血清,則必須建立新的參考曲線,可以更好的保證結(jié)果的準確。BNII檢測項目多、速度快,具有樣本稀釋功能,對每個樣本預(yù)先稀釋再分析,預(yù)稀釋樣本可保留至得到檢測結(jié)果,以方便自動對已稀釋的樣本進行復查,提高了工作效率和檢驗質(zhì)量。綜上所述,BNII能夠符合其公司的設(shè)計能力,為進一步探討免疫球蛋白在臨床中的應(yīng)用價值提供可靠的依據(jù)。

[1]李文波.日本7180全自動生化分析儀性能評價[J].齊魯醫(yī)學檢驗,2005,16(4):55～57.

[2]王蘭蘭,吳健民.臨床免疫學與檢驗[M].第4版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2008:252～254.

[3]邱玲,程歆琦,劉茜,等.自動生化分析儀攜帶污染率來源檢出及處理[J].醫(yī)學研究雜志,2007,36(6):64.

[4]石凌波,林龍順,關(guān)幼華,等.載脂蛋白A1、B免疫比濁法試劑盒的評價[J].上海醫(yī)學檢驗雜志,1999,14(1):27～29.

R19

A

1674-0742(2011)8(c)-0176-02

①通訊作者:謝松業(yè)：55歲,男,副主任技師，上海交通大學附屬第一人民醫(yī)院檢驗科，郵編200080,E-maiL:13671692739@139.com。

2011-07-18