腎炎Ⅱ號(hào)水丸對(duì)IgAN大鼠腎小管間質(zhì)損傷的實(shí)驗(yàn)研究

李二敏

（黑龍江省中醫(yī)研究院腎內(nèi)科,黑龍江哈爾濱 150036）

腎炎Ⅱ號(hào)水丸對(duì)IgAN大鼠腎小管間質(zhì)損傷的實(shí)驗(yàn)研究

李二敏

（黑龍江省中醫(yī)研究院腎內(nèi)科,黑龍江哈爾濱 150036）

目的觀察腎炎Ⅱ號(hào)水丸對(duì)IgAN大鼠腎小管間質(zhì)損傷的作用機(jī)制。方法 口服牛血清白蛋白酸化水和尾靜脈注射牛血清白蛋白及葡萄球菌腸毒素B復(fù)合方法建立IgAN大鼠模型,觀測(cè)腎炎Ⅱ號(hào)水丸對(duì)IgAN大鼠尿紅細(xì)胞、尿蛋白、核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）和巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子（MIF）在腎小管-間質(zhì)的表達(dá)情況及定量分析。結(jié)果腎炎Ⅱ號(hào)水丸低、高劑量組上述檢測(cè)指標(biāo)分別與雷公藤對(duì)照組比較均有顯著性差異（P＜0.05）。結(jié)論腎炎Ⅱ號(hào)水丸對(duì)IgAN大鼠腎小管間質(zhì)損傷有顯著的防治作用。

IgA腎病;腎小管間質(zhì);腎炎Ⅱ號(hào)水丸;核轉(zhuǎn)錄因子-κB;大鼠

本文通過(guò)建立IgAN大鼠模型觀測(cè)腎炎Ⅱ號(hào)水丸對(duì)IgAN大鼠腎小管間質(zhì)損傷的防治作用,報(bào)告如下。

1 實(shí)驗(yàn)材料

動(dòng)物:健康雄性Wistar大鼠 60只,體重（200±20）g。藥物:腎炎Ⅱ號(hào)水丸,雷公藤多甙片,牛血清白蛋白（BSA）,葡萄球菌腸毒素 B（SEB）,NF-κBp65鼠多克隆抗體,MIF多克隆抗體。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 動(dòng)物分組與給藥 60只大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組（A）,模型對(duì)照組（B）,腎炎Ⅱ號(hào)水丸高劑量組（C）,腎炎Ⅱ號(hào)水丸低劑量組（D）,陽(yáng)性藥物對(duì)照組（E）,每組12只。A組:隔日灌服0.1%稀鹽酸配制酸化水,每次2 mL,共16周。B組:隔日灌服牛血清白蛋白（BSA）直至 16周（100 mg/kg,用0.1%稀鹽酸配制）,第6周尾靜脈注射BSA（10 mg/kg,以生理鹽水稀釋）,每日1次,連續(xù) 3次,第8周尾靜脈注射葡萄球菌腸毒素B（SEB）（0.4 mg/kg,生理鹽水稀釋）,每周1次,連續(xù)3次。C、D、E組造模方法與B組同,于第6周始C組應(yīng)用腎炎Ⅱ號(hào)水丸3.6 g/（kg?d）,灌胃給藥至第16周末;D組應(yīng)用腎炎Ⅱ號(hào)水丸0.9 g/（kg?d）,灌胃給藥至第16周末;E組開(kāi)始應(yīng)用雷公藤多甙片8.1 mg/（kg?d）,灌胃給藥至第 16周末。

2.2 實(shí)驗(yàn)取材 從第6周起,每周查尿紅細(xì)胞及尿蛋白,在16周末,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物禁食12 h,摘除眼球取血4～5 mL,然后斷頸處死大鼠,腹部開(kāi)口剖取雙腎,處理后分成4份,以備免疫組化檢測(cè)及光鏡檢測(cè)。將大鼠血于3 000 r/min離心,取血清分裝,-20℃保存。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用SPSS 11.5 for Windows統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料多組間比較用方差分析,結(jié)果以均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示;計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn);等級(jí)資料用Ridit分析,組間比較用秩和檢驗(yàn)。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的一般情況 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中大鼠死亡A組2只,E組1只,C組1只（具體原因不明）。靜脈注射BSA及SEB后,B組大鼠精神欠佳,披毛蓬亂,部分出現(xiàn)腹瀉,1周左右有所緩解;C、D、E組大鼠上述表現(xiàn)較輕,3～5 d基本恢復(fù)正常;A組大鼠精神狀態(tài)始終較佳。

3.2 造模后血尿檢測(cè)情況比較 見(jiàn)表1。

表1 造模第6,8周末各組血尿檢測(cè)情況比較

3.3 腎炎Ⅱ號(hào)水丸對(duì)IgAN大鼠腎小管間質(zhì)NF-κB 的影響 見(jiàn)表2。

表2 各組大鼠腎小管間質(zhì)NF-κB的表達(dá)情況比較（±s）

表2 各組大鼠腎小管間質(zhì)NF-κB的表達(dá)情況比較（±s）

注:與A組比較,###P＜0.001;與B組比較,▲▲▲P＜0.001;與E、D組比較,△P＜0.05。

組別 n NF-κB/面密度A組 10 0.201 7±0.148 9 B組 11 0.335 4±0.202 6###C 組 11 0.243 1±0.129 0▲▲▲△D組 12 0.261 8±0.128 2▲▲▲E 組 10 0.262 8±0.127 2▲▲▲

3.4 腎炎Ⅱ號(hào)水丸對(duì)IgAN大鼠腎小管間質(zhì)MIF的影響 見(jiàn)表3。

表3 各組大鼠腎小管間質(zhì)MIF的表達(dá)情況比較（±s）

表3 各組大鼠腎小管間質(zhì)MIF的表達(dá)情況比較（±s）

注:與A組比較,###P＜0.001;與B組比較,▲▲▲P＜0.001;與E組比較,△△P＜0.01。

組別 n MIF/面密度A組 10 0.163 9±0.014 7 B組 11 0.341 4±0.022 5###C 組 11 0.222 1±0.016 8▲▲▲△△D組 12 0.244 5±0.013 1▲▲▲E 組 10 0.249 1±0.011 3▲▲▲

4 討論

本實(shí)驗(yàn)證明,腎炎Ⅱ號(hào)水丸高、低劑量組大鼠臨床癥狀及各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)均好于雷公藤治療組,尤以高劑量組與雷公藤治療組比較差異顯著（P＜0.05）[1-3]。治療前后觀察,腎炎Ⅱ號(hào)水丸能明顯降低IgAN大鼠尿中紅細(xì)胞,自身前后對(duì)比及與雷公藤對(duì)照組比較均有顯著差異（P＜0.01）,說(shuō)明腎炎Ⅱ號(hào)水丸的止血效果突出[4-5]。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)模型組大鼠NF-κB和MIF的表達(dá)強(qiáng)度和部位顯著多于腎炎Ⅱ號(hào)水丸高、低劑量組,說(shuō)明腎炎Ⅱ號(hào)水丸可能通過(guò)降低NF-κB的活性進(jìn)而減少腎組織MIF等炎癥介質(zhì)水平,調(diào)節(jié)炎癥細(xì)胞因子,減輕炎癥反應(yīng)對(duì)腎小球、腎小管間質(zhì)的損傷,進(jìn)而改善腎小管間質(zhì)的功能而發(fā)揮其治療作用[6-7]。

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[1]陳孝文,劉華鋒.從腎小管-間質(zhì)纖維化發(fā)病機(jī)制探討其中西醫(yī)結(jié)合防治新策略[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志,2008,9（1）:1-4.

[2]陳香美,陳以平,李平,等.1 016例 IgA腎病患者中醫(yī)證候的多中心流行病調(diào)查及相關(guān)因素分析[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志,2006,26（3）:197-201.

[3]高國(guó)青.IgA腎病的中醫(yī)研究現(xiàn)狀[J].山西中醫(yī)雜志,2006,22（2）:58-60.

[4]王今朝,黃彥彬.再析張琪教授治療IgA腎病血尿的經(jīng)驗(yàn)[J].黑龍江中醫(yī)藥,2005（2）:4-5.

[5]涂小剛,程曉霞.IgA腎病發(fā)病機(jī)理的研究新進(jìn)展[J].吉林醫(yī)學(xué),2007,28（3）:426-427.

[6]田甜,劉平夫.劉平夫教授治療腎性血尿經(jīng)驗(yàn)[J].吉林中醫(yī)藥,2007,27（4）:12-13.

[7]郭宏章,邵丹,鄭京.IgA腎病中醫(yī)研究進(jìn)展[J].長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2008,24（1）:18-19.

R285.5

A

1007-4813（2010）01-0010-02

李二敏（1982-）,女,碩士研究生。研究方向:中西醫(yī)結(jié)合腎病研究。

（

2009-12-09）