梅片樹葉揮發(fā)油提取及成分分析

蘇健裕，陳 玲*，李 冰，李 琳

(華南理工大學輕工與食品學院，廣東 廣州 510640)

梅片樹葉揮發(fā)油提取及成分分析

蘇健裕，陳 玲*，李 冰，李 琳

(華南理工大學輕工與食品學院，廣東 廣州 510640)

采用水蒸氣蒸餾法提取梅片樹葉中的揮發(fā)油，并采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)和峰面積歸一化法分離分析其化學成分和相對含量。結(jié)果表明：本法可從梅片樹葉揮發(fā)油中分離出43種化合物，可鑒定出其中的40種，占揮發(fā)性成分總量的99.4%；揮發(fā)油的主要成分有右旋龍腦(78.6%)、乙酸龍腦酯(3.26%)、斯巴醇(2.60%)和桉葉油素(1.92%)。梅片樹葉富含右旋龍腦，具有廣闊的開發(fā)利用前景。

梅片樹葉；揮發(fā)油；龍腦；氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)

天然右旋龍腦是一種名貴珍稀藥材、高級香料和重要的化工原料，又稱梅片、天然冰片[1]。目前《中國藥典》記載著兩種龍腦[2]：一為合成龍腦(冰片)，主成分為消旋龍腦和異龍腦的混合物，其中消旋龍腦的含量不低于55.0%；二為新收錄的天然右旋龍腦(天然冰片)，主成分為結(jié)構(gòu)確定的右旋龍腦，純度不低于95.0%。近年研究表明合成龍腦的質(zhì)量不穩(wěn)定[3]，某些在售產(chǎn)品中含有毒性樟腦的含量可達45%以上，有的甚至達到97%，而且主要成分可隨儲藏時間延長而發(fā)生變化[4-6]。隨著人類日益關(guān)注自身的健康及消費的不斷升級，天然右旋龍腦逐步取代合成龍腦是必然的趨勢[7-8]。

天然右旋龍腦原產(chǎn)于印度尼西亞蘇門答臘群島，它是從龍腦香樹干的樹脂蒸餾而得的天然產(chǎn)品，我國一直以來依靠進口滿足需要[9-10]。但是目前由于當?shù)亻L期以來過度采伐，自然資源破壞嚴重，該地龍腦香樹已近枯竭；加之當?shù)卣呀?jīng)禁止伐樹取腦，天然右旋龍腦奇缺，我國已經(jīng)不可能依靠進口來滿足需要，對整個中醫(yī)藥行業(yè)造成了嚴重的影響[11-12]。20世紀80年代，中國科學院華南植物研究所在廣東梅州地區(qū)的樟科陰香化學型——梅片樹枝葉中提取得到了天然右旋龍腦[13-14]。然而，目前尚未見到對梅片樹枝葉龍腦粗油成分研究的報道。本實驗為研究梅片樹葉龍腦粗油的化學成分，采用水蒸氣蒸餾法提取梅片樹葉的揮發(fā)油，并且采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)分析其化學成分，從中鑒定出40種化合物，為梅片樹的綜合利用及天然右旋龍腦藥用資源的研究開發(fā)提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

梅片樹葉由梅州市廣東嘉應制藥股份有限公司提供，經(jīng)中國科學院華南植物研究所鑒定為樟科陰香化學型(Cinnamomun burmanniiB1.)。

表1 梅片樹葉揮發(fā)油中可鑒別的化學成分Table 1 Compositions of volatile components from the leaves of Cinnamonum burmannii B1.

無水硫酸鈉(色譜純) 天津市科密歐化學試劑開發(fā)中心。

1.2 儀器與設備

5975MS/6890GC氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀、HP-5MS彈性石英毛細柱管(30m×0.25mm，0.25μm) 美國安捷倫科技公司；SHZ-D(Ⅲ)循環(huán)水式真空泵 鞏義市英峪予華儀器廠。

1.3 揮發(fā)油的提取

將新鮮梅片樹葉粉碎，按《中國藥典》(2005版)附錄XD的水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油。收集蒸餾的餾出物，向其中投入過量無水硫酸鈉并充分振蕩。使用循環(huán)水式真空泵抽濾此混合物得到不含水分的龍腦粗油(黃色透明油狀物)。稱量、計算揮發(fā)油的得率。

1.4 色譜和質(zhì)譜檢測條件

1.4.1 色譜條件

色譜柱：HP-5MS彈性石英毛細柱管(30m×0.25mm，0.25μm)；升溫程序：80℃恒溫1min后，以20℃/min的速度升溫至250℃，保持5min。進樣量0.5μL，采用不分流的方式進樣，進樣口溫度為250℃；檢測溫度為300℃；載氣為氮氣，過柱載氣恒流速為2mL/min。

1.4.2 質(zhì)譜條件

電子轟擊(EI)離子源；電子能量70eV；傳輸線溫度275℃；離子源溫度230℃；發(fā)射電流34.6VA，電子倍增器電壓1392V；掃描質(zhì)量范圍m/z33～450。

2 結(jié)果與分析

采用水蒸氣蒸餾法提取梅片樹葉中揮發(fā)油，并且利用GC-MS分析揮發(fā)油的組成，獲得的譜圖見圖1。色譜分離后，質(zhì)譜裂解得到每個色譜峰的質(zhì)譜圖，查閱有關(guān)質(zhì)譜圖，共獲得40種化合物，通過峰面積歸一化法計算求出各化合物的峰面積相對含量，結(jié)果見表1。

圖1 水蒸氣蒸餾法獲得梅片樹葉揮發(fā)油的GC-MS圖譜Fig.1 GC-MS chromatogram of essential oil from the leaves of Cinnamonum burmannii B1.

3 結(jié) 論

通過GC-MS分析表明，水蒸氣蒸餾法所得的梅片樹葉揮發(fā)性成分中共分離出43個峰，所得組分質(zhì)譜圖經(jīng)計算機檢索并參照標準譜圖和質(zhì)譜的裂解規(guī)律，鑒定出40種成分，占揮發(fā)油相對含量的99.4%(以峰面積計)。已鑒定的化合物主要包括醇、酯、烯烴、醛、苯、胺等6類化合物[13]。其中相對含量大于1%的化合物有9種。在保留時間為5.915min時出現(xiàn)了峰面積最大的一個峰。結(jié)合表1可知，該峰為天然右旋龍腦的分離峰，其相對含量占總色譜流出峰面積的78.46%，其次為乙酸龍腦酯(3.26%)、斯巴醇(2.60%)和桉葉油素(1.92%)等。

據(jù)統(tǒng)計，全世界有100多種植物的精油含有龍腦，這些植物分屬于27科66屬[11]。我國現(xiàn)有的資源有18科33屬68種，其中菊科艾納香(Blumeariparia(bl) Dc.)的莖和葉子含有龍腦最高，可達80%～90%，但是其中左旋龍腦含量高達85%[15-16]。江西省吉安市和福建明溪縣發(fā)現(xiàn)的香樟含有右旋龍腦相對含量可達到81.78%，然而香樟來源的右旋龍腦含有較多的黃樟油素，影響其品質(zhì)[17-18]。本實驗所采用的梅片樹葉子中揮發(fā)油的右旋龍腦相對含量達到78.4%，表明梅片樹葉富含右旋龍腦，它作為一種珍貴的藥材和香原料，具有廣闊的開發(fā)利用前景。

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Extraction and Composition Analysis of Volatile Components in Leaves ofCinnamomun burmanniiB1.

SU Jian-yu，CHEN Ling*，LI Bing，LI Lin
(College of Light Industry and Food Sciences, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China)

Steam distillation was used to extract essential oil from the leaves ofCinnamomun burmanniiB1. The compositions and their relative contents in essential oil were quantitatively determined by GC-MS with peak area normalization method.Results indicated that a total of 40 volatile compounds were identified, which was accounted for 99.4% of total volatile compounds. The predominant volatile components wereD-borneol (78.6%), bornyl acetate (3.26%), (-)-spathulenol (2.60%) and eucalyptol (1.92%), respectively. Therefore,D-borneol was one of the major components inCinnamomun burmanniiB1, which exhibited a promising prospect for developing medical products and perfume.

Cinnamomun burmanniiB1.；essential oil；borneol；gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS)

TS207.3

A

1002-6630(2010)20-0399-03

2010-06-30

廣東省-教育部-科技部企業(yè)科技特派員行動計劃專項(2009B090600055)；

廣東省-教育部產(chǎn)學研結(jié)合項目(2009A090100041)

蘇健裕(1979—)，男，講師，博士，研究方向為天然產(chǎn)物制備及生物利用。E-mail：jysu@scut.edu.cn

*通信作者：陳玲(1961—)，女，教授，博士，研究方向為多糖藥物制備及生物利用。E-mail：felchen@scut.edu.cn