高效液相色譜法測定蛋糕中的梔子黃

陳艷華 于中軍

高效液相色譜法測定蛋糕中的梔子黃

陳艷華 于中軍

梔子甙是梔子黃的主要成分，因此以梔子甙為對照品，蛋糕中梔子黃經(jīng)提取凈化后，作為供試品，用高效液相色譜法測定，以保留時間定性，峰面積定量進行含量測定。

高效液相色譜法;梔子黃;梔子甙

梔子黃作為食品著色劑已經(jīng)列入GB 2760-1996食品添加劑使用衛(wèi)生標準，最大使用量每千克不得超過0.3 g，含量微小，故我們采用高效液相色譜法測量［1-6］，本方法精密度高，重現(xiàn)性好，靈敏，快速、準確且成本低可廣泛使用。

1 實驗儀器與試劑

1.1 儀器 島津LC-10ATvp高效液相色譜儀，高效液相色譜系統(tǒng):Water’s M501泵，U6K進樣器，島津RF-535。配備全波長紫外檢測器;小型粉碎機(FW100型北京中興偉業(yè)儀器有限公司生產(chǎn))，電熱恒溫水浴(HH·S型江蘇省紅旗醫(yī)療器械廠生產(chǎn))高效液相色譜操作條件色譜柱:Agilent HC-C185 μ 4.6×250 mm;柱溫30℃，紫外檢測器 檢測波長:240 nm;流動相:甲醇:水(35∶65);流速:0.8 ml/min試劑:甲醇，石油醚(60～90℃)，乙酸乙酯，三氯甲烷，以上試劑均為沈陽試劑五廠分析純梔子甙(來源:中國藥品生物制品檢定所 批號: 110749-200511)。

2 實驗步驟

2.1 標準溶液的配制 精密稱取13.25 mg梔子甙標準品置50 ml容量瓶中，用甲醇溶解，并用甲醇稀釋至刻度。過濾，精密量取5 ml濾液，置25 ml容量瓶中，即得27.5 μg/ml的梔子甙標準品。

分別吸取梔子甙標準溶液0，1.0，2.0，3.0，4.0 ml于10 ml容量瓶中，加甲醇定容至10 ml，即得0，2.25，5.5，8.25，11.0 μg/ml的梔子甙系列標準溶液。

2.2 供試品的配制 精密稱取21.0012 g無水蛋糕，放入250 ml的圓底燒瓶中，用100 ml石油醚加熱回流30 min，放冷至室溫。砂芯漏斗過濾，用石油醚洗滌殘渣5次，洗液并入濾液中，減壓濃縮石油醚提取液，殘渣放入通風櫥至無石油醚味。用甲醇提取3～5次，每次30 ml，直至提取液無梔子黃顏色，用砂芯漏斗過濾，濾液通過微孔濾膜過濾，濾液貯于冰箱備用。

2.3 含量測定 在實驗條件下，分別注入梔子甙標準使用液0，4，8，12，16 μl，進行HPLC分析，然后以峰面積對梔子甙濃度作標準曲線。再注入5 μl供試品處理液，進行HPLC分析，取其峰面積與標準比較，測得樣品中梔子甙含量。

3 實驗結(jié)果

本實驗梔子甙的檢測限為3.2 μg/ml，梔子黃色素濃度在0.15～0.25 g/kg范圍內(nèi)，回收率為 91.3%，相對標準差(RSD)%:1.6%。參考文獻

［1］沈榮光．山梔子中梔子苷、梔子黃色素的分離、純化及梔子苷的結(jié)構(gòu)鑒定．江南大學，2006．

［2］謝鳳霞，邱祖民，涂盛輝，謝心亮．吸附樹脂AB-8精制梔子黃色素的工藝研究．南昌大學學報(工科版)，2005，01．

［3］謝鳳霞，邱祖民，涂盛輝，等．浸提法與超聲波提取法提取梔子黃色素的比較．南昌大學學報(理科版)，2005，03．

［4］姚中銘．天然色素梔子黃提取、精制工藝及穩(wěn)定性的研究．天津輕工業(yè)學院，2000．

［5］劉華鋼，陳燕軍，毛?。咝б合嗌V法測定清火梔麥片中梔子苷的含量．中草藥，1998，12．

［6］周飛，李霞，曹佩雪，等．HPLC法測定茵陳蒿湯顆粒液與合煎液中梔子甙含量．貴州科學，2002，03．

Determination limit of gardenia yellow in cake by HPLC

CHEN Yan-hua，YU Zhong-jun．Si ping Institute Food and Drug Control，Jilin 36000，China136000，China

Gardenia yellow Gardenia glucoside is the main component，and therefore Geniposide as the reference substance，gardenia yellow cake purified by extraction，as for the test materials，high-performance liquid chromatography in order to retain time for qualitative，peak area for quantitative determination．

HPLC;Gdenia yellow;Gdenia glycosides

136000吉林省四平市食品藥品檢驗所