• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    高效液相色譜雙波長檢測法測定維C銀翹片中4種組分的含量

    2010-10-21 03:47:22孫祥德
    色譜 2010年2期
    關鍵詞:那敏銀翹氯苯

    董 麗, 孫祥德, 李 琴

    (新鄉(xiāng)醫(yī)學院,河南新鄉(xiāng)453003)

    高效液相色譜雙波長檢測法測定維C銀翹片中4種組分的含量

    董 麗*, 孫祥德, 李 琴

    (新鄉(xiāng)醫(yī)學院,河南新鄉(xiāng)453003)

    建立了高效液相色譜測定維C銀翹片中維生素C、對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏和綠原酸4種組分含量的方法。研究優(yōu)化了樣品提取的溶劑與超聲提取條件、色譜分離條件和檢測波長等,采用了Sinochrom ODS-BP(4.6 mm×200mm,5μm)色譜柱,以0.05mol/L KH2PO4(pH3.0,含1%三乙胺)-乙腈(75∶25,v/v)為流動相,雙檢測波長260nm和326nm等分離檢測條件。結果表明,維生素C、對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏和綠原酸的測定線性范圍均比較寬,方法平均回收率大于99.4%,相對標準偏差(RSD)小于1.8%(n=5),而且測定方法快速、簡便、準確,非常適合維C銀翹片類藥物的質量控制。

    高效液相色譜法;雙檢測波長;維生素C;對乙酰氨基酚;馬來酸氯苯那敏;綠原酸;維C銀翹片

    Abstract:A reversed-phase high performance liquid Chromatographic(RP-HPLC)method with dual wavelength detection was developed for the determination of vitamin C,paracetamol,chlorphenamine maleate and chlorogenic acid in Vitamin C Yinqiao Tablets.The separation was perform ed on a Sinochrom ODS-BP column with the mobile phase consisting of0.05mol/L KH2PO4(pH3.0,containing1%triethylamine and acetonitrile(75∶25,v/v).The detection wavelength was set at260nm(λ1)and326nm(λ2).The method linearities were wide and the average recoveries were more than99.4%.The relative standard deviations were less than 1.8%(n=5).This method is convenient,rap id and accurate.It is readily applied to the quality controls in the production process of Vitamin C Yinqiao Tablets.

    Key words:high performance liquid Chromatography(HPLC);dual detection wavelengths;vitamin C;paracetamol;chlorphena mine maleate;chlorogenic acid;Vitamin C Yinqiao Tablets

    維C銀翹片是由金銀花、連翹等13味中藥添加維生素C、對乙酰氨基酚和馬來酸氯苯那敏3種西藥成分所組成的復方制劑,具有辛涼解表、清熱解毒之功效,用于治療流行性感冒引起的發(fā)熱、頭疼、咳嗽、口干、咽喉疼痛等癥。目前,國家食品藥品監(jiān)督管理局國家藥品標準(WS3-B-4000-98-2003)中僅規(guī)定了維生素C和對乙酰氨基酚含量的測定,對其他成分無含量控制標準。金銀花是該制劑中中藥組方之君藥,綠原酸為其主要活性成分,對本方的臨床療效具有重要的作用;馬來酸氯苯那敏由于在該制劑中的含量較低,且不易混勻,現(xiàn)行的國家標準也未收載對其含量均勻度的測定。因此,在本制劑中增加綠原酸和馬來酸氯苯那敏的含量測定,對全面有效地控制產品質量具有重要的意義。目前,利用光譜法[1-3]、薄層掃描法[4]、毛細管電泳-化學發(fā)光法[5]及高效液相色譜法(HPLC)[6-8]等進行維C銀翹片中維生素C、馬來酸氯苯那敏、對乙酰氨基酚或綠原酸等組分的含量測定多有報道,但這些方法大多是測定其中1種或同時測定其中2種組分。有采用高效毛細管電泳法(HPCE)的膠束電動毛細管色譜(M ECC)模式同時測定對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏、維生素C和綠原酸4種組分含量的報道[9],但由于HPCE自身的重現(xiàn)性較差,使其難以應用于藥品的質量控制。利用HPLC測定維C銀翹片中維生素C、對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏和綠原酸4種組分的含量鮮有報道。本文通過優(yōu)化樣品提取條件和色譜分離條件,用外標法定量,建立了HPLC雙波長檢測法測定該4種組分含量的方法,并應用于實際樣品的測定。方法操作簡便,其靈敏度、準確性和重現(xiàn)性均優(yōu)于已報道的方法。

    1 實驗部分

    1.1 藥品與試劑

    磷酸二氫鉀、磷酸、三乙胺為分析純試劑,乙腈為色譜純(天津科密歐化學試劑有限公司)。維生素C、對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏和綠原酸對照品(中國藥品生物制品檢定所)。維C銀翹片為市售,系3個廠家共9個批次樣品(A廠:070386,070345,070320;B廠:070803,070827,070908;C廠:070610,070508,070628;標示量:維生素C49.5 m g/片,對乙酰氨基酚105m g/片,馬來酸氯苯那敏1.05m g/片)。實驗用水均為自制二次蒸餾水。

    1.2 儀器及色譜條件

    日本島津公司的LC-6AD高效液相色譜儀,配LC-solution色譜工作站和SPD-20A紫外檢測器等;XK96-A快速混合器(姜堰市新康醫(yī)療器械有限公司);pHS-3C精密pH計(上海精密科學儀器有限公司)。色譜柱:大連依利特公司Sinochrom ODS-B P(200mm×4.6mm,5μm),預柱:C18(25 mm×4.6mm);流動相:0.05mol/L KH2PO4(pH 3.0,含1%三乙胺)-乙腈(75∶25,v/v);檢測波長:260nm和326nm;流速:1.0mL/m in;柱溫:25℃;進樣量:20μL;用外標法定量。

    1.3 樣品溶液的制備

    取藥品20片,除去包衣,精密稱定,計算平均片重。粉碎研磨后精密稱取適量(約相當于1片的質量),置于100mL容量瓶中,加流動相適量,間歇超聲處理使之溶解,用流動相稀釋至刻度,搖勻,過濾,續(xù)濾液作為供試品溶液A,用于測定馬來酸氯苯那敏和綠原酸。取供試品溶液A2.50mL置于100 mL容量瓶中,用流動相稀釋至刻度,得供試品溶液B,用于測定維生素C和對乙酰氨基酚。

    1.4 對照品溶液的制備

    分別準確稱取維生素C、對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏和綠原酸對照品適量,以流動相溶解,配制4組分對照品儲備液,其質量濃度分別為1.030,1.020,1.090和0.500 0g/L。量取維生素C、對乙酰氨基酚、綠原酸3種儲備液各5.00mL,馬來酸氯苯那敏儲備液10.00mL置于同一50mL容量瓶中,用流動相稀釋至刻度,得4組分混合對照品溶液,混合溶液中各組分的質量濃度分別為維生素C 103.0m g/L,綠原酸50.00m g/L,對乙酰氨基酚102.0m g/L,馬來酸氯苯那敏218.0m g/L。將此混合對照品溶液用流動相依次等體積稀釋,得到系列質量濃度的混合對照品溶液。

    2 結果與討論

    2.1 樣品溶液制備方法的選擇

    馬來酸氯苯那敏和維生素C在水中易溶,而綠原酸和對乙酰氨基酚在水中溶解度較小。根據(jù)4組分的溶解性,本文曾試驗以水、甲醇、不同比例的甲醇-水及本文最終選定的流動相等不同的提取溶劑進行提取。結果顯示,用水提取時,對乙酰氨基酚和綠原酸提取不完全,而合適比例的甲醇-水混合溶劑雖能對各被測組分有較好的提取率,但提取的共存成分較多,干擾被測組分的分離。用流動相提取不僅提取完全,而且干擾組分少,又不產生溶劑峰。因此,本文選擇用流動相作提取溶劑。同時還試驗了室溫下浸取、振蕩、超聲提取等不同的提取方式。結果表明,超聲提取簡便快速、提取完全;但由于維生素C對熱不穩(wěn)定,超聲所產生的熱量會使其破壞,從而影響測定結果的準確度。同時,綠原酸在酸性介質(pH2~4)中的穩(wěn)定性較好[10],但在較高溫度下會加速其分子中酯鍵的水解。因此,為確保提取過程中維生素C和綠原酸不被破壞且提取完全,本文采用間歇超聲提取的方式。

    2.2 檢測波長的選擇

    以流動相為空白,在200~400nm范圍內掃描,維生素C、對乙酰氨基酚、綠原酸和馬來酸氯苯那敏的最大吸收波長分別為245,249,326和260 nm。由于綠原酸與其他3組分的最大吸收波長相差懸殊,故采用雙波長同時檢測模式進行檢測。該制劑中馬來酸氯苯那敏的處方量甚小,故選擇260 nm作為測定的第一檢測波長,在此波長下,維生素C和對乙酰氨基酚也具有較大的吸收,檢測靈敏度足以達到分析要求。以綠原酸的最大吸收波長326 nm作為第二檢測波長對綠原酸進行檢測。雙波長檢測模式兼顧了各組分的含量差別和檢測靈敏度,實現(xiàn)了在同一色譜條件下4組分含量的同時測定。

    文獻[11]在以HPLC測定維C銀翹片中的上述4組分的含量時,選擇219nm檢測維生素C、對乙酰氨基酚和馬來酸氯苯那敏,盡管3組分在219 nm波長下具有較強吸收,但由于維C銀翹片中含有大量的中藥成分,基質復雜,經溶劑提取制備的供試品溶液中含有大量的有末端吸收的共存成分,從而干擾被測組分的分離測定。另外,該文獻使用甲醇-水-冰醋酸(體積比為20∶80∶0.2)為提取溶劑,冰醋酸在219nm處也有吸收,從而產生溶劑峰。本文結果顯示,選擇在260nm處檢測維生素C、對乙酰氨基酚和馬來酸氯苯那敏3組分,不僅檢測靈敏度足以達到分析要求,而且有效地減少了大量具有末端吸收的未知共存成分的干擾。

    2.3 流動相的選擇

    馬來酸氯苯那敏是氯苯那敏的馬來酸鹽,將出現(xiàn)馬來酸和氯苯那敏兩個色譜峰。本實驗表明,流動相中乙腈的比例對綠原酸和氯苯那敏的保留行為影響很大,調整乙腈和緩沖鹽的比例,可實現(xiàn)各組分的分離。流動相中加入少量的三乙胺不僅可以調節(jié)各組分的保留時間,而且可很好地改善氯苯那敏的峰形。曾試驗不同pH值的緩沖溶液對各待測組分分離的影響,結果顯示,改變流動相的pH值對維生素C、馬來酸、綠原酸和對乙酰氨基酚的保留時間幾乎沒有影響,而氯苯那敏的保留時間則隨著pH值的降低而縮短。這是由于氯苯那敏分子中含有叔氨基,溶液的酸度增加有利于該氨基的質子化,從而使其極性增大,導致其在反相色譜柱上的保留減弱。盡管酸度的降低有利于氯苯那敏較早出峰,但ODS柱難以承受pH2以下的酸度,且維生素C在過高的酸度下不穩(wěn)定;而綠原酸分子結構中含有的酯鍵,其水溶液在中性和堿性環(huán)境下穩(wěn)定性較差,但在pH 2~4下較穩(wěn)定。經優(yōu)化,最終確定流動相為0.05 mol/L KH2PO4(pH3.0,含1%三乙胺)-乙腈(75∶25,v/v)。在本文選定的色譜條件下,經用不含待測組分的空白樣品進行試驗,試樣中提取的未知組分不干擾待測組分的測定。

    目前,采用HPLC分離分析馬來酸氯苯那敏的報道很多,但有不少文獻報道的測定條件[12-16]值得商榷。由于馬來酸的極性較大,而氯苯那敏的極性較弱,所以馬來酸在反相色譜上的保留弱于氯苯那敏。流動相中有機溶劑相的比例對氯苯那敏的保留時間影響甚大,當有機相的比例較低時,氯苯那敏常常未被洗脫。因此,有不少文獻常將較早洗脫的馬來酸峰誤認為是氯苯那敏峰而進行定量[16]。由于馬來酸氯苯那敏的藥效結構是氯苯那敏,因此在進行馬來酸氯苯那敏的含量測定中以馬來酸峰來定量是不妥的。文獻[11]采用了以甲醇-乙腈-0.02%磷酸(5∶10∶85,v/v)為流動相,柱溫為35℃,檢測波長為310nm和219nm的色譜條件。但經驗證發(fā)現(xiàn)在該文獻的色譜條件下,氯苯那敏在35m in以后出峰(這是由于流動相中甲醇、乙腈比例偏低所致),而用于定量馬來酸氯苯那敏的峰系馬來酸峰,且以末端吸收219nm為檢測波長,干擾成分較多。本實驗改進并優(yōu)化了流動相條件和檢測波長,使維生素C、綠原酸、對乙酰氨基酚和氯苯那敏4組分在10m in內全部出峰并得到了很好的分離。方法學驗證結果顯示,本文方法測定維C銀翹片4組分快速、簡便、準確。

    在本文確定的色譜條件下,4組分之間以及與其他未知組分之間得到了很好的分離,以對乙酰氨基酚計,柱效不低于3 000?;旌蠈φ掌啡芤汉蜆悠啡芤旱纳V圖分別見圖1和圖2。

    2.4 線性范圍與定量限確定

    分別取系列對照品混合液20μL進樣,按照1.2節(jié)色譜條件測定,以各組分峰面積A對相應的質量濃度C回歸制備標準曲線。當信噪比(S/N)為10時,確定4種化合物的定量限。結果(見表1)表明,4種組分的峰面積與進樣濃度之間線性關系良好,線性范圍寬,靈敏度高。

    圖1 雙檢測波長下4組分混合對照品溶液的色譜圖Fig.1 HPLC chromatograms of the standard solution at the dual detection wave lengths

    圖2 雙檢測波長下供試品溶液的色譜圖Fig.2 HPLC chromatogram s of the sample solutions at the dual detection wave lengths

    表1 4種組分的回歸方程、相關系數(shù)、線性范圍與定量限(S/N=10)Table1 Regression equations,correlation coefficients,linear ranges and limits of quantification(LOQ,S/N=10)of four components

    2.5 精密度試驗

    配制4種組分高、中、低3個濃度的對照品溶液,其中維生素C溶液的質量濃度分別為0.201 1,6.438,103.0m g/L;對乙酰氨基酚溶液的質量濃度分別為0.199 2,3.188,51.00m g/L;綠原酸溶液的質量濃度分別為0.097 60,3.125,50.00m g/L;馬來酸氯苯那敏溶液的質量濃度分別為0.425 5,13.62,218.0m g/L。上述各溶液重復進樣5次進行含量測定及日內精密度(以相對標準偏差(RSD)計)測定;每種溶液連續(xù)5d配制測定,計算日間精密度。結果表明,各組分高中低3種濃度溶液的日內精密度均小于1.0%,日間精密度均小于1.8%。

    2.6 回收率試驗

    稱取約1片質量的已知含量的樣品(A廠,070386批號)粉末5份,各準確加入含有維生素C 10.00m g、對乙酰氨基酚20.00m g、綠原酸1.00 m g和馬來酸氯苯那敏1.00m g的4組分對照品儲備液適量,置于100mL容量瓶中,用流動相超聲助溶,定容至刻度。過濾,取續(xù)濾液進樣20μL測定馬來酸氯苯那敏和綠原酸。取續(xù)濾液2.50mL于100 mL容量瓶中,用流動相稀釋至刻度,進樣20μL測定維生素C和對乙酰氨基酚,測定結果見表2。

    表2 4種組分的回收率測定結果(n=5)Table2 Recovery results of four components(n=5)

    2.7 溶液的穩(wěn)定性試驗

    取新配制的樣品供試溶液于室溫下和4℃冰箱中放置,并分別于放置0,1,3,5,7,12,24h取樣20μL進行測定。結果表明,室溫下對乙酰氨基酚、綠原酸和馬來酸氯苯那敏峰面積的RSD分別為0.94%,2.54%和2.67%,表明這3種組分在24h內有較好的穩(wěn)定性;但室溫下維生素C放置3h峰面積即降低了約10%。而放置在4℃冰箱內保存,24h內4組分的峰面積的RSD均小于2.0%。

    2.8 耐用性試驗

    根據(jù)《中國藥典》2005版藥品質量標準分析方法驗證指導原則,考察了方法的耐用性。按照已確定的色譜條件進行試驗,同一樣品使用同一色譜柱(Spherigel C18柱,200mm×4.6mm,10μm)在3臺不同儀器(Sh im adzu LC-6A,Shim adzu LC-6AD,Varian PROSTAR210)上測定;使用同一臺儀器(Sh im adzu LC-6AD),分別用Sinochrom ODS-B P(200mm×4.6mm,5μm)、Shim adzu VP-ODS(250mm×4.6mm,5μm)和Spherigel C18(200 mm×4.6mm,10μm)3根不同廠家的色譜柱,在不同時間經不同實驗人員測定。結果顯示,4組分的峰形均較理想,相鄰峰的分離度均大于1.5,理論塔板數(shù)均大于3 000,測定結果的RSD小于2.6%。另外還考察了柱溫和緩沖液pH值等因素的微小變化對分離度和峰面積的影響。結果顯示,當柱溫在±5℃范圍內波動時,測定結果無明顯的差異。分別用pH值為2.80,2.90,3.10的緩沖液配制流動相進行試驗,其實驗結果和分離度無明顯的差異。上述試驗結果顯示,本方法在測定條件有較小的變動時,方法的耐用性良好。

    2.9 樣品測定

    取3個廠家的9批次維C銀翹片樣品按1.3節(jié)下的方法操作,取供試品溶液20μL進樣分析,其中馬來酸氯苯那敏以氯苯那敏峰的峰面積進行定量,結果見表3。

    由于該制劑處方中馬來酸氯苯那敏和綠原酸的含量相對較低,用同一色譜圖定量會存在著部分組分的濃度不在其線性范圍內,故在樣品測定時先制成供試品溶液A供測定馬來酸氯苯那敏和綠原酸,然后將供試品溶液A適當稀釋供測定維生素C和對乙酰氨基酚。

    表3的測定結果顯示,不同生產廠家不同批次的維C銀翹片中的對乙酰氨基酚的含量符合規(guī)定,少數(shù)產品維生素C含量不均勻,而馬來酸氯苯那敏和綠原酸兩成分的含量差異較大。因此,規(guī)范穩(wěn)定藥材來源,在該制劑質量標準中增加馬來酸氯苯那敏和綠原酸含量的測定項目,對保證維C銀翹片的質量、安全、有效具有重要的意義。

    表3 不同批次維C銀翹片中4組分的含量(n=3)Table3 Contents of four components in vitamin C Yinqiao Table ts(n=3)m g/tablet

    3 結論

    本文應用HPLC-雙波長檢測建立了同時高靈敏度地測定維C銀翹片中4種組分的含量方法,并進行了方法學驗證。在測定含有馬來酸氯苯那敏的復方制劑的多組分含量時,不僅需要優(yōu)化色譜條件使各待測組分不受干擾,還應特別注意避免將馬來酸峰誤認為氯苯那敏進行定量。本文方法簡便、快速、靈敏度高、重現(xiàn)性好,可用于維C銀翹片的質量控制。

    [1] Lu W,Zhao X J.Chinese Pharmaceutical Affairs(陸偉,趙新靜.中國藥事),2004,18(7):435

    [2] Cai Z,Zhao J,Du L W,et al.Applied Chemical Industry(蔡卓,趙靜,杜良偉,等.應用化工),2008,37(10):1235

    [3] Bai H J,Zhang L,Huang Z S.Tianjin Pharm acy(白海嬌,張莉,黃哲甦.天津藥學),2007,19(3):10

    [4] J iang J,Zhao H Q,Yang L,et al.Journal of Shenyang Pharm aceuticalUniversity(姜靜,趙懷清,楊麗,等.沈陽藥科大學學報),2002,19(6):417

    [5] W ang J W,Peng Z B,Yang J.Chinese Journal of Analysis Laboratory(汪敬武,彭志兵,楊佳.分析試驗室),2007,26(4):25

    [6] Xue P,Lu J,Cai J,et al.D rug Standards of China(薛萍,陸駿,蔡健,等.中國藥品標準),2006,7(1):27

    [7] Fan Q M,Sun D Y,Zhou H J.Research and Practice of Chinese Medicines(范全民,孫冬云,周慧娟.現(xiàn)代中藥研究與實踐),2005,19(6):43

    [8] Guo F L,Zhao X J.Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis(郭凡嶺,趙新靜.藥物分析雜志),2005,25(2):223

    [9] Yin C,Wu Y T.Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis(尹茶,吳玉田.藥物分析雜志),2000,20(1):24

    [10] Lin L Y,He Y J,Luo W W,et al.West China Journal of Pharmaceutical Sciences(林麗洋,賀英菊,羅巍偉,等.華西藥學雜志),2005,20(3):225

    [11] Gao G W,Feng X D,Huang H X.Chinese Traditional Patent Medicine(高光偉,馮向東,黃海欣.中成藥),2008,30(2):207

    [12] W an L,Wu R.China Pharmacist(萬莉,伍蓉.中國藥師),2009,12(5):671

    [13] Lou Z H.D rug Standards of China(婁志紅.中國藥品標準),2007,8(6):65

    [14] J i Y.D rug Standards of China(紀宇.中國藥品標準),2004,5(1):31

    [15] Xu Y,Liu F,Xu X X,et al.Sichuan Journal of Physiological Sciences(徐燕,劉峰,徐曉霞,等.四川生理科學雜志),2008,30(3):110

    [16] Sun S F,Liu G R,Wang Z,et al.Chinese Journal of Pharmaceuticals(孫素芳,劉國瑞,王喆,等.中國醫(yī)藥工業(yè)雜志),2006,37(9):627

    Determination of four components in Vitamin C Yinq iao Tablets using reversed-phase high performance liquid chromatography with dual wave length detection

    DONG L i*,SUN Xiangde,LI Q in
    (Xinxiang Medica l University,Xinxiang 453003,China)

    O658

    A

    1000-8713(2010)02-0204-05

    *通訊聯(lián)系人:董 麗,副教授,主要研究方向為藥物色譜分析.Tel:(0373)3029128,E-m ail:ldong@xxmu.edu.cn.

    新鄉(xiāng)醫(yī)學院高學歷人才基金項目(No.2005YJ31).

    2009-07-20

    DO I:10.3724/SP.J.1123.2010.00204

    猜你喜歡
    那敏銀翹氯苯
    固相萃取結合液相色譜-串聯(lián)質譜技術同時測定飼料中氯苯那敏和溴苯那敏含量
    氧化鈣抑制固體廢物焚燒過程中氯苯生成
    UPLC法同時測定銀翹解毒合劑中10種成分
    中成藥(2018年8期)2018-08-29 01:28:10
    銀翹解毒丸經常被用錯
    益壽寶典(2017年23期)2017-02-26 12:12:42
    馬來酸氯苯那敏的荷移分光光度測定方法
    高效液相色譜法測定小兒退熱凝膠中對乙酰氨基酚和馬來酸氯苯那敏含量
    2-(4-氯苯氨基)甲基苯酚降解的動力學研究
    混二氯硝基苯氯化制備1,2,4-/1,2,3-三氯苯
    中國氯堿(2014年10期)2014-02-28 01:04:59
    淺析2,4-二硝基氯苯的最佳合成技術
    河南科技(2014年8期)2014-02-27 14:07:42
    維C銀翹片到底怎么了?
    国产免费男女视频| 亚洲激情在线av| 久久久久亚洲av毛片大全| 欧美日韩精品网址| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 操出白浆在线播放| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 免费在线观看亚洲国产| 一级作爱视频免费观看| 久久久国产成人免费| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 狂野欧美激情性xxxx| x7x7x7水蜜桃| 亚洲精品国产精品久久久不卡| av欧美777| 三级毛片av免费| 又大又爽又粗| 精品久久久久久久末码| 嫩草影院精品99| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 操出白浆在线播放| 在线观看一区二区三区| 国产精品亚洲一级av第二区| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 丰满的人妻完整版| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 十分钟在线观看高清视频www| 后天国语完整版免费观看| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 老司机午夜十八禁免费视频| 两性夫妻黄色片| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 日本免费一区二区三区高清不卡| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 在线观看免费视频日本深夜| 一区二区三区国产精品乱码| 免费一级毛片在线播放高清视频| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 91成人精品电影| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 91字幕亚洲| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 国产免费男女视频| 搞女人的毛片| 久久国产精品影院| 欧美乱色亚洲激情| 女性被躁到高潮视频| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 午夜福利成人在线免费观看| 99re在线观看精品视频| 精品久久蜜臀av无| 真人做人爱边吃奶动态| 天堂动漫精品| 精品国内亚洲2022精品成人| 一级a爱片免费观看的视频| 午夜免费激情av| 精品久久久久久久久久久久久 | 两人在一起打扑克的视频| 午夜久久久久精精品| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 18美女黄网站色大片免费观看| 精品国内亚洲2022精品成人| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 夜夜躁狠狠躁天天躁| 欧美亚洲日本最大视频资源| 久久精品91无色码中文字幕| 欧美精品啪啪一区二区三区| av福利片在线| 日韩欧美三级三区| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产精品电影一区二区三区| 亚洲专区国产一区二区| 无人区码免费观看不卡| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 久久精品91无色码中文字幕| 欧美黑人巨大hd| 亚洲一区二区三区色噜噜| 51午夜福利影视在线观看| 黄色毛片三级朝国网站| 俺也久久电影网| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产伦人伦偷精品视频| 国产成人精品久久二区二区91| 中国美女看黄片| 日韩欧美在线二视频| 国产成人影院久久av| 在线观看www视频免费| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 久久久水蜜桃国产精品网| 精品不卡国产一区二区三区| 国产精品综合久久久久久久免费| 又大又爽又粗| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产精品1区2区在线观看.| 成年版毛片免费区| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 搡老岳熟女国产| 日韩欧美三级三区| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 欧美黑人巨大hd| 在线观看日韩欧美| 亚洲成人久久爱视频| 黄色片一级片一级黄色片| xxxwww97欧美| 久久久久精品国产欧美久久久| 人人澡人人妻人| 热re99久久国产66热| av电影中文网址| 特大巨黑吊av在线直播 | 久久久久久人人人人人| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 成人午夜高清在线视频 | 亚洲欧美一区二区三区黑人| 99久久99久久久精品蜜桃| 国产黄片美女视频| 国产精品1区2区在线观看.| 亚洲专区中文字幕在线| 精品久久蜜臀av无| 成人国产一区最新在线观看| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 久久狼人影院| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 一a级毛片在线观看| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产又色又爽无遮挡免费看| 男人舔奶头视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 看黄色毛片网站| 日韩欧美 国产精品| 在线视频色国产色| 成人18禁在线播放| 少妇 在线观看| 狂野欧美激情性xxxx| av天堂在线播放| 久久精品91蜜桃| 一二三四社区在线视频社区8| 国产麻豆成人av免费视频| 亚洲成a人片在线一区二区| 一级a爱片免费观看的视频| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 黄频高清免费视频| 精品午夜福利视频在线观看一区| 黄色成人免费大全| 精华霜和精华液先用哪个| 欧美大码av| 波多野结衣高清无吗| 美女 人体艺术 gogo| 国产av又大| 亚洲人成网站高清观看| 久久精品成人免费网站| 嫁个100分男人电影在线观看| 黄色片一级片一级黄色片| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 丰满的人妻完整版| 人成视频在线观看免费观看| 在线观看日韩欧美| 久久久久久大精品| 日本 av在线| 一进一出好大好爽视频| 久久亚洲精品不卡| 母亲3免费完整高清在线观看| 成人一区二区视频在线观看| 性欧美人与动物交配| 久久青草综合色| 91成年电影在线观看| 亚洲国产中文字幕在线视频| 欧美激情久久久久久爽电影| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 亚洲一区中文字幕在线| 18禁黄网站禁片免费观看直播| av电影中文网址| 午夜a级毛片| 婷婷精品国产亚洲av在线| 成在线人永久免费视频| 1024手机看黄色片| 亚洲国产欧美一区二区综合| 欧美乱色亚洲激情| 久久香蕉激情| 亚洲性夜色夜夜综合| 日韩欧美在线二视频| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 一二三四在线观看免费中文在| 国语自产精品视频在线第100页| 麻豆国产av国片精品| 日韩免费av在线播放| 美女国产高潮福利片在线看| 久久精品影院6| 国产极品粉嫩免费观看在线| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 精品国产一区二区三区四区第35| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 久久精品国产综合久久久| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 精品久久久久久久末码| 欧美三级亚洲精品| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 国产精品,欧美在线| 日韩精品青青久久久久久| 久久中文字幕一级| 欧美黑人巨大hd| 成年免费大片在线观看| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 99re在线观看精品视频| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 精品日产1卡2卡| 国产精品精品国产色婷婷| 国产激情欧美一区二区| 男女下面进入的视频免费午夜 | 国产伦在线观看视频一区| 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲熟女毛片儿| 亚洲国产欧美一区二区综合| 亚洲一区二区三区色噜噜| 色老头精品视频在线观看| 中文字幕人妻熟女乱码| 久久午夜综合久久蜜桃| 亚洲国产精品久久男人天堂| 人妻久久中文字幕网| 99在线人妻在线中文字幕| 欧美激情极品国产一区二区三区| 成熟少妇高潮喷水视频| av超薄肉色丝袜交足视频| 99久久国产精品久久久| 欧美三级亚洲精品| 欧美丝袜亚洲另类 | 久久久久国产一级毛片高清牌| 人成视频在线观看免费观看| 亚洲欧美激情综合另类| 黄片小视频在线播放| 美女大奶头视频| 午夜久久久久精精品| 特大巨黑吊av在线直播 | 男人舔奶头视频| 给我免费播放毛片高清在线观看| 国产区一区二久久| 午夜免费激情av| 亚洲中文日韩欧美视频| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 亚洲精品在线观看二区| 在线免费观看的www视频| www国产在线视频色| 国产精品亚洲美女久久久| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 国产精品,欧美在线| 可以免费在线观看a视频的电影网站| www国产在线视频色| 成年免费大片在线观看| 久久精品国产亚洲av高清一级| 美女午夜性视频免费| 国产又色又爽无遮挡免费看| 成人三级黄色视频| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产精品免费一区二区三区在线| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 日本免费a在线| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 无遮挡黄片免费观看| 97人妻精品一区二区三区麻豆 | 欧美激情极品国产一区二区三区| 91成年电影在线观看| 久久精品国产亚洲av高清一级| 久久久久国内视频| 一本一本综合久久| 亚洲成人久久爱视频| 欧美黄色淫秽网站| svipshipincom国产片| 在线国产一区二区在线| 国产伦一二天堂av在线观看| 麻豆成人av在线观看| 自线自在国产av| 亚洲片人在线观看| 波多野结衣高清作品| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 久久久久国内视频| 精品久久久久久成人av| 亚洲国产精品久久男人天堂| netflix在线观看网站| 欧美在线黄色| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 国产真实乱freesex| 特大巨黑吊av在线直播 | 久热爱精品视频在线9| 18禁观看日本| 亚洲真实伦在线观看| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 国产亚洲欧美在线一区二区| 亚洲黑人精品在线| 黄色片一级片一级黄色片| 老司机午夜福利在线观看视频| 淫妇啪啪啪对白视频| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 精品国产一区二区三区四区第35| 亚洲精品粉嫩美女一区| 99riav亚洲国产免费| 久99久视频精品免费| 午夜福利视频1000在线观看| 美女 人体艺术 gogo| 国产高清videossex| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 不卡一级毛片| 成人三级黄色视频| 亚洲熟妇熟女久久| 亚洲国产欧美一区二区综合| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 国产久久久一区二区三区| 搡老熟女国产l中国老女人| 欧美精品啪啪一区二区三区| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 一级a爱片免费观看的视频| 哪里可以看免费的av片| 成在线人永久免费视频| 在线观看午夜福利视频| 两人在一起打扑克的视频| 看免费av毛片| 欧美性长视频在线观看| 麻豆久久精品国产亚洲av| 男女下面进入的视频免费午夜 | 久久久久国内视频| 精品欧美一区二区三区在线| 看片在线看免费视频| 一级黄色大片毛片| 日本五十路高清| 国产精品二区激情视频| 成人午夜高清在线视频 | 亚洲电影在线观看av| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 一本一本综合久久| 午夜成年电影在线免费观看| 麻豆一二三区av精品| 国产高清视频在线播放一区| 哪里可以看免费的av片| 女人被狂操c到高潮| 欧美日韩精品网址| 日韩欧美一区视频在线观看| 一本久久中文字幕| 99热这里只有精品一区 | 国产视频一区二区在线看| 日韩精品免费视频一区二区三区| 亚洲国产欧美一区二区综合| 亚洲av成人av| 久9热在线精品视频| 看黄色毛片网站| 神马国产精品三级电影在线观看 | 91成人精品电影| 成人免费观看视频高清| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 男女那种视频在线观看| 亚洲av五月六月丁香网| 一进一出好大好爽视频| 欧美在线一区亚洲| 国产片内射在线| 老司机在亚洲福利影院| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 淫秽高清视频在线观看| 后天国语完整版免费观看| 亚洲第一电影网av| 亚洲专区国产一区二区| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 叶爱在线成人免费视频播放| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 在线观看www视频免费| 国产主播在线观看一区二区| а√天堂www在线а√下载| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 成人欧美大片| 国产99白浆流出| 国产精品久久久人人做人人爽| 色播亚洲综合网| 国产亚洲欧美精品永久| 超碰成人久久| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 亚洲欧美激情综合另类| 色播在线永久视频| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 国产精品九九99| 操出白浆在线播放| 亚洲第一电影网av| 精品不卡国产一区二区三区| 亚洲成人国产一区在线观看| 视频在线观看一区二区三区| 色尼玛亚洲综合影院| 国产精品免费视频内射| 久热这里只有精品99| 国产精品久久视频播放| 男女那种视频在线观看| 久久精品91蜜桃| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 嫁个100分男人电影在线观看| 两个人看的免费小视频| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 黄色女人牲交| 久久精品成人免费网站| 欧美成人免费av一区二区三区| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国产又色又爽无遮挡免费看| 又大又爽又粗| 日韩大尺度精品在线看网址| 日韩精品青青久久久久久| 91av网站免费观看| 成人三级做爰电影| 亚洲成人免费电影在线观看| 深夜精品福利| x7x7x7水蜜桃| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 哪里可以看免费的av片| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 欧美精品亚洲一区二区| 国产精品二区激情视频| 精品一区二区三区四区五区乱码| www日本在线高清视频| 亚洲激情在线av| 人人妻人人澡人人看| 国产色视频综合| 超碰成人久久| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 国产精品久久视频播放| 国产激情欧美一区二区| 国产成人系列免费观看| 久久久久九九精品影院| netflix在线观看网站| 亚洲片人在线观看| 欧美日韩一级在线毛片| 岛国在线观看网站| 老汉色av国产亚洲站长工具| 免费在线观看成人毛片| 国产精品99久久99久久久不卡| 亚洲国产欧洲综合997久久, | 9191精品国产免费久久| 午夜福利欧美成人| 一本久久中文字幕| 看黄色毛片网站| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 在线观看日韩欧美| av电影中文网址| 88av欧美| 在线av久久热| 国产精品1区2区在线观看.| 午夜福利免费观看在线| 久久热在线av| 欧美在线黄色| 亚洲人成伊人成综合网2020| 一级a爱视频在线免费观看| 国产三级黄色录像| 亚洲精品国产一区二区精华液| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 听说在线观看完整版免费高清| 中出人妻视频一区二区| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 黑丝袜美女国产一区| 高清在线国产一区| 久久久久久九九精品二区国产 | 国产精品九九99| 亚洲精品国产一区二区精华液| 亚洲精品中文字幕在线视频| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 91字幕亚洲| 欧美黑人巨大hd| 真人做人爱边吃奶动态| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 午夜激情福利司机影院| 久热爱精品视频在线9| 久久久久久大精品| 国产高清videossex| 男人舔奶头视频| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 动漫黄色视频在线观看| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| www.www免费av| 一本综合久久免费| 欧美激情 高清一区二区三区| 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 嫩草影院精品99| 国产在线精品亚洲第一网站| 国产又爽黄色视频| 两性夫妻黄色片| 日韩精品中文字幕看吧| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 亚洲avbb在线观看| 成人国产一区最新在线观看| 视频在线观看一区二区三区| 久久久久免费精品人妻一区二区 | 狠狠狠狠99中文字幕| 久久青草综合色| 日韩欧美一区视频在线观看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 欧美日韩乱码在线| 久久青草综合色| 两个人免费观看高清视频| 两人在一起打扑克的视频| 欧美亚洲日本最大视频资源| 性色av乱码一区二区三区2| 黄色毛片三级朝国网站| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 一区福利在线观看| 国产真实乱freesex| 麻豆成人av在线观看| 国产黄色小视频在线观看| 在线国产一区二区在线| 亚洲av美国av| √禁漫天堂资源中文www| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 嫁个100分男人电影在线观看| 中文字幕精品免费在线观看视频| 亚洲久久久国产精品| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 日韩欧美国产一区二区入口| 亚洲五月婷婷丁香| 亚洲一区中文字幕在线| 久久久久久久午夜电影| 级片在线观看| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产极品粉嫩免费观看在线| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲午夜理论影院| 男女床上黄色一级片免费看| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲国产精品sss在线观看| 一进一出抽搐动态| 妹子高潮喷水视频| 高清毛片免费观看视频网站| 婷婷亚洲欧美| 欧美激情高清一区二区三区| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产91精品成人一区二区三区| 欧美另类亚洲清纯唯美| 欧美日本亚洲视频在线播放| 黄片大片在线免费观看| 欧美日韩精品网址| 免费看美女性在线毛片视频| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 国产av不卡久久| 黄色a级毛片大全视频| 亚洲成人国产一区在线观看| 午夜久久久在线观看| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 精品一区二区三区四区五区乱码| 国产爱豆传媒在线观看 | 免费人成视频x8x8入口观看| 午夜日韩欧美国产| 天堂动漫精品| www.熟女人妻精品国产| 亚洲第一av免费看| 首页视频小说图片口味搜索| 男人舔女人的私密视频| 亚洲人成电影免费在线| 久久婷婷成人综合色麻豆| 男人的好看免费观看在线视频 | 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 亚洲熟妇熟女久久| 国内精品久久久久精免费| 日韩欧美三级三区| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 久久亚洲精品不卡| 色av中文字幕| 99re在线观看精品视频| 91麻豆av在线| 成人三级黄色视频| 久久草成人影院| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 欧美中文日本在线观看视频| 精品人妻1区二区| 免费在线观看亚洲国产| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 日韩有码中文字幕| 麻豆久久精品国产亚洲av| 制服诱惑二区| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 在线观看免费日韩欧美大片| 精品不卡国产一区二区三区| 又大又爽又粗| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 99国产综合亚洲精品| 搡老熟女国产l中国老女人| 叶爱在线成人免费视频播放| 一本大道久久a久久精品| 男女之事视频高清在线观看| 亚洲专区字幕在线| 国产精品精品国产色婷婷| 麻豆一二三区av精品| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 亚洲中文日韩欧美视频| 欧美性猛交黑人性爽| 一区二区三区国产精品乱码| 国产三级黄色录像| 亚洲av成人一区二区三| 极品教师在线免费播放| 国产成+人综合+亚洲专区| 搡老妇女老女人老熟妇| 757午夜福利合集在线观看| 亚洲五月天丁香| 欧美亚洲日本最大视频资源| 久久这里只有精品19| 欧美在线黄色| 最近最新中文字幕大全电影3 | 男女视频在线观看网站免费 | 久久久久久免费高清国产稀缺| 在线观看免费日韩欧美大片| 999久久久精品免费观看国产| 男人操女人黄网站| 国产av在哪里看| 精品午夜福利视频在线观看一区|