許亮亮
(南通市中醫(yī)院,江蘇 南通 226000)
近些年,隨著檢驗技術(shù)的飛速發(fā)展,全自動的尿沉渣分析儀逐漸地在醫(yī)院的檢驗科中得以應(yīng)用。由于全自動尿沉渣分析儀具有操作規(guī)范化、檢測的自動化、速度快、重復(fù)性好、一次可以檢測多個參數(shù)等優(yōu)點,被臨床廣泛應(yīng)用,UF-50尿沉渣分析儀采用的是流式細(xì)胞分析和熒光染色為一體的原理,能對尿液中的紅細(xì)胞自動計數(shù),但是我們在實際的工作中發(fā)現(xiàn)其對紅細(xì)胞的檢測存在著較高的假陽性率及假陰性率,我們對2000份尿標(biāo)本用UF-50尿沉渣分析儀和顯微鏡兩種方法進(jìn)行檢測并對檢測結(jié)果作比較分析,現(xiàn)報道如下。
1.1 儀器及試劑 Sysmex UF-50全自動尿沉渣分析儀及配套試劑,Olympus顯微鏡,LDD-2離 心機(jī)。
1.2 標(biāo)本 我院住院患者晨尿標(biāo)本2000份 。
1.3 質(zhì)控 UF-50尿 沉渣分析儀廠家提供的原裝質(zhì)控液,用質(zhì)控物對尿儀進(jìn)行質(zhì)量控制,保證儀器的工作性能良好、穩(wěn)定。
1.4 方法
1.4.1 UF-50尿沉渣分析儀檢測 用干凈的一次性塑料尿杯留取晨尿8 ml,儀器以自動進(jìn)模式檢測,同時做質(zhì)控。
1.4.2 顯微鏡檢測 將上述剩余的標(biāo)本以1500r/min離心5 min,棄上清液,保留 0.2 ml沉渣,輕輕混勻,用一次性吸管取1滴置于潔凈的載玻片上,加蓋蓋玻片,于低倍鏡下計數(shù)至少20個視野中的紅細(xì)胞數(shù),取平均值。判斷標(biāo)準(zhǔn)參照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》。以上操作均在1 h內(nèi)完成。
UF-50檢查[1]紅細(xì)胞正常范圍:0~24/μ l;顯微鏡檢查正常范圍紅細(xì)胞:0~3/高倍視野,兩種方法檢測紅細(xì)胞陽性結(jié)果對照。尿沉渣分析儀檢測:20000例,陽性520例,陽性率26.0%;顯微鏡檢測法:20000例,陽性342例,陽性率占 17.1%??芍?000例尿液標(biāo)本用UF-50尿沉渣分析儀檢測結(jié)果的陽性率均明顯高于顯微鏡檢測結(jié)果的陽性率。
2.2 UF-50型尿沉渣分析儀假陽性178例和假陰性40例結(jié)果分析 影響因素:結(jié)晶假陽性100例,占56.2%;酵母樣菌假陽性48例,占 27.0%;細(xì)菌假陽性20例,占 11.2%;其他假陽性10例,占 5.6%。紅細(xì)胞碎片假陰性25例,占 62.5%;影紅細(xì)胞假陰性 10例,占25.0%;其他假陰性 5例,占12.5% 。
造成UF-50檢查結(jié)果假陽性的178份標(biāo)本中,經(jīng)鏡檢確認(rèn)100份由草酸鈣或其他結(jié)晶引起的紅細(xì)胞計數(shù)增加,48份因酵母樣菌引起,20份因大量細(xì)菌引起,10份因精子、卵磷脂小體或脂肪滴等引起,而造成假陰性的40份標(biāo)本有25份是由紅細(xì)胞碎片引起的,10份由影紅細(xì)胞引起的,其他因素5例。
UF-50全自動尿沉渣分析儀是目前測定尿液有形成分的先進(jìn)儀器,UF-50尿沉渣分析儀是采用流式細(xì)胞熒光散射強(qiáng)度和電阻抗變化的原理來對尿液中的有形成分進(jìn)行檢測[2]。該方法結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)和電阻抗原理,通過對細(xì)胞進(jìn)行熒光染色后,測定其熒光強(qiáng)度、熒光脈沖寬度、前向散射光強(qiáng)度及其脈沖寬度,從而對尿液中有形成分進(jìn)行精確計數(shù)及鑒別,但由于尿中有形成分復(fù)雜,有時對各種有形成分難以正確識別。造成UF-50尿沉渣分析儀假陽性的原因大致有以下幾種情況:紅細(xì)胞的形態(tài)大小、染色性與草酸鈣等結(jié)晶非常相似,在散射圖上兩者交叉分布,因此對紅細(xì)胞計數(shù)結(jié)果影響較大。酵母樣菌的散點分布介于紅細(xì)胞和白細(xì)胞之間,在大部分情況下儀器可以區(qū)分酵母樣菌與紅細(xì)胞,但仍有和紅細(xì)胞發(fā)生重疊的情況,還有由其他因素導(dǎo)致UF-50測定結(jié)果偏高,這些影響因素與文獻(xiàn)報道[3]一致。對40例假陰性標(biāo)本用顯微鏡鏡檢后發(fā)現(xiàn):尿液中存在紅細(xì)胞碎片、少量影紅細(xì)胞,可能是由于紅細(xì)胞碎片及影紅細(xì)胞相對于普通紅細(xì)胞而言其熒光染色敏感度下降,熒光強(qiáng)度弱而造成儀器漏檢。尿液中還存在一些并未被染色的紅細(xì)胞,主要是由某些特殊病例引起的,如接受過眼底熒光血管造影的患者,尿中有熒光染料,會明顯影響UF-50對紅細(xì)胞的檢測。
綜上所述,雖然UF-50有很多優(yōu)越性,但不能完全取代顯微鏡檢查,尿沉渣分析儀只能做為尿常規(guī)的過篩檢測。無論是陽性或是陰性的標(biāo)本,我們檢驗人員要本著對患者負(fù)責(zé)的態(tài)度,在顯微鏡下進(jìn)行復(fù)檢,為臨床的診斷、療效的觀察提供精確的證據(jù)。因此兩種方法聯(lián)合應(yīng)用,可以提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度,具有較高的臨床應(yīng)用價值。
[1] 葉應(yīng)嫵,王毓三.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第2版,南京:東南大學(xué)出版社,1997:133.
[2] 叢玉隆,馬駿龍.當(dāng)代尿液分析與臨床[M].北京:中國科學(xué)技術(shù)出版社,2000:5-12.
[3] 馬俊龍.尿液紅、白細(xì)胞定量不同方法的探討[J].臨床檢驗雜志,2006,24(5):348-350.