7種農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性評(píng)價(jià)及中毒癥狀學(xué)觀察

王靜，朱九生，2，高海燕，2，余清軍，2，喬雄梧，*

1.山西省農(nóng)科院山西省農(nóng)藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，太原030031

2.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，太谷030801

7種農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性評(píng)價(jià)及中毒癥狀學(xué)觀察

王靜1，朱九生1，2，高海燕1，2，余清軍1，2，喬雄梧1，*

1.山西省農(nóng)科院山西省農(nóng)藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，太原030031

2.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，太谷030801

采用食下毒葉法，測(cè)定了7種殺蟲(chóng)劑對(duì)家蠶的急性毒性，并系統(tǒng)觀察了殺蟲(chóng)劑處理家蠶后的中毒癥狀.結(jié)果表明：高效氯氟氰菊酯、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、阿維菌素、高效氯氰菊酯4種殺蟲(chóng)劑的LC50值均小于0.5mg·L-1，屬劇毒級(jí)藥劑，對(duì)家蠶有極高風(fēng)險(xiǎn)性；啶蟲(chóng)脒、毒死蜱和敵敵畏3種農(nóng)藥的LC50值分別為1.2371、1.0438和4.9641mg·L-1，屬高毒級(jí)藥劑，對(duì)家蠶有高至極高風(fēng)險(xiǎn)性；家蠶的農(nóng)藥急性中毒癥狀主要包括吐液、拒食、體縮、擺頭、身體扭曲呈“S”或“C”形等，但不同類型農(nóng)藥其家蠶中毒癥狀表現(xiàn)各異.

農(nóng)藥；家蠶；毒性評(píng)價(jià)；中毒癥狀

1 引言（Introduction）

家蠶又名桑蠶、白蠶，是一種重要的經(jīng)濟(jì)昆蟲(chóng)，全世界因飼養(yǎng)家蠶而興起的蠶絲業(yè)總產(chǎn)值高達(dá)上千億美元（鄭健壯和陳國(guó)鈞，2003），而且隨著世界經(jīng)濟(jì)貿(mào)易一體化進(jìn)程的加快和高新技術(shù)的進(jìn)步，蠶絲業(yè)將會(huì)帶動(dòng)其他行業(yè)如制造業(yè)、燃料業(yè)、服務(wù)業(yè)、服裝業(yè)等快速發(fā)展，蠶桑業(yè)在中國(guó)乃至世界的發(fā)展前景十分廣闊.

然而，家蠶在人們的長(zhǎng)期馴養(yǎng)過(guò)程中，由于人為地提供適合其生長(zhǎng)發(fā)育的環(huán)境條件，使其在經(jīng)濟(jì)性狀得到充分表現(xiàn)的同時(shí)，抗逆性明顯減弱，極易受到外界各種不利因素如溫度、濕度、食物因素等因子的影響（馬惠等，2005）.其中，桑葉是家蠶的唯一食料，桑園及其周邊農(nóng)田用藥，都有可能通過(guò)不同途徑直接或間接污染桑葉，造成家蠶農(nóng)藥中毒（郁蔥蔥，2003;熊彩珍和顧立明，2007;謝云南和曹忠宏，2007），這已成為目前制約蠶桑業(yè)發(fā)展的主要瓶頸（Kuribayashi,1988）.因此，研究和明確農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性是生產(chǎn)上亟待解決的課題，也是農(nóng)藥登記與環(huán)境安全性評(píng)價(jià)必不可少的研究?jī)?nèi)容.

近幾年來(lái)，隨著人們對(duì)生態(tài)環(huán)境的進(jìn)一步重視，關(guān)于農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性評(píng)價(jià)的研究越來(lái)越多，試驗(yàn)條件和方法也在不斷改進(jìn).本研究采用食下毒葉法測(cè)定了生產(chǎn)上常用的7種農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性，同時(shí)觀察了經(jīng)不同藥劑處理后家蠶的中毒癥狀，旨在明確各類農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性，為桑樹(shù)病蟲(chóng)害防治、桑園周圍環(huán)境選用藥劑和對(duì)農(nóng)藥環(huán)境毒性的評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù).

2 材料與方法（Materials and methods）

2.1 供試材料

家蠶品種為魯七×9202，購(gòu)于山東省廣通蠶種廠.常規(guī)方法催青和飼養(yǎng)至2齡起蠶備用.

桑樹(shù)品種為陜桑305（人工同源三倍體桑樹(shù)新品種），樹(shù)齡2年，處于桑葉盛產(chǎn)期.

供試農(nóng)藥見(jiàn)表1.供試農(nóng)藥用少量丙酮溶解后，用蒸餾水稀釋配制成母液，冰箱（5～7℃）保存?zhèn)溆?

表1 供試農(nóng)藥Table 1Insecticides used in this study

2.2 測(cè)定方法

采用食下毒葉法（吳聲敢等，2003）.選擇健康且大小較為一致的2齡起蠶進(jìn)行試驗(yàn).通過(guò)預(yù)試驗(yàn)確定家蠶全部致死和全部存活的濃度范圍，正式試驗(yàn)在此濃度范圍內(nèi)以一定的等比級(jí)差設(shè)5～7個(gè)濃度組（母液用清水稀釋，每100mL加3滴吐溫80），并設(shè)清水（加吐溫80）為空白對(duì)照組.將桑葉切成5cm2小塊，在藥液中浸漬30s，取出自然晾干，置于直徑為9cm的培養(yǎng)皿中，移入家蠶后，放入按試驗(yàn)要求設(shè)置好的人工氣候箱中.試驗(yàn)時(shí)對(duì)照與處理相同條件分開(kāi)放置.每組20頭蠶，重復(fù)3次.24h后改喂新鮮桑葉，觀察記錄24h、48h的中毒死亡情況（用昆蟲(chóng)針刺激蟲(chóng)體，不動(dòng)者記為死亡），并連續(xù)觀察記錄存活個(gè)體中毒癥狀.對(duì)照組死亡率小于10%的試驗(yàn)為有效試驗(yàn).計(jì)算死亡率和校正死亡率，用Finney概率分析法計(jì)算校正死亡機(jī)率值與濃度對(duì)數(shù)值的回歸方程，求出各個(gè)齡期的致死中濃度LC50及95%置信限.

2.3 飼養(yǎng)及試驗(yàn)條件

供試家蠶均在溫度（25±1）℃，相對(duì)濕度（80±5）%的人工氣候箱中飼養(yǎng).

3 結(jié)果與分析（Results and analysis）

3.1 供試殺蟲(chóng)劑對(duì)二齡家蠶的毒性

阿維菌素、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、毒死蜱、敵敵畏、高效氯氰菊酯、高效氯氟氰菊酯和啶蟲(chóng)脒7種大田常用農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2.從表2中可以看出，以食下毒葉法測(cè)得阿維菌素、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、毒死蜱、敵敵畏、高效氯氰菊酯、高效氯氟氰菊酯和啶蟲(chóng)脒7種農(nóng)藥對(duì)家蠶24h的LC50值分別為0.0097、0.0082、1.5311、9.7878、0.2414、0.0019和2.6147mg·L-1；48h的LC50值分別為0.0084、0.006、1.0438、4.9641、0.1666、0.0014和1.2371mg·L-1.對(duì)LC50值進(jìn)行比較，可見(jiàn)7種殺蟲(chóng)劑對(duì)家蠶的毒性大小順序?yàn)楦咝确杈挣?甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽>阿維菌素>高效氯氰菊酯>啶蟲(chóng)脒>毒死蜱>敵敵畏.供試農(nóng)藥中，擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥高效氯氟氰菊酯對(duì)家蠶的毒性最高，抗生素類農(nóng)藥甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽和阿維菌素對(duì)家蠶的毒性次之，再次為擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥高效氯氰菊酯和有機(jī)磷類農(nóng)藥毒死蜱及煙堿類農(nóng)藥啶蟲(chóng)脒，有機(jī)磷農(nóng)藥敵敵畏對(duì)家蠶的毒性最低.

表2 7種殺蟲(chóng)劑對(duì)二齡家蠶的急性毒性Table 2Acute toxicity of seven pesticides to 2ndinstar silkworm Bombyx mori at 24h and 48h after treatment

3.2 供試殺蟲(chóng)劑對(duì)家蠶毒性等級(jí)劃分及安全性評(píng)價(jià)

目前，化學(xué)農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性還沒(méi)有一個(gè)統(tǒng)一的等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn).早在20世紀(jì)80年代，蔡道基曾闡述了農(nóng)藥生態(tài)毒性試驗(yàn)應(yīng)該遵循的一些原則（馬惠等，2006）.這些原則在后來(lái)制定的《化學(xué)農(nóng)藥安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》中得到確認(rèn).本文參照國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局南京環(huán)境科學(xué)研究所提出的新的毒性與風(fēng)險(xiǎn)性等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)（表3）對(duì)7種農(nóng)藥進(jìn)行分級(jí)，并根據(jù)田間實(shí)際施藥濃度（mg·L-1）與實(shí)驗(yàn)室測(cè)得的對(duì)家蠶的LC50（mg·L-1）的比值來(lái)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)性等級(jí)劃分（陳銳等，1986），結(jié)果如表4所示.由表4可見(jiàn)，高效氯氟氰菊酯、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、阿維菌素和高效氯氰菊酯對(duì)家蠶屬劇毒級(jí)；啶蟲(chóng)脒、毒死蜱和敵敵畏對(duì)家蠶屬高毒級(jí).表4還表明，高效氯氟氰菊酯、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、阿維菌素、高效氯氰菊酯、毒死蜱和敵敵畏對(duì)家蠶的致死中濃度遠(yuǎn)低于田間施藥濃度，田間施藥濃度與LC50的比值>10，甚至達(dá)到3～4個(gè)數(shù)量級(jí)，因此判斷這6種殺蟲(chóng)劑的使用對(duì)家蠶具有極高風(fēng)險(xiǎn)性；啶蟲(chóng)脒的田間施藥濃度與LC50的比值為7～29，故啶蟲(chóng)脒的使用對(duì)家蠶為高風(fēng)險(xiǎn)至極高風(fēng)險(xiǎn)性等級(jí).

表3 農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性與風(fēng)險(xiǎn)性等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)Table 3Criteria of toxicity and risk of pesticides to Bombyx mori

表4 7種供試殺蟲(chóng)劑對(duì)家蠶的毒性和風(fēng)險(xiǎn)性等級(jí)Table 4Toxicity and risk assessment of selected insecticides to Bombyx mori

3.3 殺蟲(chóng)劑處理家蠶后的中毒癥狀觀察

家蠶接觸不同殺蟲(chóng)劑的中毒癥狀如表5所示.由表5看出，不同殺蟲(chóng)劑對(duì)家蠶引起的中毒癥狀表現(xiàn)出多種相似的特征，如吐液、拒食、身體扭曲呈“C”或“S”形、靜臥等，但家蠶對(duì)不同類農(nóng)藥也表現(xiàn)出異樣的中毒癥狀.

抗生素類農(nóng)藥：阿維菌素和甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽對(duì)家蠶的中毒癥狀高濃度時(shí)主要表現(xiàn)為拒食（不上葉）、吐液、胸腹足失去把握能力、體色變化不大、體縮，靜伏蠶座、癱軟而死.

表5 家蠶接觸不同殺蟲(chóng)劑的中毒癥狀Table 5Toxic symptom of the larvae of Bombyx mori

有機(jī)磷類農(nóng)藥：藥劑處理后不同時(shí)間觀察結(jié)果表明，用藥后4h家蠶即出現(xiàn)毒死蜱農(nóng)藥中毒癥狀，中毒輕者取食量減少，頭部不停地左右擺動(dòng)，或離開(kāi)桑葉到培養(yǎng)皿上爬行，中毒嚴(yán)重者靜臥或倒翻后輕微扭動(dòng)掙扎，口中吐出大量淡黃色液體，繼而漸漸呈昏睡狀態(tài)，觸之有緩慢反應(yīng).死蠶身體卷曲，顏色發(fā)黑.而食下敵敵畏毒葉半小時(shí)至1小時(shí)左右，家蠶即迅速出現(xiàn)停止食桑、煩躁、亂爬、翻滾、吐胃液、身體痙攣后麻痹死亡；蠶尸體呈胸粗尾細(xì)，長(zhǎng)度縮短.

擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥：蠶剛接觸有拒食現(xiàn)象，頭胸緊縮并左右擺動(dòng)，稍后，胸部膨大，亂爬，吐大量胃液，出現(xiàn)痙攣、翻滾，有的有脫肛，排不成形糞，拉稀，蠶體扭曲死亡，頭向前伸，體軀彎曲成“S”形或“C”形.

煙堿類農(nóng)藥：啶蟲(chóng)脒中毒后的家蠶其癥狀主要表現(xiàn)為頭部左右搖動(dòng)、吐水，死亡蠶體呈S卷曲狀.

4 討論（Discussion）

目前我國(guó)關(guān)于農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性評(píng)價(jià)也尚無(wú)統(tǒng)一的毒性標(biāo)準(zhǔn).陳銳等早在1986年試行引入殺蟲(chóng)單作為參比農(nóng)藥，以推測(cè)有關(guān)農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性大?。愪J等，1986）.戴珍科和陳銳（1992）依據(jù)農(nóng)藥在實(shí)驗(yàn)室測(cè)得的對(duì)家蠶LC50（mg·L-1）與田間實(shí)際施藥濃度（mg·L-1）的比值來(lái)表示.本文參照國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局南京環(huán)境科學(xué)研究所提出的新的毒性與風(fēng)險(xiǎn)性等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)7種殺蟲(chóng)劑進(jìn)行分級(jí)，結(jié)果表明，高效氯氟氰菊酯、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、阿維菌素和高效氯氰菊酯對(duì)家蠶屬劇毒級(jí)，有極高風(fēng)險(xiǎn)性；毒死蜱和敵敵畏對(duì)家蠶屬高毒級(jí)，有極高風(fēng)險(xiǎn)性；啶蟲(chóng)脒對(duì)家蠶屬高毒級(jí)，有高至極高風(fēng)險(xiǎn)性.由此可見(jiàn)，家蠶對(duì)大多數(shù)殺蟲(chóng)劑非常敏感，因此在桑園使用殺蟲(chóng)劑防治害蟲(chóng)時(shí)，一定注意控制安全間隔期.在桑園周邊環(huán)境中防治其他作物害蟲(chóng)時(shí)，應(yīng)避免在刮風(fēng)天施藥，嚴(yán)格控制其施藥方法、施藥時(shí)間和施藥時(shí)期，并且禁止在桑園附近配藥，噴施過(guò)高毒藥劑的噴霧器應(yīng)清洗干凈后再使用，以免給家蠶飼養(yǎng)帶來(lái)不必要的損失.

1986年夏安扣報(bào)道了家蠶的中毒癥狀（夏安扣，1986），之后許多研究文章也相繼報(bào)道了家蠶對(duì)農(nóng)藥的中毒癥狀（冉景曠等，2008;陳小平等，2000;2003），不同作用機(jī)制的農(nóng)藥使家蠶出現(xiàn)不同的中毒癥狀（陳麗萍等，2000），農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性并非都表現(xiàn)為急性致死效應(yīng)，歸結(jié)起來(lái)其癥狀表現(xiàn)主要有兩種類型：一是慢性中毒，主要表現(xiàn)為生長(zhǎng)發(fā)育不齊、體質(zhì)虛弱、不結(jié)繭或結(jié)畸形繭；二是急性中毒，主要表現(xiàn)為拒食、亂爬、吐液、身體掙扎扭曲，翻滾后死亡.急性中毒癥狀直觀可見(jiàn)，慢性中毒一般不易被察覺(jué)，需要隨著家蠶的生長(zhǎng)發(fā)育，對(duì)家蠶幼蟲(chóng)歷期、各齡期體重、結(jié)繭率和繁殖后代能力等進(jìn)一步的觀察，根據(jù)多項(xiàng)指標(biāo)綜合分析、評(píng)價(jià)農(nóng)藥對(duì)家蠶的影響.

本試驗(yàn)較系統(tǒng)地觀察了家蠶對(duì)7種殺蟲(chóng)劑的急性中毒癥狀表現(xiàn)，不僅為鑒別家蠶飼養(yǎng)中的異常表現(xiàn)和農(nóng)藥中毒提供了依據(jù)，也能根據(jù)家蠶中毒癥狀更準(zhǔn)確地分析桑葉受農(nóng)藥污染的原因，對(duì)保持我國(guó)養(yǎng)蠶業(yè)和農(nóng)業(yè)的協(xié)調(diào)發(fā)展有較大意義.

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Toxicological Evaluation of Seven Pesticides to Bombyx mori and Observation of Toxicosis Symptoms

WANG Jing1，ZHU Jiu-sheng1，2，GAO Hai-yan1，2，YU Qing-jun1，2，QIAO Xiong-wu1，*

1.Shanxi Key Laboratory of Pesticide Science,Shanxi Academy of Agricultural Sciences,Taiyuan 030031
2.College of Agriculture,Shanxi Agricultural University,Taigu 030801

The acute toxicities of 7 pesticides to silkworm,Bombyx mori,were evaluated in laboratory by using the feed intake method.The toxic symptoms of silkworms after treatment of pesticides were systematically observed.The results indicated that the LC50values of Lambda-cyhalothrin,Emamectin benzoate,Abamectin,Beta-cypermethrin were lower than 0.5mg·L-1,which belonged to extremely toxic substances.The LC50values of Acetamiprid,Chlorpyrifos and Dichlorvos were 1.2371,1.0438 and 4.9641mg·L-1,which belonged to highly toxic substances.The general acute symptoms of poisoning due to pesticides treatment in silkworms are vomiting,food rejection,shorting of body,movements of the head,and stiffness of body in the shape of an“S”or“C”,etc..However,different kinds of pesticides result in different symptoms in silkworm.

pesticide；Bombyx mori；toxicological evaluation；toxic symptom

27 March 2009accepted15 June 2009

1673-5897（2010）1-057-06

X171.5

A

2009-03-27錄用日期：2009-06-15

山西省自然基金項(xiàng)目（No.2008011067）；山西省回國(guó)留學(xué)人員科研資助項(xiàng)目（No.2005-82）；山西省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放基金項(xiàng)目（No.2007031008）

王靜（1966—），女，碩士，副研究員；*通訊作者（Corresponding author），E-mail:qiaoxiongwu@126.com

喬雄梧（1959—），男，農(nóng)學(xué)博士、研究員、博士生導(dǎo)師.1982年起從事農(nóng)藥殘留和農(nóng)藥應(yīng)用研究至今.專長(zhǎng)于農(nóng)藥環(huán)境毒理學(xué)、農(nóng)藥環(huán)境微生物學(xué)和生物農(nóng)藥研究.