決明子對(duì)老齡大鼠晶狀體抗氧化作用的有效活性部位研究

王彩萍

（太原市晉源區(qū)姚村鎮(zhèn)衛(wèi)生院，山西 太原 030054）

決明子為豆科植物決明Cassia obtusifolia L.或小決明Cassia toar L.的干燥成熟種子，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。其性味甘、苦、咸、微寒，具有祛風(fēng)散熱、清肝明目之功效，常用于治療目赤腫痛、青盲、雀目（白內(nèi)障）等病癥［1］。

白內(nèi)障是世界上首位致盲因素，同時(shí)也是我國(guó)第一位致盲眼病。國(guó)外學(xué)者提出晶狀體氧化損傷是白內(nèi)障形成的啟動(dòng)因素［2］，且晶狀體脂質(zhì)過氧化損傷及抗氧化能力變化與年齡相關(guān)［3］?，F(xiàn)代藥理學(xué)表明，決明子具有顯著的抗氧化作用，而決明子對(duì)晶狀體的抗氧化作用尚無報(bào)道。我們采用決明子不同提取部位干預(yù)老齡大鼠，考察晶狀體脂質(zhì)過氧化及抗氧化能力的指標(biāo)，如谷光苷肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）等，從而為決明子清肝明目的功效尋找科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 80只Wistar大鼠，雌雄各半，其中 10 只體重（200±20）g，余 70 只體重（500±50）g，由山西省中醫(yī)藥研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室提供，合格證號(hào)：晉動(dòng)（證）字第 A00－002 號(hào)。

1.1.2 藥品與儀器 決明子購(gòu)自山西中醫(yī)學(xué)院第二中醫(yī)院藥房，經(jīng)山西省藥品檢驗(yàn)所中藥室鑒定為正品；SOD、MDA、GSH試劑盒均購(gòu)自北京北化康泰臨床試劑有限公司，批號(hào)分別為090422、090520、090520；其他試劑均為分析純；Cary-50紫外可見光分光光度儀為美國(guó)瓦里安公司生產(chǎn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)藥品制備 決明子粉碎成粗粉，分別采用極性由小到大的溶劑石油醚、乙酸乙酯、70%乙醇、水及水提醇沉的方法對(duì)其進(jìn)行提取，加熱回流3次，合并提取液，過濾后在水浴上充分揮干，即得提取物。決明子超臨界提取物由中國(guó)科學(xué)院煤炭化學(xué)研究院超臨界萃取所得。實(shí)驗(yàn)時(shí)各提取物用2%吐溫-80 蒸餾水溶解配制［1］。

1.2.2 分組與給藥 將體重（200±20）g的大鼠設(shè)為正常對(duì)照組，體重（500±50）g的大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、超臨界提取物組、石油醚提取物組、乙酸乙酯提取物組、70%乙醇提取物組、水提取物組、水提醇沉物組7組，每組10只。分別于實(shí)驗(yàn)開始時(shí)、第10天、第20天、第30天稱重，正常對(duì)照組和空白對(duì)照組灌胃溶媒 （含2%吐溫－80的蒸餾水，0.1 mL/10 g），余6組分別灌胃相應(yīng)藥物（1 g/kg）30 d。第30天處死動(dòng)物行眼球摘除術(shù)，包入預(yù)先做好標(biāo)記的錫箔紙中，投入液氮速凍，-80℃保存。取出眼球放置冰臺(tái)，自赤道部切開眼球，完整取出晶狀體，以生理鹽水配制成100 g/L勻漿液，分別按照GSH、SOD、MDA試劑盒的要求進(jìn)行測(cè)定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 對(duì)大鼠體重的影響

實(shí)驗(yàn)過程中，正常對(duì)照組、空白對(duì)照組大鼠體重持續(xù)增加，正常對(duì)照組比空白對(duì)照組大鼠體重增幅大。第30天，超臨界提取物組、乙酸乙酯提取物組、70%乙醇提取物組、水提取物組大鼠體重增加，與空白對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；石油醚提取物組、水提醇沉物組大鼠體重與空白對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.2 對(duì)大鼠晶狀體中GSH活性、SOD活性、MDA含量的影響

結(jié)果見表1。

表1 決明子不同提取部位對(duì)老齡大鼠晶狀體中SOD、GSH和MDA的影響 （±s）

表1 決明子不同提取部位對(duì)老齡大鼠晶狀體中SOD、GSH和MDA的影響 （±s）

注：與正常對(duì)照組比較，1）P<0.05，2）P<0.01；與空白對(duì)照組比較，3）P<0.05，4）P<0.01

MDA（μmoL/mg）正常對(duì)照組 10 41.33±4.07 38.06±10.15 0.60±0.18空白對(duì)照組 8 34.74±4.321） 16.75±8.072） 1.74±0.502）超臨界提取物組 9 43.01±5.414） 33.34±12.144） 0.85±0.234）石油醚提取物組 8 34.97±6.23 20.93±11.26 1.54±0.45乙酸乙酯提取物組 9 38.96±5.173） 29.95±13.393） 1.26±0.423）70%乙醇提取物組 8 39.24±4.913） 28.84±13.033） 1.18±0.324）水提取物組 9 39.84±5.263） 31.64±9.754） 0.98±0.374）水提醇沉物組 9 34.66±3.76 18.73±8.46 1.47±0.43組別 n GSH（U/mg）SOD（U/mg）

由表1可以看出，與正常對(duì)照組比較，空白對(duì)照組 GSH、SOD 顯著降低，MDA 明顯增高 （P＜0.05，P＜0.01）。與空白對(duì)照組比較，超臨界提取物組、乙酸乙酯提取物組、70%乙醇提取物組、水提取物組GSH、SOD 顯著升高，MDA 含量明顯下降（P＜0.05，P＜0.01）；石油醚提取物組、水提醇沉物組與空白對(duì)照組GSH、SOD、MDA比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

3 討 論

老齡生物可隨年齡遞增而出現(xiàn)全身各器官系統(tǒng)的退行性改變，其機(jī)制之一是老齡生物組織和細(xì)胞的抗氧化能力下降。體重（200±20）g的大鼠各器官發(fā)育水平相當(dāng)于人類20歲即青年水平，體重（500±50）g的大鼠相當(dāng)于60歲即進(jìn)入老年水平。隨年齡增長(zhǎng)，大鼠晶狀體GSH、SOD呈降低趨勢(shì)，而MDA表現(xiàn)為升高趨勢(shì)，說明大鼠晶狀體抗氧化能力下降，則可能發(fā)生氧化損傷，進(jìn)而形成白內(nèi)障。這與有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道基本一致［3-6］。

與空白對(duì)照組比較，超臨界提取物組、70%乙醇提取物組、水提取物組、乙酸乙酯提取物組的GSH、SOD及MDA差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?？梢姏Q明子超臨界提取物部位、70%乙醇提取物部位、水提取物部位、乙酸乙酯提取物部位都能一定程度上抗老齡大鼠晶狀體氧化，超臨界提取物部位抗氧化作用最佳，且為決明子清肝明目的功效尋找到科學(xué)依據(jù)之一——抗晶狀體氧化作用。

［1］張榮，王永輝，周然，等.決明子降血脂有效部位及其量效關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國(guó)藥物與臨床，2005，5（3）：183-187.

［2］Spector A.Oxidative stress-induced cataract mechanism of action［J］.Faseb J，1995，9（12）：1 173-1 179.

［3］盧艷，趙可浩，李林，等.中藥對(duì)大鼠晶狀體老化過程中脂質(zhì)過氧化和抗氧化能力的干預(yù)作用［J］.國(guó)際眼科雜志，2008，8（6）：1 113-1 116.

［4］亓?xí)粤?，張宏?guó)，張靜，等.補(bǔ)陽還五湯對(duì)大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷的作用［J］.國(guó)際眼科雜志，2008，8（4）：732-739.

［5］Karslioglu I，Ertekin M V，Taysi S，et al.Radioprotective effects of metlatonin on radiation-induced cataract［J］.J Radint Res，2005，46（2）：277-282.

［6］Doganay S，Borazan M，Iraz M，et al.The effect of resveratrol in experimental cataract model formed by sodium selenite［J］.Curr Eye Res，2006，31（2）：147-153.