植物蛋白原料抗?fàn)I養(yǎng)因子及其消除方法的研究進(jìn)展

浙江萬里學(xué)院生物與環(huán)境學(xué)院 高有領(lǐng) 汪財(cái)生 朱秋華 錢國英＊

在水產(chǎn)養(yǎng)殖中，飼料是很重要的一個(gè)組成部分，魚粉是傳統(tǒng)的飼料蛋白源，它也是飼料中價(jià)格最高和最重要的組成成分。但是隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，在不遠(yuǎn)的將來魚粉將會(huì)出現(xiàn)短缺現(xiàn)象，F(xiàn)AO估計(jì)世界魚粉供應(yīng)量只會(huì)維持到2015年（FAO，2002）。此外，魚粉是價(jià)格較高的蛋白源，經(jīng)濟(jì)上的壓力將會(huì)使得人們考慮降低對(duì)魚粉的依賴性，并去尋找一些價(jià)格較低，更合適的魚粉替代物（Tacon，2004）。此外，由于現(xiàn)有魚粉資源競(jìng)爭(zhēng)的加劇以及人們?cè)谑称钒踩?、環(huán)境保護(hù)方面意識(shí)的提高，均會(huì)促使水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)尋找合適的魚粉替代物。以大豆為代表的植物蛋白具有很好的應(yīng)用潛力（Maitra 等，2007；Refstie 等，2006a）。 但是植物蛋白原料也存在缺點(diǎn)，如含有各種各樣的抗?fàn)I養(yǎng)因子（ANFs）。正因?yàn)榭範(fàn)I養(yǎng)因子的存在，植物蛋白原料的加工處理對(duì)于其可利用性，顯得尤為關(guān)鍵。本文將對(duì)目前植物蛋白抗?fàn)I養(yǎng)因子及植物蛋白原料主要處理方法的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期能為后續(xù)的植物蛋白原料處理研究提供參考。

1 植物蛋白源

水產(chǎn)飼料中使用主要植物蛋白源有：豆粕、油菜籽、羽扇豆籽、豌豆、葵籽餅、棉籽、苜蓿葉、芥子油餅、芝麻等。而豆粕被認(rèn)為是目前最適宜的魚粉替代物（Dersjant-Li，2002），其產(chǎn)量在所有的植物蛋白中是最多的。豆粕因?yàn)榫哂休^高的蛋白質(zhì)含量，相對(duì)平衡的氨基酸配比，因此也被認(rèn)為是一種高質(zhì)量的植物蛋白源（Storebakken等，2000）。除豆粕外，油菜籽餅和棉籽餅在水產(chǎn)飼料中也是應(yīng)用較多的植物蛋白源。但是植物蛋白源也存在缺點(diǎn)，除了氨基酸的組成較不合理之外，一般都含有各種各樣的抗?fàn)I養(yǎng)因子。由于抗?fàn)I養(yǎng)因子的存在，在水產(chǎn)飼料中，植物蛋白只能部分替代魚粉，而不能全部替代，而且，有時(shí)候部分替代也會(huì)對(duì)魚的生長(zhǎng)性能產(chǎn)生負(fù)面影響（Refstie等，1998）。

2 抗?fàn)I養(yǎng)因子

植物蛋白源中的抗?fàn)I養(yǎng)因子多種多樣，它們大至可分為4種：影響蛋白質(zhì)利用和消化的因子，如蛋白酶抑制因子；影響微量元素利用和消化的因子，如植酸；影響維生素利用的因子，如抗維生素因子；其他如毒枝菌素、植物雌激素、生物堿和異黃酮等（Francis等，2001）。常用植物蛋白原料中的主要抗?fàn)I養(yǎng)因子見表1。本文主要介紹胰蛋白酶抑制劑、植酸、植物凝集素、非淀粉多糖硫化葡萄糖苷等主要的抗?fàn)I養(yǎng)因子。

表1 常用植物蛋白原料中的主要抗?fàn)I養(yǎng)因子

2.1 胰蛋白酶抑制劑 胰蛋白酶抑制劑在許多植物蛋白源中都存在，它主要抑制魚類胰島素和胰凝乳蛋白酶的活性 （Storebakken等，2000），從而影響蛋白質(zhì)消化率、飼料轉(zhuǎn)化率和魚體肉質(zhì)。根據(jù)胰蛋白酶抑制劑作用對(duì)象的不同，可分為4種類型，即：絲氨酸抑制劑、半胱氨酸抑制劑、金屬抑制劑和天冬氨酸抑制劑（Chong等，2002），其中絲氨酸抑制劑和半胱氨酸抑制劑在植物的種子和貯藏組織中大量存在。

胰蛋白酶抑制劑已被證實(shí)對(duì)許多魚類的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生不良影響。Krogdahl等（1994）在虹鱒魚飼料中添加0.37%～1.48%的大豆胰蛋白酶抑制劑時(shí)，會(huì)使得蛋白質(zhì)的消化率從93%降至70%。對(duì)于鮭魚，除了之前已經(jīng)確認(rèn)飼料添加大豆胰蛋白酶抑制劑會(huì)降低魚體增重、蛋白質(zhì)和脂肪的消化率以及腸道的胰島素之外（Olli等，1994），后來的研究發(fā)現(xiàn)飼料中添加從土豆中分離出來的蛋白酶抑制劑，除了蛋白質(zhì)的消化率有降低作用以外，對(duì)于脂肪的消化率無顯著影響，而且能使魚體的特殊生長(zhǎng)率（SGR）升高14%和31%（Sveier等，2001），其原因是由于土豆蛋白酶抑制劑改變了胃蛋白酶的活性以及影響了腸道不同部位的胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧肽酶A和羧肽酶B引起的。

由于各種魚類對(duì)胰蛋白酶抑制劑的耐受能力不一樣，因此所產(chǎn)生的影響也有顯著差異。鯉魚對(duì)于胰蛋白酶抑制劑有較強(qiáng)的耐受能力，用胰蛋白酶抑制劑含量達(dá)24.8 mg/g和含量為1.3～8.3 mg/g的多種飼料飼喂時(shí)，魚體生長(zhǎng)性能無顯著差異（Makkar和 Becker，1999）。 Rumsey（1991）報(bào)道，飼料中低于5 mg/g胰蛋白酶抑制劑不會(huì)對(duì)虹鱒魚的生長(zhǎng)產(chǎn)生很大的影響。

除了研究胰蛋白酶抑制劑對(duì)魚的生長(zhǎng)性能的影響以外，一些學(xué)者分別用體外法和體內(nèi)法研究了其對(duì)魚的消化蛋白酶活性的影響。Alarcon等（1999）用體外法測(cè)定了植物蛋白提取物對(duì)金頭鯛（Sparus aurata）消化蛋白酶的作用，結(jié)果表明，不同的植物蛋白提取物對(duì)消化蛋白酶活性的抑制率為25%～50%。El-Sayed等（2000）用體內(nèi)法研究了經(jīng)不同處理的豆粕和小麥麩對(duì)尼羅羅非魚（Oreochromis niloticus）消化蛋白酶活性的影響，結(jié)果觀察到對(duì)消化蛋白酶的抑制率為67.4%～87.2%。另有通過豆類提取物對(duì)消化蛋白酶活性的研究，發(fā)現(xiàn)豆類提取物不會(huì)影響胃蛋白酶活性，但對(duì)腸的蛋白酶卻有顯著影響 （Alarcon等，2001）。 Maitra 等（2007）用體外法測(cè)定了大豆、草豆、黑綠豆和馬豆的種子提取物對(duì)南亞野鯪（Labeo rohita）消化蛋白酶活性的影響，并比較了這些植物對(duì)蛋白酶活性所產(chǎn)生的抑制效果，結(jié)果表明它們的抑制率分別超過了30%、50%、50%和40%。

2.2 植酸 植酸普遍存在于植物種子中，它是植物蛋白質(zhì)原料中主要的抗?fàn)I養(yǎng)因子之一。常見的植物蛋白質(zhì)原料如豆粕、菜籽餅和芝麻餅中都含有一定量的植酸，例如：豆粕為10～15 g/kg，菜籽餅為50～74 g/kg，芝麻餅為24 g/kg。植酸能與磷結(jié)合形成植酸磷，魚類的消化系統(tǒng)中由于缺乏植酸酶，因此不能利用植酸磷。植酸還能與一些金屬離子形成穩(wěn)定的不溶性絡(luò)合物，從而降低了這些礦物質(zhì)元素的利用率，甚至引起礦物質(zhì)元素缺乏癥。此外，植酸還能與蛋白質(zhì)形成難溶的植酸蛋白質(zhì)絡(luò)化物，影響魚體對(duì)蛋白質(zhì)的吸收利用（Storebakken 等，2000）。

Sajjadi和 Garter（2004a）在鮭魚的飼料中的添加10 g/kg的植酸鈉之后，發(fā)現(xiàn)額外添加植酸鈉并不會(huì)對(duì)飼料采食量和魚體增重產(chǎn)生顯著影響，也不會(huì)減弱胰蛋白酶的活性，但是卻會(huì)顯著降低蛋白質(zhì)消化率。Riche和Garling（2004）對(duì)羅非魚也做了類似的研究，研究包括兩個(gè)試驗(yàn)，在第一個(gè)試驗(yàn)中，在所采用的部分豆粕飼料中添加了植酸酶，目的是利用植酸酶來酶解豆粕飼料的植酸，從而探究飼料中植酸含量降低對(duì)魚體氮的貯留率的影響。另一試驗(yàn)直接往飼料中添加不同量的植酸，以確定其對(duì)氮的貯留率的影響。最終所得到的研究結(jié)果與前述研究正好相反，即植酸不會(huì)降低氮的貯留率，而且豆粕中的植酸酶會(huì)降低氮的貯留率。Denstadli等（2006a）探討了不同劑量植酸對(duì)鮭魚生長(zhǎng)和礦物質(zhì)元素的利用的影響，認(rèn)為鮭魚對(duì)植酸的耐受水平為4.7～10.0 g/kg，且礦物質(zhì)元素的利用率隨著植酸含量的增多而降低。

Helland等（2006）就不同水平植酸對(duì)大西洋鮭魚的骨骼發(fā)育和礦物質(zhì)元素在體內(nèi)積存的影響進(jìn)行了研究，結(jié)果表明，植酸對(duì)于魚體和脊柱磷的積累無顯著影響，但是，高水平的植酸卻對(duì)Ca、Mg、Ca∶P和脊柱中Zn的積累產(chǎn)生了負(fù)面影響，同時(shí)，出現(xiàn)一種比較新奇的脊柱病理現(xiàn)象，即超密度脊柱，隨著飼料中植酸水平的升高，超密度脊柱現(xiàn)象從最初的16%升至45%～60%。

2.3 植物凝集素 植物凝集素主要存在于植物的籽實(shí)中，是一種具有凝集紅細(xì)胞能力的植物蛋白質(zhì)。它能與細(xì)胞膜上碳水化合物中的糖結(jié)合，從而發(fā)生凝集反應(yīng)。雖然植物凝集素是一種蛋白質(zhì)，但是對(duì)于腸道中的蛋白質(zhì)水解卻有抑制作用。它們的生物學(xué)作用體現(xiàn)在破壞小腸的新陳代謝和對(duì)小腸絨毛形態(tài)上的破壞。有報(bào)道稱，如果飼料中含有較高濃度（60%）的大豆蛋白，或者往飼料中加入了一定量植物凝集素，再用這些飼料飼喂鮭魚和虹鱒魚，那么經(jīng)免疫組織化學(xué)分析后，就會(huì)發(fā)現(xiàn)有植物凝集素結(jié)合在小腸絨毛的上皮細(xì)胞上，這預(yù)示著當(dāng)魚飼料中含有一定量的大豆蛋白時(shí)，植物凝集素與腸道上皮的結(jié)合是腸道產(chǎn)生病理變化的原因（Buttle 等，2001）。

2.4 非淀粉多糖 非淀粉多糖（NSPs）能與膽汁酸結(jié)合，且由于本身分子之間相互作用形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，限制了腸道中的消化酶和其他物質(zhì)的的作用（Storebakken 等，1998），因此非淀粉多糖與寡糖一起起作用，降低了脂肪的消化率，同時(shí)增加了魚糞的含水量，從而限制了魚對(duì)水的利用（Refstie等，1999；Storebakken 等，1998）。

3 抗?fàn)I養(yǎng)因子消除方法

3.1 物理法 物理方法包括加熱處理方法（擠壓膨化、蒸汽、微波和炒烤等）、機(jī)械加工方法以及水處理法。物理方法能較大程度地鈍化熱不穩(wěn)定抗?fàn)I養(yǎng)因子，如蛋白酶抑制因子。通過加工工藝的改進(jìn)，一般能使得熱不穩(wěn)定抗?fàn)I養(yǎng)因子降到水產(chǎn)動(dòng)物能夠耐受的水平。目前研究最多的方法是擠壓膨化。Cheng和Hardy（2003）用擠壓膨化技術(shù)對(duì)豆粕、大麥、玉米麩質(zhì)和小麥進(jìn)行了處理，并制成膨化飼料飼喂虹鱒魚，試驗(yàn)結(jié)果表明，擠壓膨化處理過程可以顯著提高干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪的消化率，改善礦物質(zhì)元素和能量的利用率。Allan和Booth（2004）運(yùn)用擠壓膨化技術(shù)對(duì)豌豆、豆粕、羽扇豆和菜籽餅進(jìn)行了處理，制成飼料后對(duì)銀鱸（Bidyanus bidyanus）進(jìn)行飼喂并觀測(cè)各種飼料原料的消化率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)擠壓膨化對(duì)上述幾種植物飼料原料消化率影響效果不一：改善效果最好的是豌豆，其次是豆粕，對(duì)羽扇豆無顯著影響，而對(duì)菜籽餅的消化率卻有負(fù)面效果。Venou等（2006）研究了經(jīng)擠壓膨化處理的豆粕對(duì)兩種不同大小金頭鯛（Sparus aurata）蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化效率和飼料轉(zhuǎn)化效率的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)經(jīng)處理后的豆粕能顯著改善大魚的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化效率和飼料轉(zhuǎn)化效率，但對(duì)于小魚，只是改善了蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化效率，對(duì)飼料轉(zhuǎn)化效率無顯著影響。同時(shí)，他們也觀測(cè)到豆粕經(jīng)膨化處理能明顯提高胰蛋白酶的活性。

一般認(rèn)為，在擠壓膨化處理過程中如果溫度過高，會(huì)對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)造成一定量的損失。因此，尋求適當(dāng)?shù)臄D壓膨化處理方式，也是目前的一個(gè)研究熱點(diǎn)。Romarheim等（2005）用濕式擠壓膨化法對(duì)兩種不同的豆粕原料進(jìn)行處理，以制成飼料飼喂大西洋鮭魚。一種豆粕是脫脂豆粕，另一種是經(jīng)溫?zé)崽幚淼亩蛊?。結(jié)果說明擠壓膨化不會(huì)明顯改變飼料的氨基酸組成，也不會(huì)影響豆粕中的氨基酸消化率，但是兩種豆粕中的胰蛋白酶抑制劑降低76%。據(jù)此，作者認(rèn)為擠壓膨化處理能夠有效地去除胰蛋白酶抑制劑，同時(shí)這種處理方法對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)造成的損失也是很小的，是比較溫和的處理方法。

以擠壓膨化處理為代表的熱處理方法能有效地將熱不穩(wěn)定抗?fàn)I養(yǎng)因子降低到魚能夠耐受的水平，但是對(duì)于熱穩(wěn)定抗?fàn)I養(yǎng)因子的處理效果有限，而且相對(duì)來說處理成本較高。

3.2 生物學(xué)方法 生物學(xué)的處理方法是較為傳統(tǒng)的方法，近年來由于其具有處理效率高、成本低、沒有殘留問題，應(yīng)用比較安全，對(duì)飼料營養(yǎng)成分的影響和破壞也較小等獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)，正越來越引起人們的重視。生物學(xué)方法包括微生物發(fā)酵、酶制劑處理、植物育種和發(fā)芽處理等方法，本文將只討論微生物發(fā)酵和酶制劑處理法。

3.2.1 微生物發(fā)酵 微生物發(fā)酵法主要是利用微生物發(fā)酵產(chǎn)生的各種酶類來消除原料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子，如在發(fā)酵過程中可產(chǎn)生水解酶、發(fā)酵酶和呼吸酶等，因此可以有效地去除蛋白酶抑制因子，也能去除植物蛋白原料中對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)和健康的產(chǎn)生負(fù)面影響的一些碳水化合物，如非淀粉多糖和不可消化寡糖。由于在發(fā)酵過程中，微生物還能將植酸轉(zhuǎn)化為細(xì)胞中的有機(jī)鹽，因此也能有效地去除植酸。除了能鈍化多種抗?fàn)I養(yǎng)因子之外，發(fā)酵還能對(duì)營養(yǎng)組分進(jìn)行體外降解，提高了各營養(yǎng)成分的消化吸收率，也可明顯提高飼料原料的適口性。此外，在發(fā)酵過程中，微生物大量繁殖，把部分大豆原料轉(zhuǎn)化為菌體蛋白，改善了蛋白質(zhì)的品質(zhì)。如Hong等（2004）用米曲霉GB-107發(fā)酵生豆粕并對(duì)發(fā)酵后的豆粕與經(jīng)別的方法處理的豆粕在營養(yǎng)價(jià)值上進(jìn)行了對(duì)比，結(jié)果表明，發(fā)酵過程在不改變必需氨基酸組成的情況下能增加10%的粗蛋白質(zhì)，還能消除豆粕中的大部分胰蛋白酶抑制劑，以及增加小肽的含量。Lampart-Szczapa等（2006）報(bào)道，經(jīng)乳酸發(fā)酵處理后的羽扇豆籽具有較多的可溶性蛋白。

關(guān)于發(fā)酵處理后植物蛋白原料對(duì)魚類的影響有許多報(bào)道。Shimeno等（1994）用宇佐美曲霉對(duì)溶劑卒取的豆粕進(jìn)行發(fā)酵，但結(jié)果由于得到的發(fā)酵豆粕物理特性較差，因此在隨后進(jìn)行的魚類養(yǎng)殖試驗(yàn)中未得出正確的評(píng)價(jià)結(jié)果。Mukhopadhyay和Ray（1999）報(bào)道，乳酸菌發(fā)酵處理極大地改善了用于飼喂南亞野鯪的芝麻籽餅營養(yǎng)價(jià)值。乳酸菌在以后的發(fā)酵研究過程中逐漸成為一種常用的菌種。 Skrede等（2003、2002、2001）用乳桿菌成功地降低了小麥餅和大麥餅中的非淀粉碳水化合物的水平，而且發(fā)現(xiàn)在膨化飼料中，用發(fā)酵法處理過的谷物來替代未經(jīng)發(fā)酵處理的谷物，可以顯著提高大西洋鮭魚對(duì)淀粉、油脂和能量的表觀消化率（Skrede 等，2002）。Refstie 等（2005）用乳酸菌對(duì)豆粕進(jìn)行處理，并作為蛋白質(zhì)來源飼喂大西洋鮭魚，結(jié)果證實(shí)了乳酸菌發(fā)酵能有效去除豆粕中的蛋白酶抑制因子和不可消化碳水化合物，同時(shí)部分去除飼料中限制脂質(zhì)吸收的因子，改善了豆粕的營養(yǎng)價(jià)值。微生物發(fā)酵不僅能降低非淀粉碳水化合物水平，而且能夠顯著降低植酸的含量。如上述研究也證實(shí)了乳酸菌發(fā)酵能降低谷物 （Skrede等，2003）和芝麻籽餅（Skrede 等，2001）中的植酸含量。

另一方面，F(xiàn)orde-Skjarvik等（2006）的研究表明，用經(jīng)生物學(xué)方法處理的豆粕部分替代魚粉飼喂鱈魚仍然會(huì)降低粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、能量和幾乎所有氨基酸的消化率。Refstie等（2006b）也得出了相同的結(jié)果，即鱈魚（Gadus morhua）氨基酸和脂肪的消化率會(huì)受到經(jīng)生物學(xué)方法處理的豆粕的抑制，但是他們也觀察到鱈魚生長(zhǎng)的體成分無顯著變化。原因認(rèn)為是鱈魚的消化道具有較好的適應(yīng)能力，能通過結(jié)構(gòu)的改變來適應(yīng)豆粕料（Refstie等，2006b）。

3.2.2 酶處理法 酶制劑處理法是應(yīng)用酶制劑對(duì)原料進(jìn)處理，利用酶來消除飼料原料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子，如當(dāng)前應(yīng)用較為廣泛的是植酸酶，它能水解植酸從而破壞其抗?fàn)I養(yǎng)作用。但是酶制劑在飼料原料加工處理過程中易受高溫高壓的影響，如在用擠壓膨化方式加工飼料的過程中，酶就會(huì)被破壞，達(dá)不到預(yù)期的效果。因此，目前的研究主要有以下三個(gè)方面，一是在植物蛋白質(zhì)原料中添加酶制劑，研究對(duì)魚生長(zhǎng)的影響；二是從魚類所需最適添加量方面進(jìn)行研究；最后一個(gè)方面研究如何使用酶制劑才能達(dá)到最好的使用效果，即加工處理過程中的使用方法。

使用植物蛋白源時(shí)，如果添加一定量的酶制劑，往往能夠改善魚類的生長(zhǎng)性能和對(duì)礦物質(zhì)元素的利用。Cheng和Hardy（2002）證實(shí)往大麥、菜籽餅、小麥和小麥粗粉中添加了500 FTU/kg的植酸酶能顯著提高虹鱒魚對(duì)Ca、Mg、Mn、總磷和植酸磷的消化率，以及總能的利用率。另有Vielma等 （2004）證實(shí)植酸酶能改善虹鱒魚對(duì)磷的利用率，提高蛋白質(zhì)的效率。Saijadi和Carter（2004b）就菜籽餅添加植酸酶后對(duì)鮭魚利用磷的效率進(jìn)行了研究，得到了較為相似的結(jié)果，即植酸酶能夠改善磷的利用率，因此，減少了磷的浪費(fèi)。同一作者也證實(shí)了植酸酶通過限制植酸對(duì)蛋白質(zhì)的影響，從而改善鮭魚的生長(zhǎng)性能 （Sajjadi和 Carter，2004a）。 Debnath 等（2005a、2005b）也有類似的研究，他們證實(shí)了植酸酶對(duì)Pangasius pangasius生長(zhǎng)性能和磷利用的正面效果。Ai等（2007）除了對(duì)植酸酶的作用進(jìn)行了研究，還對(duì)非淀粉多糖酶的作用進(jìn)行了探討，觀察到非淀粉多糖酶也能改善石首魚（Lateolabrax japonicus）的生長(zhǎng)和飼料利用率。

飼料原料如果添加過量酶制劑，會(huì)擾亂魚類消化道的正常消化機(jī)能而產(chǎn)生不良反應(yīng)。因此確定合適的酶制劑使用量也是一個(gè)重要的研究?jī)?nèi)容。Yan等（2002）在斑點(diǎn)叉尾 （Ictalurus punctatus）的飼料添加1000 FTU/kg的植酸酶，結(jié)果觀察到骨骼中Ca、P、Mg和Mn的含量顯著提高。Debnath等（2005b）的研究結(jié)果表明，在鯰（Pangasius pangasius）飼料中500 FTU/kg植酸酶添加量能夠促進(jìn)魚的生長(zhǎng)和飼料利用率。Biswas等（2007）也觀察到2000 FTU/kg的植酸添加量能夠減少磷流失，促進(jìn)魚體的生長(zhǎng)。酶制劑在飼料原料加工處理過程易受高溫高壓的影響，如擠壓膨化加工處理飼料時(shí)，酶就會(huì)被破壞，達(dá)不到預(yù)期的效果。因此酶制劑使用時(shí)的溫度、濕度和持續(xù)時(shí)間是非常關(guān)鍵的因素。Denstadli等（2006b）探討了不同溫度、濕度和持續(xù)時(shí)間對(duì)酶制劑處理效果的影響，結(jié)果表明，在溫度為45℃，濕度為45%的條件下，持續(xù)處理45 min時(shí)是效果最好的，此時(shí)小麥和豆粕中的植酸能夠降低86%。

4 結(jié)語

在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中，植物蛋白作為魚粉的替代物，正越來越引起人們的重視。由于植物蛋白原料中含有抗?fàn)I養(yǎng)因子，因此，與植物蛋白利用效果密切相關(guān)的原料處理技術(shù)顯得尤其重要。擠壓膨化法、微生物發(fā)酵法和酶制劑處理法是主要植物蛋白原料的處理方法，也是目前較為熱門的三種方法，建議今后的研究在繼續(xù)完善處理各種工藝的基礎(chǔ)上，結(jié)合多種處理方法，以取得最好的處理效果。

[1]Ai Q，Mai K，Zhang W，et al.Effects of exogenous enzymes（phytase，nonstarch polysaccharide enzyme）in diets on growth，feed utilization，nitrogen and phosphorus excretion of Japane se seabass，Lateolabrax japonicus[J].Comp Biochem Physiol A Mol Integr Physiol，147（2）：502 ～ 508

[2]Alarcon F J，Garcia-Carreno F L，del Toro M A N.Effect of plant protease inhibitors on digestive proteases in two fish species，Lutjanus argentiventris and L-novemfasciatus[J].Fish Physiol Biochem，2001，24：179 ～ 189.

[3]Alarcon F J，Moyano F J，Diaz M.Effect of inhibitors present in protein sources on digestive proteases of juvenile sea bream （Sparus aurata）[J].Aquat Living Resour，1999，12：233 ～ 238.

[4]Allan G L，Booth M A.Effects of extrusion processing on digestibility of peas，lupins，canola meal and soybean meal in silver perch Bidyanus bidyanus（Mitchell）diets[J].Aquac Res，2004，35：981 ～ 991.

[5]Biswas A K，Kaku H，Ji S C，et al.Use of soybean meal and phytase for partial replacement of fish meal in the diet of red sea bream[J].Aquaculture，2007，1 ～ 4：284 ～ 291.

[6]Buttle L G，Burrells A C，Good J E，et al.The binding of soybean agglutinin （SBA）to the intestinal epithelium of Atlantic salmon，Salmo salar and Rainbow trout，Oncorhynchus mykiss，fed high levels of soybean meal[J].Vet Immunol Immunopathol，2001，80：237 ～ 244.

[7]Cheng Z J J，Hardy R W.Effects of extrusion processing of feed ingredients on apparent digestibility coefficients of nutrients for rainbow trout（Oncorhynchus mykiss）[J].Aquac Nutr，2003，9：77 ～ 83.

[8]Cheng Z J，Hardy R W.Effect of microbial phytase on apparent nutrient digestibility of barley，canola meal，wheat and wheat middlings，measured in vivo using rainbow trout （Oncorhynchus mykiss）[J].Aquac Nutr，2002，8：271～277.

[9]Chong A S C，Hashim R，Chow-Yang L，et al.Partial characterization and activities of proteases from the digestive tract of discus fish（Symphysodon aequifasciata）[J].Aquaculture，2002，203：321 ～ 333.

[10]Debnath D，Pal A K，Sahu N P，et al.Effect of dietary microbial phytase supplementation on growth and nutrient digestibility of Pangasius pangasius（Hamilton）fingerlings[J].Aquac Res，2005a，36：180 ～ 187.

[11]Debnath D，Sahu N P，Pal A K，et al.Mineral status of Pangasius pangasius（Hamilton）fingerlings in relation to supplemental phytase：absorption，wholebody and bone mineral content[J].Aquac Res，2005b，36：326 ～ 335.

[12]Denstadli V，Skrede A，Krogdahl A，et al.Feed intake，growth，feed conversion，digestibility，enzymeactivitiesand intestinalstructurein Atlantic salmon（Salmo salar L.）fed graded levels of phytic acid[J].Aquaculture，2006b，256：365 ～ 376.

[13]Denstadli V，Vestre R，Svihus B，et al.Phytate degradation in a mixture of ground wheat and ground defatted soybeans during feed processing：Effects of temperature，moisture level，and retention time in small-and medium-scale incubation systems[J].J Agric，F(xiàn)ood Chem，2006a，54：5887 ～ 5893.

[14]Dersjant-Li Y.The use of soy protein in aquafeeds[A].Cruz-Suarez L.E，Ricque-Marie D，Tapia-Salazar M，et al.Advances in Aquaculture Nutrition：Sixth International Symposium of Aquaculture Nutrition[C].Cancun，Quintana Roo，Mexico.2002.

[15]El-Sayed A F M，Nmartinez I，Moyano F J.Assessment of the effect of plant inhibitors on digestive proteases of nile tilapia using in vitro assays[J].Aquac Int，2000，8：403 ～ 415.

[16]FAO.Use of fish meal and fish oil in aquafeeds：further throuths on the fishmeal trap[A].M B N，U N，et al.FAO Fisheries Circular No.975[C].Roma，2002.61.

[17]Forde-Skjaervik O，Refstie S，Aslaksen M A，et al.Digestibility of diets containing different soybean meals in Atlantic cod （Gadus morhua）；comparison of collection methods and mapping of digestibility in different sections of the gastrointestinal tract[J].Aquaculture，2006，261：241 ～ 258.

[18]Francis G，Makkar H P S，Becker K.Antinutritional factors present in plant-derived alternate fish feed ingredients and their effects in fish[J].Aquaculture，2001，199：197 ～ 227.

[19]Helland S，Denstadli V，Witten P E，et al.Hyper dense vertebrae and mineral content in Atlantic salmon（Salmo salar L.）fed diets with graded levels of phytic acid[J].Aquaculture，2006，261：603 ～ 614.

[20]Hong K J，Lee C H，Kim S W.Aspergillus oryzae GB-107 Fermentation improves nutritional quality of food soybeans and feed soybean meals[J].J Med Food，2004，7：430 ～ 435.

[21]Krogdahl A，Lea T B，Olli J L.Soybean proteinase-inhibitors affect intestinal trypsin activities and amino-acid digestibilities in rainbow-trout（Oncorhynchus-mykiss）[J].Comp Biochem Physiol A，1994，107：215 ～ 219.

[22]Lampart-Szczapa E，Konieczny P，Nogala-Kalucka M，et al.Some functional properties of lupin proteins modified by lactic fermentation and extrusion[J].Food Chem，2006，96：290 ～ 296.

[23]Maitra S，Ramachandran S，Ray A K.In vitro assay of plant protease inhibitors from four different sources on digestive proteases of rohu，Labeo rohita（Hamilton），fingerlings[J].Aquac Res，2007，38：156 ～ 165.

[24]Makkar H P S，Becker K.Nutritional studies on rats and fish（carp Cyprinus carpio）fed diets containing unheated and heated Jatropha curcas meal of a non-toxic provenance[J].Plant Foods Hum Nutr，1999，53：183 ～ 192.

[25]Mukhopadhyay N，Ray A K.Effect of fermentation on the nutritive value of sesame seed meal in the diets for rohu，Labeo rohita（Hamilton），fingerlings[J].Aquac Nutr，1999，5：229 ～ 236.

[26]Olli J J，Hjelmeland K，Krogdahl A.Soybean trypsin inhibitors in diets for Atlantic salmon （Salmo salar L.）：effects on nutrient digestibilities and trypsin in pyloric caeca homogenate and intestinal content[J].Comp Biochem Physiol，1994，109 A：923 ～ 928.

[27]Refstie S，F(xiàn)orde-Skjaervik O，Rosenlund G，et al.Feed intake，growth，and utilisation of macronutrients and amino acids by 1-and 2-year old Atlantic cod（Gadus morhua）fed standard or bioprocessed soybean meal[J].Aquaculture，2006a，255：279 ～ 291.

[28]Refstie S，Landsverk T，Bakke-McKellep A M，et al.Digestive capacity，intestinal morphology，and microflora of 1-year and 2-year old Atlantic cod（Gadus morhua）fed standard or bioprocessed soybean meal[J].Aquaculture，2006b，261：269 ～ 284.

[29]Refstie S，Landsverk T，Bakke-McKellep A M，et al.Lactic acid fermentation eliminates indigestible carbohydrates and antinutritional factors in soybean meal for Atlantic salmon （Salmo salar）[J].Aquaculture，2005，246：331 ～345.

[30]Refstie S，Storebakken T，Roem A J.Feed consumption and conversion in Atlantic salmon （Salmo salar）fed diets with fish meal，extracted soybean meal or soybean meal with reduced content of oligosaccharides，trypsin inhibitors，lectins and soya antigens[J].Aquaculture，1998，162：301 ～ 312.

[31]Refstie S，Svihus B，Shearer K D，et al.Nutrient digestibility in Atlantic salmon and broiler chickens related to viscosity and non-starch polysaccharide content in different soyabean products[J].Anim Feed Sci Tech，1999，79：331 ～345.

[32]Riche M，Garling D L.Effect of phytic acid on growth and nitrogen retention in tilapia Oreochromis niloticus L[J].Aquac Nutr，2004，10：389 ～ 400.

[33]Romarheim O H，Aslaksen M A，Storebakken T，et al.Effect of extrusion on trypsin inhibitor activity and nutrient digestibility of diets based on fish meal，soybean meal and white flakes[J].Arch Anim Nutr，2005，59：365 ～ 375.

[34]Rumsey G L.Effects of graded levels of soybean trypsin inhibitor activity（using AOCS，1983 method）on growth of rainbow trout，F(xiàn)isheries and Wildlife Research and Development 1990/1991[M].U S Dep.of Interior，F(xiàn)ish and Wildlife Service，Washington，DC，1991.54.

[35]Sajjadi M，Carter C G.Dietary phytase supplementation and the utilisation of phosphorus by Atlantic salmon（Salmo salar L.）fed a canola-meal-based diet[J].Asia Pac J Clin Nutr，2004b，240：417 ～ 431.

[36]Sajjadi M，Carter C G.Effect of phytic acid and phytase on feed intake，growth，digestibility and trypsin activity in Atlantic salmon （Salmo salar L.）[J].Aquac Nutr，2004a，10：135 ～ 142.

[37]Shimeno S，Aashimoto A，Ando Y，et al.Improving the nutritive value of defatted soybean meal through purification and fermentaton for fingerling yellowtail[J].Susanzoshoku，1994，42：247 ～ 252.

[38]Skrede G，Herstad O，Sahlstrom S，et al.Effects of lactic acid fermentation on wheat and barley carbohydrate composition and production performance in the chicken[J].Anim Feed Sci Tech，2003，105：135 ～ 148.

[39]Skrede G，Sahlstrom S，Skrede A，et al.Effect of lactic acid fermentation of wheat and barley whole meal flour on carbohydrate composition and digestibility in mink（Mustela vison）[J].Anim Feed Sci Tech，2001，90：199 ～ 212.

[40]Skrede G，Storebakken T，Skrede A，et al.Lactic acid fermentation of wheat and barley whole meal flours improves digestibility of nutrients and energy in Atlantic salmon（Salmo salar L.）diets[J].Aquaculture，2002，210：305 ～321.

[41]Storebakken T，Austreng E.Binders in fish feeds.2.Effect of different alginates on the digestibility of macronutrients in Rainbow-trout[J].Aquaculture，1987，60：121 ～ 131.

[42]Storebakken T，Refstie S，Ruyter B.Soy in Animal Nutrition[A].Drackley J K.Federation of Animal Science Societies[C].Agricultural university of Norway，Aas，2000.127 ～ 170.

[43]Storebakken T，Shearer K D，Roem A J.Availability of protein，phosphorus and other elements in fish meal，soy-protein concentrate and phytasetreated soy-protein-concentrate-based diets to Atlantic salmon，Salmo salar[J].Aquaculture，1998，161：365 ～ 379.

[44]Sveier H，Kvamme B O，Raae A J.Growth and protein utilization in Atlantic salmon （Salmo salar L.）given a protease inhibitor in the diet[J].Aquac Nutr，2001，7：255 ～ 264.

[45]Tacon A G J.Fish meala nd fish oil use in aquaculture：globle overview and propects for substitution[A].Lyons T P [C].Jaccques K A.Nutritional biotechnology in the feed and food industries.Procedings of Alltech's twentieth annual symposium.Nottingham University Press，Nottingham.2004.

[46]Venou B，Alexis M N，F(xiàn)ountoulaki E，et al.Effects of extrusion and inclusion level of soybean meal on diet digestibility，performance and nutrient utilization of gilthead sea bream（Sparus aurata）[J].Aquaculture，2006，261：343 ～356.

[47]Vielma J，Ruohonen K，Gabaudan J，et al.Top-spraying soybean mealbased diets with phytase improves protein and mineral digestibilities but not lysine utilization in rainbow trout，Oncorhynchus mykiss （Walbaum）[J].Aquac Res，2004，35：955 ～ 964.

[48]Yan W B，Reigh R C，Xu Z M.Effects of fungal phytase on utilization of dietary protein and minerals，and dephosphorylation of phytic acid in the alimentary tract of channel catfish Ictalurus punctatus fed an all-plant-protein diet[J].J World Aquac Soc，2002，33：10 ～ 22.