祛斑養(yǎng)顏丸的薄層色譜定性鑒別研究

李全有

祛斑養(yǎng)顏丸是我院自制制劑(豫藥制字 Z05050039),臨床應(yīng)用時(shí)間久,療效穩(wěn)定確切。主要由當(dāng)歸、熟地、川穹、女貞子、枸杞子、墨旱蓮、紅花、丹參、白芷、地黃、黃芩等組成,經(jīng)粉碎泛丸而成的純中藥制劑,具有活血祛瘀、滋腎養(yǎng)肝功效,主要用于面部色素沉淀(蝴蝶斑)為了保證制劑的質(zhì)量和臨床療效,采用薄層色譜法對(duì)制劑中的當(dāng)歸、白芷進(jìn)行定性鑒別分析。結(jié)果表明,當(dāng)歸、白芷都具有明顯的特征斑點(diǎn),且斑點(diǎn)清晰。其結(jié)果簡便、快速,為祛斑養(yǎng)顏丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了定性的檢測(cè)方法。

1 實(shí)驗(yàn)材料與制備

1.1 祛斑養(yǎng)顏丸(安陽市中醫(yī)院自制制劑)三批,對(duì)照藥材當(dāng)歸、白芷(符合中國藥典質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)),所用試劑乙醚、乙酸乙酯、苯、石油醚、醋酸乙酯等試劑均為分析純,硅膠 G(青島海洋化工廠產(chǎn)品)。

2 處方與制備

2.1 處方 當(dāng)歸、熟地、川穹、女貞子、枸杞子、墨旱蓮、紅花、丹參、白芷、地黃、黃芩等。

2.2 制備 取上方藥品,按生產(chǎn)工藝粉碎,泛丸,干燥,打光即得。本品為棕褐色水丸,味微苦。

圖1 祛斑養(yǎng)顏丸當(dāng)歸的鑒別薄層層析

3 定性鑒別

薄層板的制備 硅膠 G和 0.5%羧甲基纖維素鈉溶液、0.4%NaOH溶液以 1:2:1的比例于研缽中充分研勻,均勻涂布于 5 cm×20 cm玻璃板上,厚約 0.5mm,室溫晾干后,經(jīng)110℃活化 60min,置于干燥器內(nèi),備用。

3.1 當(dāng)歸的鑒別 供試品溶液的制備稱取祛斑養(yǎng)顏丸 2 g,研細(xì),加乙醇 20 ml,超聲處理 15min,過濾,濾液濃縮至約 1 ml,作為供試品溶液。當(dāng)歸對(duì)照藥材液的制備取當(dāng)歸對(duì)照藥材粉末 1g,按供試品液同法制備。陰性對(duì)照液的制備按處方量自制缺當(dāng)歸的陰性對(duì)照樣品,稱取本品 2 g,按供試品液同法制備。薄層層析按薄層色譜法試驗(yàn)[1],吸取當(dāng)歸對(duì)照藥材液 4μl,供試品液和陰性對(duì)照液各 10μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以苯-醋酸乙酯(19:1)為展開劑,上行展開 18 cm取出,晾干,置紫外光燈(365nm)下檢視[2]。供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯三個(gè)相同的亮藍(lán)白色熒光斑點(diǎn),而缺當(dāng)歸的陰性對(duì)照色譜在相應(yīng)的位置上無斑點(diǎn)。

3.2 白芷的鑒別[1]取本品 4 g,研細(xì),加甲醇 10ml,浸泡lh,時(shí)時(shí)振搖,濾過,濾液蒸干,殘?jiān)右宜嵋阴?1ml使溶解,作為供試品。按制劑處方比例與工藝,除去白芷,按供試品溶液制備方法制成陰性對(duì)照溶液。另取白芷藥材約 1g,同法制成對(duì)照藥材溶液。吸取上述 3種溶液各 8μl,分別點(diǎn)于同一硅膠 G薄層板上,以石油醚-乙醚(3∶2)為展開劑,展開,取出,晾干,置于紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的熒光斑點(diǎn),陰性對(duì)照色譜無干擾。結(jié)果見圖 2。

圖2 祛斑養(yǎng)顏丸白芷的鑒別薄層層析

4 討論

當(dāng)歸醇溶性成分有香莢蘭酸(vanillieaeid)、阿魏酸(feru lieaeid)、6-甲氧基-7-羥基香豆精;脂溶性成分蒿苯內(nèi)酯、十四醇-1、棕桐酸、新當(dāng)歸內(nèi)酯(Angellicide)等,分子色譜分析當(dāng)歸的活性成分蒿本內(nèi)酯和阿魏酸[3,4]。白芷飽和烴類含量最高,在揮發(fā)油中約占 36.33%(如甲基-環(huán)癸烷 22.4%,環(huán)十二碳烷 4.69%,環(huán)十四碳烷 4.17%等);其次為醇類,在揮發(fā)油中占 29.79%(如1-十二烷醇 8.6%,十三烷醇 5.53%,1-十四烷醇 5.10%等);以及各種不飽和烴類,在揮發(fā)油中占 16.2%,三者之和占總揮發(fā)油的82.32%。此外,還有少量的醛、酮、酯以及苯的衍生物等,歐前胡素、異歐前胡素和水合氧化前胡素是白芷中的主要成分,作為對(duì)照品可以鑒定白芷。我院生產(chǎn)的祛斑養(yǎng)顏丸采用道地藥材,恪守傳統(tǒng)炮制方法,療效確切。隨著時(shí)代發(fā)展,傳統(tǒng)的檢驗(yàn)方法不能滿足定性定量的要求,薄層色譜法是定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。用方中當(dāng)歸、白芷進(jìn)行了化學(xué)成分定性鑒別。經(jīng)試驗(yàn)證明,本文所建立的當(dāng)歸、白芷薄層層析條件,分離效果較好,方法簡便易行,結(jié)果準(zhǔn)確可靠,重復(fù)性和可鑒別性良好 ,從而可為祛斑養(yǎng)顏丸的質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。

[1]中國藥典,2005:一部,附錄.

[2]馬琳,徐麗.接骨片的質(zhì)量控制研究.藥學(xué)實(shí)踐雜志,2000,18(5):307-308.

[3]孔亮,鄒漢法.以血清白蛋白為固定相的分子生物色譜分析幾種中藥活性成分的研究.高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報(bào),2000,21(1):36-40.

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