日糧不同硒水平對2～3月齡肉兔生長性能、抗氧化指標和肉質的影響

張艷艷 李福昌

(山東農業(yè)大學動物科技學院，泰安271018)

隨著生命科學的發(fā)展，人們發(fā)現眾多的微量元素參與了生命活動的過程和營養(yǎng)物質的代謝，顯示了其突出的重要性。硒是動物機體內重要的必需微量元素，它的不足或缺乏可嚴重影響畜禽的生命活動和生產性能。硒是谷胱甘肽過氧化物酶的組成成分[1]，具有提高生產性能、改善肉品品質和提高機體抗氧化能力的作用。硒在其他畜禽生產上的研究和應用已經相當廣泛，但由于生長肉兔的營養(yǎng)需要量的研究起步較晚，科研工作落后于其他動物，并且生長肉兔硒的添加量問題一直沒有明確的規(guī)定。為此，本試驗以生長肉兔為研究對象，在其他各種營養(yǎng)素滿足需要的情況下，探討日糧添加不同水平硒對其生長性能、抗氧化指標和肉質的影響，從而推斷肉兔生長最佳的硒添加水平，并為我國制定肉兔飼養(yǎng)標準提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗動物及飼養(yǎng)管理

選取體重(1 810±149)g的2月齡生長新西蘭肉兔100只，公母各占1/2，按照體重及性別分為5組，每組20個重復。試驗兔單籠飼養(yǎng)，試驗期間日喂食2次，采用常規(guī)飼養(yǎng)管理和免疫程序，自然采光、通風。自由采食，自由飲水，3～5 d消毒兔舍1次。

1.2 試驗日糧及試驗設計

基礎日糧參照NRC(1977)[2]家兔飼養(yǎng)標準配制而成(表1)。試驗分為5組，在基礎日糧的基礎上添加亞硒酸鈉，折合硒的添加量分別為0、0.15、0.30、0.45和 0.60 mg/kg，其中 0 mg/kg為對照組。用制粒機將日糧壓制成直徑4～6 mm的顆粒飼料，儲存在通風干燥避光處備用。5組試兔分別飼喂以上5種日糧，預試期7 d，正試期23 d。

表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)Table 1 Composition and nutrient levels of basal diet(air-dry basis，%)

1.3 樣品采集與制備

在試驗開始后的第30天早晨空腹稱重，然后立即心臟采血 10 mL，室溫避光靜置 30 min后，3 000 r/min離心10 min，分離所得血清分裝于Eppendorf管中，置于-20℃下冷凍保存待測。每組隨機抽取8只試兔，將其頸椎錯位致死，屠宰，于背最長肌處采集肌肉和肝臟各2 g放入液氮罐冷凍，然后轉移至-80℃冰箱中保存至分析(酶活);另取肝臟10 g、背腰最長肌10 g于-20℃避光保存至分析(硒濃度)?，F場測肌肉pH和失水力。

1.4 測定指標和方法

1.4.1 生長性能

測定2月齡和3月齡試兔的體重，并統(tǒng)計2～3月齡的喂料量，計算平均日采食量(average daily intake，ADI)、平均日增重(average daily gain，ADG)和料肉比(feed/gain，F/G)。

1.4.2 抗氧化指標

血清、肝臟和肌肉中谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPx)活性、總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、過氧化氫酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量測定所用試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供，在UV-2450型紫外-可見分光光度計上測定。

1.4.3 肌肉品質及硒濃度

失水率:宰后2 h內取第7腰椎處背腰最長肌(300±10)g(W1)，上下層墊有16層濾紙吸水，用鋼環(huán)允許膨脹壓縮儀加壓2.25 kg，持續(xù)恒定加壓5 min后，迅速撤去壓力，立即稱壓后重(W2)，即得失水率(%)=(W1-W2)/W1×100。

剪切力:采集的新鮮肉樣放于0～4℃冰箱經48 h貯存熟化后取出，將溫度計插入肌肉中心部位，于恒溫水浴鍋內80℃加熱，肌肉中心的溫度達到60℃時停止加熱，取出肉樣，將肉樣順著肌肉纖維的方向修剪成直徑為1.12 cm的圓柱形肌肉塊，用C-LM型肌肉嫩度計測定剪切力(kg)。

pH:于宰后 45 min和24 h用 Mettler MP 120型酸堿度計測背腰最長肌第5肋骨處的pH，將探頭插入肌肉3 mm讀數。

滴水損失:從背腰最長肌取2 cm×0.5 cm×0.5 cm肉樣，將肉樣裝入充氣塑料袋中，4℃冰箱吊掛貯存24 h，用貯存前(W1)和貯存后(W2)的重量計算，滴水損失(%)=(W1-W2)/W1×100。

飼料和肌肉硒濃度:根據GB/T5009.93—2003在MPF-4熒光分光光度計上測定硒的濃度。

1.5 數據處理

用SAS 8.02統(tǒng)計軟件中的GLM進行數據的方差分析，用Duncan氏法進行數據的多重比較。

2 結 果

2.1 日糧不同硒水平對2～3月齡肉兔生長性能的影響

由表2可以看出，在初始體重無顯著差異的情況下，日糧不同硒水平對 ADI影響不顯著(P=0.120 2);日糧不同硒水平對ADG影響顯著(P=0.019 4)，其中0.15和0.30 mg/kg添加組顯著高于對照組(P ＜0.05)，0.15、0.30、0.45 和 0.60 mg/kg添加組之間以及對照組和0.45、0.60 mg/kg添加組之間無顯著差異(P＞0.05);日糧不同硒水平對F/G影響顯著(P=0.040 1)，0.15和0.30 mg/kg添加組顯著低于對照組(P＜0.05)，0.15、0.30、0.45和0.60 mg/kg添加組之間以及對照組和 0.45、0.60 mg/kg添加組之間無顯著差異(P＞0.05)。

表2 日糧不同硒水平對2～3月齡肉兔生長性能的影響Table 2 Effects of different dietary selenium levels on growth performance of meat rabbits from 2 to 3 months of age

2.2 日糧不同硒水平對2～3月齡肉兔抗氧化指標的影響

日糧不同硒水平對肝臟GSH-Px和SOD活性影響顯著(P=0.011 4，P=0.032 3)，其中0.60 mg/kg添加組顯著高于其他組(P＜0.05);日糧不同硒水平對肝臟CAT活性影響顯著(P=0.043 4)，其中0.30 mg/kg添加組顯著高于對照組(P＜0.05);日糧不同硒水平顯著影響肝臟MDA含量(P=0.029 1)，0.30和0.45 mg/kg添加組顯著低于對照組，各添加組之間差異不顯著(P＞0.05)。肝臟T-AOC受日糧不同硒水平影響不顯著(P=0.669 9)。

表3 日糧不同硒水平對2～3月齡肉兔肝臟抗氧化指標的影響Table 3 Effects of different dietary selenium levels on liver antioxidant indices of meat rabbits from 2 to 3 months of age(U/mg prot)

由表 4可以看出，日糧不同硒水平對血清GSH-Px活性影響極顯著(P=0.000 9)，其中0.30和0.45 mg/kg添加組極顯著高于對照組和0.15、0.60 mg/kg添加組(P＜0.01)，0.30和0.45 mg/kg添加組之間以及對照組和0.15、0.60 mg/kg添加組之間無顯著差異(P＞0.05);血清SOD活性受日糧不同硒水平影響顯著(P=0.014 9)，0.45 mg/kg添加組顯著高于其他組(P＜0.05);日糧不同硒水平顯著影響血清T-AOC(P=0.037 6)，各添加組顯著高于對照組(P＜0.05)。日糧不同硒水平對血清CAT活性和MDA含量影響均不顯著(P=0.547 7，P=0.988 7)。

表4 日糧不同硒水平對2～3月齡肉兔血清抗氧化指標的影響Table 4 Effects of different dietaryselenium levels on serum antioxidant indices of meat rabbits from 2 to 3 months of age (U/mL)

日糧不同硒水平對肌肉GSH-Px活性影響極顯著(P＜0.000 1)，其中0.45和0.60 mg/kg添加組極顯著高于對照組和0.15、0.30 mg/kg添加組(P＜0.01)，0.45和0.60 mg/kg添加組之間以及對照組和0.15、0.30 mg/kg添加組之間差異不顯著(P＞0.05);日糧不同硒水平顯著影響肌肉MDA含量(P=0.019 0)，其中對照組顯著高于0.45和0.60 mg/kg添加組(P＜0.05)，各添加組之間以及對照組和0.15、0.30 mg/kg添加組之間差異不顯著(P＞0.05);肌肉SOD活性和T-AOC受日糧不同硒水平影響均不顯著(P=0.900 3，P=0.379 1)。

表5 日糧不同硒水平對2～3月齡肉兔肌肉抗氧化指標的影響Table 5 Effects of different dietary selenium levels on muscle antioxidant indices of meat rabbits from 2 to 3 months of age (U/mg prot)

2.3 日糧不同硒水平對2～3月齡肉兔肉品質和肌肉硒含量的影響

由表6可以看出，日糧不同硒水平對肌肉失水率影響顯著(P=0.032 5)，其中0.15 mg/kg添加組顯著低于對照組和 0.60 mg/kg添加組(P＜0.05);日糧不同硒水平對肌肉滴水損失影響顯著(P=0.004 2)，其中 0.15、0.30和 0.45 mg/kg添加組極顯著低于對照組和0.60 mg/kg添加組(P＜0.01);剪切力受日糧不同硒水平影響顯著(P=0.028 5)，各添加組均顯著低于對照組(P＜0.05)，各添加組之間差異不顯著(P＞0.05);日糧不同硒水平對45 min和24 h肌肉pH均沒有顯著的影響(P=0.473 4，P=0.305 1)。日糧不同硒水平對肌肉硒含量影響顯著(P=0.005 4)，0.30、0.45和0.60 mg/kg添加組極顯著高于對照組(P＜0.01)，0.30 mg/kg添加組極顯著高于0.15 mg/kg添加組(P＜0.01)。

表6 日糧不同硒水平對2～3月齡肉兔肉品質和肌肉硒含量的影響Table 6 Effects of different dietary selenium levels on meat quality and muscle selenium content of meat rabbits from 2 to 3 months of age

3 討 論

3.1 日糧不同硒水平對2～3月齡肉兔生長性能的影響

硒是動物生長必需的微量元素，它具有重要的生物學功能;硒與Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型脫碘酶活性有密切的關系，能通過影響其生物活性而介導甲狀腺激素的形成和降解，調節(jié)甲狀腺激素的代謝平衡從而提高基礎代謝率[3]，增加組織細胞耗氧率，維持正常的生理功能。甲狀腺激素的化學本質是含碘的氨基酸，對動物代謝起較大的促進作用，增加基礎代謝，促進糖、蛋白質、脂、鹽代謝。當機體硒缺乏時，甲狀腺激素合成嚴重受阻，從而抑制動物生長[4]。另外，硒通過參與谷胱甘肽過氧化物酶的合成，防止動物細胞膜的脂質結構遭受破壞，保護細胞膜的完整性，也可對生長造成影響。本研究表明，家畜日糧中添加不同劑量的硒均可不同程度的提高體增重，改善飼料利用率。

本試驗研究表明，日糧不同水平硒對ADI沒有顯著影響，說明添加硒并沒有對ADI造成影響;在初始體重無顯著差異的情況下，日糧添加0.15 mg/kg的硒可增加2～3月齡生長肉兔的ADG和改善飼料轉化效率，隨著日糧硒水平的增高，生長性能趨于降低，說明硒具有一定的劑量效應。該結果與尹兆正等[5]在生長肉豬以及尹兆正等[6]和胥保華[7]在生長肉雞上的結果相似，張春香等[8]在山羊以及高愛琴等[9]在0～3周齡肉仔雞上也得出了相似的結果。但Vignola等[10]和Skrivanova等[11]在山羊和小牛上的研究顯示日糧添加不同水平硒對日采食量、日增重無顯著影響，這可能與畜種不同或基礎日糧中的硒含量有關。

3.2 日糧不同硒水平對2～3月齡肉兔抗氧化指標的影響

GSH-Px、SOD、CAT是動物機體主要的抗氧化酶，它們的含量和活性影響機體內的活性氧自由基水平以及脂質過氧化終末代謝產物MDA。T-AOC是衡量機體總抗氧化能力的指標，它的高低代表機體的總抗氧化能力。硒是GSH-Px的組成成分，缺硒直接導致GSH-Px合成量下降以及GSH-Px活性降低。本試驗結果與Mahan等[12]日糧中添加硒能增加母豬谷胱甘肽過氧化物酶的活性的結果一致。雖然硒不是T-AOC和CAT的組成成分，但動物缺硒狀態(tài)下組織合成各種抗氧化酶的機能下降，使組織內產生的O2-和H2O2不能及時清除，導致脂質過氧化增強，機體活性氧自由基水平和MDA含量顯著升高[13]。

本研究表明，日糧添加硒尤其是高劑量的硒對各組織GSH-Px、SOD和CAT活力有不同程度的改善，同時使組織的MDA含量降低，提高了組織抗氧化能力。

3.3 日糧不同硒水平對2～3月齡肉兔肉品質和肌肉硒含量的影響

硒對肉品質的作用主要是通過影響抗氧化功能實現的。硒對肌肉的抗氧化保護可以減少脂質過氧化，保護細胞膜的結構和功能正常。Torrent[14]報道，在豬飼料中加入0.3 mg/kg硒可減少PSE肉的發(fā)生，且豬肉味較好。失水率、滴水損失和剪切力均可在一定程度上反映肉的品質。Edens等[15]比較了不同硒源和不同添加水平對雞肉滴水損失的影響，結果表明添加0.3 mg/kg硒組較添加0.1 mg/kg硒組滴水損失明顯降低。張巧娥等[16]對不同硒水平對豬肌纖維直徑、數量和肌節(jié)長度等指標的影響進行了研究，結果表明，硒水平對以上指標均有不同程度的影響，在飼糧中添加0.30、0.45和0.60 mg/kg硒時肌肉保水性、嫩度較好，且以添加0.30 mg/kg時為最好。本試驗結果顯示，日糧中添加不同水平的硒對肌肉失水率、滴水損失和剪切力有顯著影響，日糧添加0.15 mg/kg的硒可降低3月齡生長肉兔肌肉的失水率和滴水損失。

組織中的硒含量也可以反映機體的硒營養(yǎng)狀態(tài)，一般情況下，各組織的硒濃度會隨著日糧硒含量的增加而提高。本試驗表明，硒在肌肉中的濃度隨日糧硒添加水平的增加先增加而后穩(wěn)定，以0.30 mg/kg添加組含量最高，當硒添加水平高于0.30 mg/kg時肌肉中硒濃度基本穩(wěn)定。這可能與動物對硒的需求量有關，低劑量時動物為滿足自身需要而提高吸收率，從而顯示出較高的硒存留率，而當硒達到一定水平后，動物則通過調整對硒的吸收，保證機體的健康生長。

4 結 論

①日糧添加適宜水平的硒能夠改善2～3月齡生長肉兔的增重速度、飼料轉化效率和肉品品質。

②日糧添加硒(≥0.15 mg/kg)有利于改善2～3月齡生長肉兔的抗氧化能力。

③綜合生長和肉質指標，2～3月齡生長肉兔日糧適宜的硒添加量為0.15 mg/kg。

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