泰山多花黃精試管苗生根技術(shù)研究△

李文金，畢研文，陳建生，張士剛， 宮俊華

栽培規(guī)范

山東省泰安市中藥現(xiàn)代化項目“泰山黃精組培快繁技術(shù)研究與示范”(泰農(nóng)科發(fā)20067號)

*李文金，(0538)8500101

泰山多花黃精試管苗生根技術(shù)研究△

李文金*，畢研文，陳建生，張士剛， 宮俊華

(山東省泰安市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，山東 泰安271000)

目的提高泰山黃精試管苗的生根率，為其快速繁殖提供依據(jù)。方法以泰山多花黃精試管苗為試驗材料，以改良MS為基本培養(yǎng)基，研究了不同水平NAA、蔗糖、暗培養(yǎng)時間對生根產(chǎn)生的影響。結(jié)果暗培養(yǎng)和NAA對生根率有顯著影響，蔗糖的影響作用較小；NAA在0.5～1.0mg·L-1、蔗糖在20～30g·L-1時，單株生根條數(shù)較多，而暗培養(yǎng)時間長短對其單株生根條數(shù)影響不大；NAA濃度的大小對其生根長度影響最大，蔗糖和暗培養(yǎng)時間對生根長度影響不大。結(jié)論試管苗生根的最佳培養(yǎng)組合為：改良1/2MS+NAA0.5mg·L-1+蔗糖20g·L-1+暗培養(yǎng)7d，生根率高達(dá)96%，有效解決了黃精組培快繁中生根率低的問題。

泰山多花黃精；試管苗；生根

泰山多花黃精是泰安市農(nóng)科院中草藥所工作人員在泰山海拔600m以上的野生環(huán)境條件下采集的黃精新種源，通過多年的人工馴化篩選，選育表現(xiàn)穩(wěn)定、抗性強、適應(yīng)性廣的質(zhì)優(yōu)高產(chǎn)新種質(zhì)[1]，其保健功能好，藥效明顯[2]。為加速其繁殖，擬用組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行擴繁。在泰山黃精組培快繁技術(shù)研究中，泰山黃精試管苗的生根率太低，最高的也只有55.0%。為了提高泰山黃精試管苗的生根率，為其快速繁殖提供依據(jù)，我們進(jìn)行了泰山黃精試管苗生根技術(shù)研究。

1 材料

材料選用泰安市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院生物工程技術(shù)研究所生產(chǎn)的泰山黃精組培繁殖苗。

2 方法

2.1試驗設(shè)計

試驗于2007～2008年在泰安市農(nóng)科院生物工程技術(shù)中心進(jìn)行。選取高度為2cm左右的試管苗新梢轉(zhuǎn)接至不同處理的生根培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。生根培養(yǎng)基以改良MS為基本培養(yǎng)基[3]，其他組成包括NAA、蔗糖和暗培養(yǎng)3個因素。每個因素設(shè)置3個水平，按正交試驗L9(34)組成9個不同的處理(不同因素和處理水平見表1)，每個處理接種50株。培養(yǎng)30d后調(diào)查其生根株數(shù)、生根率、單株生根條數(shù)和平均根長。用F檢驗統(tǒng)計分析不同因素、水平的作用效果。

表1 因素水平表

2.2其他培養(yǎng)條件

溫度：(25±2)℃，光照度：2000～3000lux，光照時間：12h·d-1，pH5.6～5.8，瓊脂6.0g·L-1。

3 結(jié)果與分析

結(jié)果見表2。3.1不同因素水平對泰山黃精試管苗生根率的影響

由表2可以看出，根據(jù)K值判斷NAA、蔗糖、暗培養(yǎng)時間3因素對生根率的作用效果為：暗培養(yǎng)>NAA>蔗糖。根據(jù)K值判斷每個因素不同水平的作用：(1)NAA的3個濃度水平中，當(dāng)濃度為0.5，1.0mg·L-1時有利于試管苗的生根，但二者之間差異不大。(2)蔗糖3個濃度水平的大小，對其生根率影響差異明顯。(3)暗培養(yǎng)時間的長短對其生根率影響較大，生根率隨暗培養(yǎng)時間的延長明顯提高，暗培養(yǎng)7d時生根率達(dá)到最高。

3.2不同因素水平對單株生根條數(shù)的影響

從表2中可以看出，NAA和蔗糖對其單株生根條數(shù)影響較大。NAA在0.5～1.0mg·L-1、蔗糖在20～30g·L-1時，泰山黃精試管苗單株生根條數(shù)較多，每株有根2.89～3.30條。而暗培養(yǎng)時間長短對其單株生根條數(shù)影響不大。

表2 試管苗在不同生根培養(yǎng)基上的生根情況調(diào)查及分析

3.3不同因素水平對生根長度的影響

通過對不同處理生根長度的調(diào)查，可以看出，NAA濃度的大小對其生根長度影響最大，當(dāng)NAA為0.5mg·L-1時，其根長為1.7cm，蔗糖和暗培養(yǎng)時間對生根長度影響不大。

綜合上述分析得出，泰山黃精試管苗生根最佳培養(yǎng)基組合為，改良1/2MS+NAA0.5mg·L-1+蔗糖20g·L-1+暗培養(yǎng)7d。

3.4不同因素水平對試管苗生根率、單株生根條數(shù)和平均根長影響的差異顯著性檢驗

不同因素水平的方差分析見表3。方差分析的F檢驗表明，NAA對生根率的影響達(dá)顯著水平，而對單株生根條數(shù)和平均根長的影響差異不顯著。暗培養(yǎng)時間對生根率的影響達(dá)極限水平，對單株生根條數(shù)和平均根長的影響差異不顯著。蔗糖對試管苗的生根率、單株生根條數(shù)和平均根長的影響均差異不顯著。

表3 不同因素水平差異顯著性分析

注：*F0.05(2.2)=19，**F0.01(2.2)=99.0

4 小結(jié)與討論

泰山黃精系百合科黃精屬藥用植物,其藥用價值大大高于異地產(chǎn)黃精。由于長期大量采挖，野生資源面臨枯竭的境地。近年來開始人工種植，生產(chǎn)上多采用分根繁殖，其生根困難，繁殖系數(shù)低，質(zhì)量不穩(wěn)定，故黃精種苗問題已成為人工大面積種植的主要問題。用組織培養(yǎng)技術(shù)建立快速繁殖體系，能有效解決黃精種源問題，但泰山黃精試管苗的生根率太低，這是進(jìn)行規(guī)?；a(chǎn)面臨的最大障礙。

在泰山黃精試管苗的生根培養(yǎng)中，選用改良1/2MS+NAA0.5mg·L-1+蔗糖20g·L-1+暗培養(yǎng)7d作為其最佳生根培養(yǎng)組合，其單株生根3.9條，平均根長1.5cm,且根較粗壯，生根率高達(dá)96%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于以前研究最高55.0%的生根率，有效解決了黃精組培快繁中生根率低的問題。

[1] 畢研文，宮俊華，楊永恒.泰山黃精綜合栽培技術(shù)研究[J].中國農(nóng)學(xué)通報期刊社，2005，(12)：280-282.

[2] 李元富，張義濤，劉道富，等.泰山藥用植物[J].中國醫(yī)藥科技出版社，1996，(10)：245.

[3] 冉懋雄，賀定翔，毛秀華，等.中藥組織培養(yǎng)實用技術(shù)[J].科學(xué)技術(shù)文化出版社，2004，(8)：411-414.

2009-09-27)